WWW.DOC.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Различные документы
 

Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 9 |

«IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006 Российская академия наук Уральское отделение Коми научный центр Институт ...»

-- [ Страница 4 ] --

Модель сахарного диабета воспроизводили путем внутрибрюшинного введения аллоксана в дозе 90 мг/кг ежедневно в течение четырех дней. Для эксперимента отбирались животные с уровнем глюкозы 16–22 ммоль/л. Исследуемые экстракты вводили в дозе 150 мг/кг внутрижелудочно в течение 14 дней. Оценивали следующие гемореологические параметры: вязкость крови и плазмы на ротационном гемовискозиметре АКР-2; агрегацию эритроцитов методом силлектометрии; деформируемость эритроцитов – методом эктацитометрии; концентрацию фибриногена в плазме фотометрическим методом Klauss;

гематокрит – методом центрифугирования.

Гемореологические показатели крыс с аллоксановым диабетом существенно отличались от показателей интактных животных. Так, в сравнении со значениями у интактных животных к 14-м суткам после воспроизведения аллоксанового диабета вязкость крови при скоростях сдвига 3-300 с-1 возрастала на 19-47 %. Агрегация эритроцитов повышалась на 45%, концентрация фибриногена в плазме – на 44%. Деформационные свойства эритроцитов в диапазоне скоростей сдвига 90-890 с-1 уменьшались на 17-34 %.

Курсовое применение ЭЛС способствовало нормализации гемореологических показателей, что выражалось в снижении к 14-м суткам после создания диабета вязкости крови в диапазоне скоростей сдвига 3-300 с-1 на 5-22 %. В этот период ЭСВ также достоверно снижал вязкость крови на 11-26 % во всем исследуемом диапазоне скоростей сдвига.

Снижение вязкости крови при использовании ЭЛХ носило характер статистической достоверности лишь в диапазоне низких скоростей сдвига.

При применении ЭЛС деформируемость эритроцитов при скоростях сдвига 90, 180, 360, 890 с-1 улучшалась на 20, 20, 14 и 7%, соответственно. При использовании ЭЛХ деформируемость эритроцитов достоверно улучшалась (на 11-19 %) только на высоких скоростях сдвига (360 и 890 с-1). Влияние ЭЛС и ЭЛХ на концентрацию глюкозы, вязкость плазмы, агрегацию эритроцитов и концентрацию фибриногена было не существенным. В свою очередь ЭСВ достоверно снижал концентрацию фибриногена на 8%, показатель гематокрита на 4% и концентрацию глюкозы на 12% в сравнении со значениями в контрольной группе.

Таким образом, экстракты из экдистероидсодержащих растений способны эффективно снижать выраженность гемореологических нарушений при аллоксановом диабете у крыс. В условиях модели сахарного диабета ЭСВ продемонстрировал наибольшую гемореологическую активность и достоверно уменьшал степень гипергликемии.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

ГУМУСОВЫЕ КИСЛОТЫ ТОРФА – ЭФФЕКТИВНЫЕ КАТАЛИЗАТОРЫ

ДИСПРОПОРЦИОНИРОВАНИЯ СУПЕРОКСИДА

Вашурина И.Ю.*, Макаров С.В.**, Калинников Ю.А.*, Власова Е.А.* *Институт химии растворов РАН, Иваново **Ивановский государственный химико-технологический университет, Иваново E-mail: iyv@isc-ras.ru, makarov@isuct.ru Гуминовые вещества широко распространены в природе. Благодаря своей выраженной физиологической активности они применяются в лечебно-профилактических целях. Одной из возможных причин перспективности применения гуматов в медицине является их высокая реакционная способность в процессах с участием радикалов. В настоящей работе исследована возможность каталитического действия гуматов на реакцию диспропорционирования супероксида – радикала, играющего важнейшую роль в биохимических процессах. С этой целью изучена кинетика восстановления красителя хромового зеленого антрахинонового диоксидом тиомочевины в аэробных и анаэробных условиях в присутствии гуматов.
В качестве растворителя использовались водные растворы NaOH различной концентрации. Установлено, что добавки гуматов оказывают влияние только при проведении процесса в присутствии кислорода воздуха. На кинетических кривых убыли концентрации красителя регистрируются два индукционных периода, первый из которых определяется концентрацией кислорода в растворе, второй – концентрацией продукта его восстановления – супероксида. Показано, что введение добавок гуматов приводит к исчезновению второго и увеличению первого индукционного периода. Указанные эффекты объяснены ускорением процесса диспропорционирования супероксида, сопровождающегося образованием кислорода. Этот вывод подтвержден результатами исследований реакции восстановления красителя в присутствии супероксида калия, а также процесса образования продукта взаимодействия диоксида тиомочевины – дитионита в присутствии гумата и супероксиддисмутазы.

Известно, что каталитическая активность энзима супероксиддисмутаза в щелочных средах резко понижается. Результаты представленной работы показывают, что в отличие от энзимов гуматы являются эффективными катализаторами диспропорционирования супероксида даже в сильнощелочных средах. Установлено также, что в присутствии гуматов ускоряются реакции окисления с участием продукта восстановления супероксида – пероксида водорода. Кинетика и механизм процесса окисления изучены на примере реакции пероксида водорода с азокрасителем кислотным оранжевым.

В Институте химии растворов РАН в течение нескольких лет ведутся исследования, конечной целью которых является разработка технологий производства новых препаратов на основе торфа – экологически безопасного, доступного и дешевого природного сырья. Их основу составляют гумусовые кислоты, выделенные из торфа особым способом и характеризующиеся повышенной активностью в физико-химических, биохимических и биологических процессах.

В этой связи созданные препараты проявляют выраженные лечебные эффекты, например, в растениеводстве – способность эффективно вылечивать растения закрытого грунта от бактериальных инфекций, в птицеводстве – быстро подавлять эпидемии расклева любой этиологии.

Настоящее исследование посвящено оценке возможности использования одного из разработанных торфяных препаратов, условно названного «ТОМЕД», в качестве предполагаемого биокорректора в сфере акушерства и гинекологии. Использование природного препарата в указанной сфере тем более привлекательно, что традиционные синтетические лекарственные средства часто вызывают аллергические реакции и оказывают тератогенное влияние на плод. На препарат получены токсикологический паспорт и гигиенический сертификат.

Одно из ведущих мест среди причин перинатальной заболеваемости и смертности занимают нарушения маточно-плацентарного кровообращения (МПК). В этой связи в эксперименте на животных (беременных крысах линии Wistar) посредством перевязки одной трети преплацентарных сосудов вызывались нарушения МПК и исследовалось влияние препарата «ТОМЕД» на каждый из компонентов единой функциональной системы «матьплацента-плод». При оценке физиологического состояния крыс и плодов основное внимание уделялось иммунной системе как одной из ведущих систем организма млекопитающих.

На основании детального изучения методами морфометрии и соматометрии ведущих иммунокомпетентных органов (тимуса и селезенки) экспериментальных животных установлено, что в условиях стресса «ТОМЕД» обладает выраженным иммунокоррегирующим действием на организм как матери, так и плодов.

В плаценте крыс с нарушенным МПК выявлено стимулирование препаратом «ТОМЕД» адаптивных процессов на всех уровнях структурной организации – органном, тканевом и клеточном. Показано, что препарат препятствует развитию необратимых патологических процессов (тромбозов, инфарктов), неизбежно приводящих к кислородному голоданию плода, активизирует транс- и параплацентарный обмен, оказывает ангиопролиферативное действие, что в конечном итоге обеспечивает профилактику плацентарной недостаточности и гипотрофии плода.

Установлено, что изучаемый препарат в дозе 10 мг/кг не оказывает тератогенного и эмбриотоксического действия и не вызывает формирования пороков развития у плодов на всех уровнях структурной организации. Наблюдение в динамике за крысятами, получавшими на анте- и постнатальном этапах препарат «ТОМЕД», выявило опережающее физическое развитие с первого месяца постнатального периода.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

МОДИФИКАЦИЯ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ В ТКАНЯХ БЕГОНИИ

КРАСНОЛИСТНОЙ ПОД ВЛИЯНИЕМ ФИТОВИТАЛА

Головченко Л.А.*, Тимофеева В.А.*, Войнило Н.В.*, Сергеенко Н.В.*, Линник Л.И.*, Быховец А.И.**, Гончарук В.М.** *ГНУ «Центральный ботанический сад» Национальной академии наук Беларуси, Минск **ГНУ «Институт биоорганической химии» Национальной академии наук Беларуси, Минск E-mail: luda_gol@yahoo.com Целью работы являлось изучение накопления фенольных соединений в листьях бегонии краснолистной. Проведены исследования биологической эффективности трех форм фитовитала (фитовитал с салициловой кислотой, фитовитал с янтарной кислотой, фитовитал) для повышения биосинтетического потенциала тканей.

Препараты испытывали на модельных растениях бегонии краснолистной, выращиваемой в горшечной культуре в условиях оранжереи. Использовали два способа обработки – полив и опрыскивание листьев растений растворами препаратов (концентрация 0.3%). Расход рабочего раствора препарата – 0.5 л на 3-литровый горшок. Биохимический анализ содержания фенольных соединений в листьях растений проводился спустя 10 дней после обработки препаративными формами фитовитала. Определялось содержание суммы фенольных соединений, катехинов и лейкоантацианов, флавонолов в сыром и сухом сырье.

Содержание сухого вещества в сырье составило 96%.

Отмечен ростостимулирующий эффект действия препаратов. Растения быстро начали образовывать новые листья, с более крупными листовыми пластинками, интенсивно зеленого цвета, что привело к увеличению выхода лекарственного сырья. В опытных вариантах растения вступили в фазу цветения, чего не наблюдалось в контроле.

Полив растений фитовиталом с салициловой кислотой значительно стимулировал синтез полифенолов в листьях растений; фенольных соединений в 2.2, катехинов и лейкоантацианов – в 3.4, флавонолов – в 8.3 раза. Опрыскивание растений способствовало также увеличению синтеза фенольных соединений – в 1.8, катехинов и лейкоантацианов – в 2.8, флавонолов – в 4 раза. Применение данного препарата путем пролива растений оказалось эффективней опрыскивания.

Фитовитал с янтарной кислотой не оказывал положительного влияния на синтез полифенолов. Отмечено незначительное повышение содержания в листьях суммы катехинов и лейкоантацианов (в 1.2 раза), в то время как произошли снижение суммы фенольных соединений и блокировка синтеза флавонолов (следовые количества). Опрыскивание растений незначительно стимулировало синтез катехинов и антацианов (в 1.3 раза) и не оказывало влияния на синтез фенольных соединений (содержание на уровне контроля), но отрицательно повлияло на содержание флавонолов, снизив его содержание в 3.8 раза по сравнению с необработанными растениями.

Фитовитал при поливе растений вызвал снижение в листьях синтеза фенольных соединений в 1.7, катехинов и лейкоантацианов в 1.4, стимулируя при этом синтез флавонолов в 1.8 раза. Опрыскивание растений фитовиталом повысило сумму фенольных соединений в листьях бегонии в 1.2, катехинов и лейкоантацианов в 1.3, при снижении суммы флавонолов в 1.5 раза.

Препаративная форма фитовитала с салициловой кислотой, применяемая путем полива растений, эффективна для улучшения качества растительного сырья по показателю содержания полифенолов.

Проблема сохранения здоровья и увеличения продолжительности жизни людей является одной из самых актуальных проблем медицины, а важнейшим условием поддержания здоровья и работоспособности человека было и остается полноценное и регулярное снабжение организма всеми необходимыми пищевыми веществами.

Поставщиками ряда этих веществ могут быть биологически активные добавки, полученные на основе растительного сырья.

ФГУП "ЦНИЛХИ" предлагает оригинальную технологию переработки растительного сырья, позволяющую получить ценные продукты функционального назначения с выраженной биологической активностью, на которые разработаны технические условия и получены сертификаты качества. К таким продуктам в первую очередь следует отнести пищевые волокна, полученные из растительного сырья.

Богатый, уникальный химический состав растительных пищевых волокон делает их незаменимой пищевой добавкой в рациональном питании (см. таблицу).

–  –  –

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006 ОЦЕНКА КАЧЕСТВА СЫРЬЯ АМАРАНТА (Amaranthus L.)

ПО СОДЕРЖАНИЮ АНТИОКСИДАНТОВ И КАЛЬЦИЯ

Гульшина В.А.*, Терешкина Л.Б.*, Романова Н.П.*, Белоножкина Т.Г.**, Лапин А.А.***, Зеленков В.Н.**** *Мичуринский государственный педагогический институт, Мичуринск **Всероссийский научно-исследовательский и проектно-технологический институт рапса, Липецк ***Институт органической и физической химии им. А.Е.Арбузова Казанского НЦ РАН, Казань ****Российская академия естественных наук, Москва E-mail: Tereshkin@yandex.ru Поиск качественного растительного сырья, отличающегося высокой биологической ценностью и содержанием полезных веществ, является актуальной проблемой. Источником такого сырья служит амарант – культура, способная восполнять дефицит белка, витаминов, микроэлементов и других ценных соединений в рационе человека и животных.

Задачей нашего исследования являлась оценка интегральной антиоксидантной емкости (АОЕ) и содержания кальция в листьях разных сортов амаранта, выращенного в условиях ЦЧР Тамбовской области, и выявление зависимости содержания антиоксидантных веществ от количества подкормок кальциевой селитрой.

Объектами исследования служили 7 сортов амаранта, заложенных в экспериментальных делянках ОО «Концерн Отечественные инновационные технологии» (г. Жердевка Тамбовской области) в весенне-летний период 2004 года (сорта кафедры растениеводства ВГАУ, г.Воронеж). Количественную оценку АОЕ образцов листьев амаранта, в виде водных экстрактов по ГФ II, проводили методом кулонометрического определения антиоксидантной емкости (АОЕ) с помощью электрогенерированного брома на анализаторе «Эксперт-006» НПК ООО «Эконикс-Эксперт». АОЕ выражали в мг кверцетина на 100 г абсолютно сухого экстракта (АСЭ). Определение кальция осуществляли методом химического титрования трилоном Б в модификации применительно к образцам листьев амаранта, имеющим цветность водных экстрактов. Содержание сухих веществ в экстрактах определяли на анализаторе влажности MX-50 A&D Company, Limited при температуре сушки 180 °C.

В результате проведенных исследований установлено, что максимальные значения АОЕ в листьях амаранта отмечаются у сортов Кремовый ранний, Шунтук и Щирица (377.05,

208.96 и 218.89 мг кверцетина / 100 г АСЭ соответственно), а минимальные значения характерны для сортов Харьковский и Рушничек (52.64 и 53.89 мг кверцетина / 100 г АСЭ, соответственно). Максимальные значения по содержанию кальция в листьях амаранта наблюдается у сортов Кармин, Кремовый ранний и Щирица (17.44, 15.14 и 14.10 % масс., соответственно), а минимальные значения у сорта Харьковский (11.05% масс.).

Оценка динамики накопления АОЕ и кальция в листьях амаранта, в зависимости от количества подкормок кальциевой селитрой, исследована на сорте Amaranthus cruentus L.

Процент кальция в растительных образцах с разным числом подкормок (1, 2 и 3-разовые) отличался незначительно, за исключением образца с двухразовыми кальциевыми подкормками (16.8% масс.), а наибольшей антиоксидантной активностью обладали образцы с двухразовыми подкормками (91.44 мг кверцетина / 100 г АСЭ).

Таким образом, используя методы определения интегральной антиоксидантной емкости и кальция, можно целенаправленно вести поиск наиболее перспективных сортов амаранта в качестве сырьевого источника биологически активных веществ.

Аир болотный (Acorus calamus L.) – официнальное лекарственное растение. В настоящее время в официнальной медицине применяются корневища аира – Rhizomata Calami, как средство, возбуждающее аппетит, и порошок из корневищ, который входит в состав препаратов, назначаемых при гастритах и язвенной болезни желудка (Викалин и Викаир). По многочисленным данным, спектр применения аира болотного в народной медицине несравненно шире [1]. Этот факт, по нашему мнению, говорит о перспективности исследования аира болотного с целью расширения возможностей его использования в официнальной медицине.

В связи с вышесказанным нами было изучено 10 образцов корневищ аира, собранных в различных местах произрастания. Количественное определение различных групп БАВ в корневищах аира показало, что в наибольшем количестве в них содержатся эфирное масло (0,68-2,60 %) и полисахариды (7,56-15,28 %). Методом хроматомасс-спектрометрии проведено детальное исследование химического состава эфирного масла из корневищ аира, произрастающего в Сибири; показано отсутствие в его составе токсичного компонента -азарона. Из эфирного масла выделен новый сесквитерпеноид, методами ЯМР и масс-спектрометрии установлена его структура (5-изопропил-1,7-метил-4,5-дигидро-3Н-нафто[1,8-bc]фуран) и присвоено тривиальное название – «акорафуран». Изучен химический состав эфирного масла из надземной части аира; определено в его составе более 40 компонентов, среди которых преобладают монотерпеноиды (содержание геранилацетата достигает 73 %).

Впервые исследован полисахаридный комплекс из корневищ аира болотного. Методом ВЭЖХ определен мономерный состав полисахаридных фракций и получены данные о количественном соотношении моносахаридов.

На мышах линии С57Вl/6 проведено изучение влияния эфирного масла, спиртового экстракта и полисахаридного комплекса из корневищ аира болотного на рост и метастазирование карциномой легких Льюис, а также эффективность лечения циклофосфаном.

Показано, что спиртовой экстракт корневищ аира достоверно ингибирует рост первичной опухоли, а в случае комбинирования цитостатика с полисахаридами из корневищ аира все показатели процесса диссеминации опухоли с высокой степенью достоверности отличались от контрольных значений: частота метастазирования составила 50% (Р0,001) против 100% в контроле и 100% – в группе «ЦФ»; количество метастазов оказалось в 10,2 раза меньше (Р0,01) по сравнению с контролем и в 4,9 раза (Р0,01) – с группой «ЦФ»; площадь метастазов была в 17,3 раза меньше (Р0,01), чем в контроле и в 7,8 раза меньше (Р0,01), чем в группе «ЦФ», индекс ингибирования метастазирования составил 95% против 53% в группе «ЦФ». Полученные результаты показали перспективность дальнейших исследований препаратов аира как средств комплексной терапии злокачественных новообразований.

Литература

1. Растительные ресурсы России и сопредельных государств. Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейства Butomaceae-Typhaceae. СПб.: Наука,

1994. С.144-147.

1 R = H; 2 R = Me 3 4 При использовании техники проращивания семян в рулонах фильтровальной бумаги было показано, что исследованные вещества в различной степени влияют на рост корня проростков огурца и гречихи, причем проростки огурца оказались менее чувствительны к действию изучаемых веществ. Наименее активно по сравнению с остальными подавлял рост корня гречихи трикетон 1 (ЭД50 75.0 мкг/мл). Трикетон 2, отличающийся от вещества 1 наличием метильного радикала в положении 3а, показал большую активность (ЭД50 44.0 мкг/мл). Сдвиг 5(6)-двойной связи в трикетоне 2 в положение 4(5) не привел к изменению биологической активности (ЭД50 трикетона 3 43.0 мкг/мл). Более существенное влияние на биологическую активность веществ данной группы оказал сам факт наличия или отсутствия двойной связи в шестичленном цикле В: насыщенный трикетон 4 показал наибольшую активность (ЭД50 21.0 мкг/мл). На проростках гречихи в течение всего периода прорастания была прослежена динамика действия трикетонов 2 и 4 в концентрации 100 мкг/мл.

Существенные различия в длине корня проростков отмечались через 48 ч после намачивания семян. В течение последующих 72 ч рост корня в контрольной группе происходил экспоненциально, а у опытных образцов длина корня увеличивалась незначительно. Отмывание корней опытных проростков водой после 72 ч выращивания в растворах трикетонов 2 и 4 и последующее культивирование их в условиях контроля приводили к более активному росту корней и увеличению их сырой массы по сравнению с проростками, которые продолжали выдерживать в растворе этих соединений. Обратимость действия веществ 2 и 4 подтверждают такие биохимические тесты, как определение содержания в корнях проростков общего белка и общих сахаров. В обоих тестах отмывание приводило к приближению значений этих показателей для отмытых опытных проростков к значениям показателей контрольной группы. Таким образом, трициклические циклопентановые,'-трикетоны являются обратимыми ингибиторами роста корней проростков гречихи и огурца и обнаруживают явную зависимость степени их действия от структуры вещества.

Работа выполнена при поддержке грантов ДВО РАН №05-СХ-II-06-001 и № 06-III-АНовиков В.Л., Шестак О.П., Логачев В.В., Анисимов М.М. // Раст. ресурсы, 2003. Т.39.

Вып. 4. С. 87-94.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

–  –  –

Ajania fruticulosa (Ledeb.) Poljak – перспективное лекарственное растение, с широким спектром фармакологического действия, произрастающее на территории Средней Азии и Казахстана. Фармакологические свойства аянии кустарничковой известны давно. Так, например, в народной индийской и традиционной китайской медицине растение используется как тонизирующее и антигельминтное средство. Эфирное масло, извлеченное из надземной массы аянии кустарничковой, обладает антимикробным, фунгицидным и ранозаживляющим действиями.

Целью исследования являлось выявление зависимости антибактериального действия от места и срока сбора сырья.

Объектом исследования служили 16 образцов эфирного масла аянии кустарничковой (культивируемое и дикорастущее сырье, собранное в различное время суток с 8 до 22 часов, при интервале сбора 2 часа) на наличие антимикробной активности. Изучение антимикробной активности образцов эфирных масел проводилось к штаммам грамположительных бактерий Staphylococcus aureus 505, Bacillus subtilis, к грамотрицательному штамму Escherichia coli и дрожжевому грибу Candida albicans методом диффузии в агар (лунок).

Исследуемые образцы растворяли в 96%-ном этиловом спирте в концентрации 1 мг/мл.

Препараты сравнения – гентамицин для бактерий и нистатин – для дрожжевого гриба в C. аlbicans. Согласно результатам микробиологических исследований, выявлено, что эфирное масло аянии кустарничковой подавляет рост тест-микроорганизмов грамотрицательного и грамположительного спектра. МПК составила 7,8-15,6 мкг/мл.

Таким образом, в результате испытаний на антимикробную активность 16 образцов эфирного масла установлено, что они обладают умеренно выраженным антибактериальным действием, при этом не отмечается зависимости в проявлении антимикробного действия от места и времени сбора лекарственного сырья. Антигрибковая активность в отношении Candida albicans проявляется слабо.

Одним из перспективных направлений фундаментальных и прикладных исследований является использование физиологически активных веществ с целью регуляции роста и развития растений.

Ранее показано, что эндогенными регуляторами являются олигосахариды, выделенные из пектина клеточных стенок растений.

Пектиновые полисахариды влияют на онтогенез как двудольных, так и однодольных растений. Исследовано влияние более 45 экзогенных пектиновых полисахаридов различных структур на всхожесть, скорость прорастания семян и рост проростков пшеницы мягкой Triticum aestivum L. Семена обрабатывали водными 0,002%-ными растворами полисахаридов, контролем являлись семена, которые вместо полисахаридов обрабатывали водопроводной водой. Установлено, что наибольшее увеличение всхожести, скорости прорастания семян и роста проростков T. aestivum вызывают следующие пектиновые полисахариды: лемнан из ряски малой Lemna minor L., силенан из стебля смолевки обыкновенной Silene vulgaris (M.)G., а также пицеан из хвои ели Picea obovata Ldb, представляющий собой смесь галактоманнана и арабиногалактогалактуронана.

Ранее в Отделе молекулярной иммунологии и биотехнологии показано, что главная углеводная цепь линейной и разветвленных областей пектиновых полисахаридов представлена -1,4-D-галактопиранозилуронаном. Разветвленные области силенана представляют собой разные виды рамногалактуронана. Лемнан – уникальный апиогалактуронановый пектин.

Обработка семян пшеницы пектинами повышает их всхожесть на 10-20 %. Лемнан, силенан и пицеан оказывают стимулирующее влияние на всхожесть, скорость прорастания семян и рост проростков T. aestivum.

Таким образом, изученные нами экзогенные пектины и, возможно, нейтральный галактоманнан увеличивают всхожесть, скорость прорастания семян и рост проростков T. aestivum.

Работа выполнена при дополнительном финансировании грантом РФФИ № 03-04грантом поддержки ведущих научных школ № НШ-1260.2003.4; грантом Президиума РАН: «Молекулярная и клеточная биология»; координационным грантом фундаментальных научных исследований, выполняемых в УрО РАН совместно с учеными СО РАН.

Сведения о содержании салидрозида и розавина в родиоле розовой многочисленны и противоречивы. Исследователи до сих пор не пришли к единому мнению о локализации и активности специализированных биосинтезов, характере сезонных изменений содержания гликозидов, изменчивости накопления этих веществ у дикорастущих и культивируемых растений.

Объектами исследования служили растения Rhodiola rosea L., собранные на Приполярном Урале, в северной части Горного Алтая, в северо-восточной части Малоземельской тундры, на Кольском п-ове и Норвегии, а также растения, культивируемые на опытных делянках вблизи г. Сыктывкара (подзона средней тайги).

Выполненные с использованием единой методики определения показали наличие гликозидов только в корнях и каудексе. Присутствие розавина и салидрозида в надземных органах (стеблях, листьях, соцветиях, семенах) не было выявлено.

В период цветения - начала плодоношения у всех исследованных образцов каудекс превосходил корни по накоплению гликозидов. В большинстве случаев в каудексе содержалось в 1.5-2.3 раза больше розавина, чем салидрозида. В корнях прослеживается эта же закономерность. Содержание суммы гликозидов варьировало в зависимости от образца в каудексе от 26 до 47 мг/г сухой массы, в корнях – от 15 до 25 мг/г сухой массы. Растения из различных мест произрастания существенно отличались по накоплению индивидуальных гликозидов. Содержание салидрозида в каудексе растений изменялось от 9 до 20 мг/г сухой массы. Наибольшим накоплением этого гликозида характеризовались норвежские растения, произрастающие на скалах на побережье Баренцева моря, а также уральские растения, произрастающие на обнажениях коренных пород. Минимальное содержание салидрозида выявлено в алтайских растениях. Наибольшее содержание розавина (32 мг/г) было выявлено в каудексе растений субальпийского экотопа на Приполярном Урале, наименьшее (10-12 мг/г) – в растениях, произрастающих на островах и побережье Баренцева моря.

Культивируемые растения по накоплению розавина и салидрозида не уступали дикорастущим.

Исследовали влияние различных концентраций растительного гормона октадеканоидного ряда – метилжасмоната (10-9, 10-7, 10-6 М) – на некоторые ростовые показатели у гороха. Горох проращивали в течении двух сут. на дистиллированной воде, в темноте.

Набухшие горошины разрезали пополам и половинки с зародышевыми осями помещали в холодильник (24 ч), затем переносили в стаканчики с испытуемым раствором, выдерживая их в термостате (24°С) в течении 4 сут в закрытом состоянии. Последующее определение длины корней и эпикотилей, а также прироста их сырого веса в присутствии оксилипина показало сходную картину, полученную обоими способами для эпикотилей. Поэтому в дальнейшем, при анализе роста эпикотилей можно ограничиться измерением их длины, т.е. менее трудоемким способом определения ростовой активности. Наиболее эффективной в данном случае оказалась самая высокая (10-6 М) концентрация гормона (весовой метод – 134% от контроля; размерный метод – 135% от контроля). Меньшим положительным эффектом по отношению к контролю обладал метилжасмонат (10-7 М) (весовой метод – 114% от контроля;

размерный – 104% от контроля). Самая низкая (10-9 М) концентрация оксилипина снижала ростовую активность клеток (весовой метод – 91% от контроля; размерный – 89% от контроля). Результаты анализа изменения роста корней обоими методами не совпали. Это могло быть связано с преобладанием радиального роста клеток некоторых корешков, обуславливающим их утолщение. Вместе с тем дистальная направленность роста клеток других корешков привела к существенному разбросу данных при определении средней длины образцов, несмотря на значительную выборку (60-70 растений). Следовательно, определение ростовой активности корней при воздействии метилжасмоната лучше проводить весовым методом. Полученные этим методом данные показали постепенное увеличение роста корней по отношению к контролю в ряду увеличения концентраций метилжасмоната ([10-9 М] – на 3%; [10-7 М] – на 8%; [10-6 М] – на 17%).

Среди наиболее доступных и перспективных исходных соединений для направленной химической модификации их молекул являются сесквитерпеновый лактон эвдесманового ряда -сантонин, содержащийся в надземной части Artemisia cina Berg. В Казахстане имеются обширные запасы растения-источника указанного вещества, что позволяет рассматривать данный сесквитерпеноид как перспективное исходное соединение для дальнейшей модификации и изучения взаимосвязи «строение-активность».

Одним из эффективных путей синтеза хлорсодержащих терпеноидных соединений является взаимодействие терпеновых диенонов с газообразным хлором. Японскими исследователями обнаружена зависимость хемо- и стереоселективности реакций взаимодействия хлора с молекулой -сантонина от природы используемого растворителя и получен ряд хлорсодержащих производных -сантонина [1, 2], но биологическая активность данных соединений изучена недостаточно.

Для изучения биологической активности 2-хлор-4,5-эпоксисантонин и 2-хлорсантонин были получены способом, ранее не описанным в литературе, 1,2-дихлорсантонин и 5-хлор-4-метоксисантонин по методике [1, 2].

Фармакологическое действие -сантонина и его хлорпроизводных изучалось в направлении противовоспалительной и противотрихомонадной активности.

При этом было установлено, что профилактическое введение 2-хлорсантонина купирует отек, вызванный стандартными флогогенными агентами: каррагенином, формалином и гистамином, в среднем в зависимости от дозы до 45-56 %.

Влияние 2-хлорсантонина в уcловиях in vitro продемонстрировало, что в сравнении с рядом сесквитерпеновых лактонов и хлорсодержащих производных -сантонина, оказало значимый противотрихомонадный эффект, подавив рост простейших в дозе от 100 до 200 мкг/мл, когда препарат сравнения в испытуемых дозах активность по отношению к тестштамму не проявил. Поскольку фармакологическая активность фармакофоров 2-хлорсантонина характеризуется разнообразным действием, с учетом прогнозирования его биологической активности проведена серия исследований по оценке безопасности использования. В рамках острой и подострой токсичности использовали максимально технически достижимую концентрацию 2-хлорсантонина для последующего внутрибрюшинного и внутрижелудочного введения. Результаты эксперимента позволяют отнести 2-хлорсантонин к разряду малотоксичных веществ.

Таким образом, на основе сесквитерпенового лактона -сантонина получен 2-хлорсантонин впервые в одну стадию с высоким выходом, который является перспективным соединением в плане противопаразитарной активности и рекомендуется для дальнейших исследований.

Литература

1. H. Takayanagi, H. Ogura, T. B. H. McMurry // Chem. Pharm. Bull., 1990. V. 38. № 3. С.58.

2. H. Takayanagi, R. Irimajiri, T.B.H. McMurry // Chem.Pharm.Bull., 1991. V.39. №3. С.780.

Исследована возможность применения сульфатированных полисахаридов, выделенных из красных водорослей Японского моря и любезно предоставленных с.н.с. И.М. Ермак (Институт биоорганической химии ДВО РАН), для иммобилизации антигенов на примере ацетохлора, конъюгированного с BSA (АМРА-BSA). Применение пьезокварцевых детекторов в конструкции иммуносенсоров связано с высокой чувствительностью (на уровне нанограмм) и возможностью прямой регистрации иммунохимических взаимодействий без введения ферментных, флуоресцентных и других меток. Аналитическим сигналом сенсора служит уменьшение частоты колебаний пьезокварцевого резонатора при образовании гетерогенного иммунного комплекса на поверхности его электродов. Чувствительность, селективность и воспроизводимость определений с помощью пьезокварцевого иммуносенсора существенно зависят от способа иммобилизации рецепторных молекул (антител или антигенов) на поверхности его электродов.

Для более прочного закрепления биомолекул достаточно распространенным приемом активации поверхности золотого электрода является нанесение водного раствора белка А, способного образовывать координационные связи с атомами золота за счет атомов серы, входящих в состав белковых молекул.

В работе использовали пьезокварцевые резонаторы АТ-среза (собственная частота колебаний 10 МГц) отечественного производства с золотыми электродами диаметром 5 и 8 мм. Формирование биослоя осуществляли в несколько стадий. Активацию металлической поверхности проводили нанесением фиксированного количества растворов одинаковой концентрации белка А и полисахаридов, различающихся содержанием сульфогрупп: ПС-1 (20%); ПС-2 (24%). После испарения воды к полученному слою биорецепторные молекулы прикрепляли с помощью бифункционального кросс-линкера – глутарового альдегида.

Поэтапное приращение массы регистрировали по частоте колебаний сенсора на воздухе после высушивания до постоянной массы.

Установлено, что использование полисахаридов с более высоким содержанием серы способствует более прочному прикреплению к поверхности металла и эффективной иммобилизации молекул антигенов:

Масса подложки, Масса иммобилизованного Активатор мкг антигена, мкг ПС-1 13,99 6,04 ПС-2 23,76 7,07 Белок А 5,53 4,86 Сравнительную оценку активности и стабильности получаемого биорецепторного покрытия электрода резонатора осуществляли по реакции связывания иммобилизованных антигенов с антителами к ацетохлору в условиях проточно-инжекционного и статического анализа. Показано, что использование ПС-2 более предпочтительно по сравнению с белком А, поскольку обеспечивает в 5-7 раз более высокую устойчивость биослоя к действию регенерирующих растворов. При этом линейный диапазон определяемых концентраций антител соответствует 0,001-0,0025 мкл нативной сыворотки в 1 мл буферного фосфатного физраствора, рН 7,2.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

–  –  –

В последнее десятилетие наблюдается большой интерес химиков, биохимиков и физиологов к базидиальным и плесневым грибам как продуцентам антибиотиков и новых типов биологически активных веществ. Этот интерес вызван в первую очередь широким распространением штаммов патогенных бактерий и различных опухолей, устойчивых к известным лекарственным препаратам. В клинической практике это означает, что целый ряд заболеваний, вызванных такими возбудителями, не могут быть излечены традиционными схемами лечения. Поэтому актуальной задачей является поиск новых препаратов, преодолевающих резистентность бактерий и злокачественных новообразований человека. В этой связи базидиальные грибы рассматриваются как ценные природные источники новых высокоактивных антибиотиков и стимуляторов иммунного статуса макроорганизма. В докладе представлены литературные данные по биологически активным веществам из грибов, а также результаты скрининга, выделения и изучения антибиотиков из базидиальных и плесневых грибов, полученные в ГУ НИИ по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе РАМН.

В последние десятилетия усиливается роль фитотерапии при лечении различных заболеваний, особенно на стадии профилактики или при хроническом течении болезни.

Растительные препараты, по сравнению с лекарственными (полученными искусственным путём), реже имеют побочные эффекты и менее вызывают привыкание организма к препарату. Использование природного растительного сырья объясняет интерес к лекарственным растениям. Одним из таких растений, представляющих интерес для научной медицины, является лабазник вязолистный (Filipendula ulmaria (l.) maxim). Он имеет широкое применение в народной медицине. Сырьё лабазника вязолистного используют как потогонное, жаропонижающее, противовоспалительное, противоязвенное, ранозаживляющее средство.

Цель наших исследований – изучение содержания антиоксидантов, находящихся в различных частях растения (листьях, стеблях, семенах) методом кулонометрического титрования. Отрабатывалась методическая часть получения водных экстрактов из наземной части лабазника вязолистного. Экстракты образцов готовили в соответствии с государственной фармакопеей (издание 11).

В качестве материала для апробации методики использованы образцы лабазника вязолистного, полученные в результате сбора в селах Майрамадаг и Дзуарикау (РСО-Алания) в летний период 2005 г.

Антиоксидантную ёмкость (АОЕ) растительных образцов лабазника пересчитали на 100 г абсолютно сухого экстракта. Полученные результаты показали, что максимальное содержание антиоксидантов наблюдается в листьях лабазника (15,37 и 11.27 г кверцетина на 100 г экстракта). В стеблях значение АОЕ меньше – 7.95 и 5.39 г кверцетина на 100 г экстракта. В семенах, собранных в с.Дзуарикау, значение АОЕ составляет 7.12 г кверцетина на 100 г экстракта.

Наши исследования показали возможность применения методики определения антиоксидантной емкости для изучения содержания антиоксидантов в экстрактах различных частей лабазника вязолистного.

Флора РФ, и в особенности растения Сибири, являются неисчерпаемым источником оригинальных фитопрепаратов. Одной из сложных проблем на пути создания лекарственных средств (ЛС) является выбор перспективных объектов, который решается на основе комплексного подхода, включающего анализ данных народной медицины, результаты фармакологического и химического скрининга. Другая проблема – выделение действующих веществ, поскольку природные объекты являются сложными многокомпонентными системами, зачастую трудно поддающимися разделению. Однако изолирование и установление строения соединений, обуславливающих специфическую активность фитопрепаратов, помимо важного научного значения, имеет прикладной характер, так как это необходимо для последующей стандартизации ЛС. Кроме того, изучение механизма действия выделенных из растений БАВ и установление корреляции «структура – действие» (лекарственный дизайн), важны для отбора наиболее активных соединений и синтеза новых ЛС.

На основе видов рода Rhodiola и Rhaponticum carthamoides, наряду с разработкой ЛС психостимулирующего действия, получены новые данные, позволяющие разработать оригинальные препараты. Совместно с ИОХ (Новосибирск) и НИИ фармакологии (Томск) осуществлен синтез фенолоспирта – п-тирозола и созданы две лекарственные формы – таблетки и ампульные растворы, обладающие антиоксидантными, адаптогенными свойствами и противометастатическим действием. Они могут использоваться в медицинской практике для повышения неспецифической устойчивости организма, при осложненных формах ишемической болезни сердца и мозга, а также в качестве сочетанного компонента противоопухолевой терапии.

На основе сухого экстракта рапонтикума совместно с проф. М.Б. Плотниковым получено новое запатентованное гемореологическое средство для коррекции синдрома повышенной вязкости крови при гипертензии и инфаркте миокарда. В реализации указанного действия ведущую роль играют фитоэкдистероиды.

Фундаментальные исследования побегов водяники и травы чертополоха позволили разработать оригинальные противоэпилептические препараты «Эмпетрин» и «Кариспин» и впервые получить данные о БАВ, обуславливающих антиконвульсивную активность.

Используя доступное сырье кору осины – разработано эффективное противоописторхозное ЛС «Попутрил», сочетающее высокую специфическую активность с низкой токсичностью. По нашим данным, активность связана с гликозидами салицилового спирта – салицин, тремулоидин и др., что было доказано путем синтеза гликозидов по методу Кенигса-Кнорра с установлением их противопаразитарной активности в опытах in vivo на золотистых хомячках, искусственно зараженных метацеркариями описторхов.

Разработанные НД на сырье и лекарственные формы позволяют осуществлять действенный контроль за эффективностью и безопасностью ЛС.

Нами показано, что растения рода Saussurea могут быть источником получения противолямблиозного средства.

Учитывая сложность, многостадийность и значительные финансовые затраты по созданию новых ЛС, возрастает необходимость комплексирования специалистов различного профиля уже на ранних этапах разработки препаратов.

В современной медицине наибольшее значение приобретают фитопрепараты для лечения заболеваний, связанных с нарушением детоксицирующей функции печени и всех видов обмена веществ, в первую очередь, углеводного.

Исходя из данных народной медицины, наше внимание привлекли репешок волосистый Agrimonia pilosa L. сем. Rosaceae, а также ряд растений семейств Asteraceae и Urticaceae, имеющие широкую сырьевую базу.

Нами разработана оптимальная технология получения водных и водно-спиртовых сухих полиэкстрактов сбора. Проведенные исследования на содержание БАВ с помощью качественных реакций и хроматографических методов (БХ, ТСХ) показали наличие значительного количества полисахаридов (инулин), флавоноидов, фенолкарбоновых кислот (кофейная, феруловая), сапонинов и дубильных веществ (5.1±0.48 %).

Гипогликемическую активность полученных экстрактов оценивали на моделях адреналиновой гипергликемии и аллоксанового диабета, а также исследовали динамику чувствительности организма к биологическому действию инсулина на фоне введения экстрактов с помощью теста «инсулинрезистентность». В качестве препарата сравнения использовали противодиабетический сбор «Арфазетин». Выявлено, что исследуемые экстракты в зависимости от дозы и режима введения (однократное и курсовое) снижают выраженность гипергликемии при введении адреналина, а при аллоксановом диабете демонстрируют отчетливое сахароснижающее действие. Наибольшую активность проявил водно-этанольный экстракт, снизив уровень глюкозы на 48.11-53.6 %, значительно превышающую препарат сравнения (10.03-12.05 %).

Химический состав рода репешка представлен различными группами соединений:

флавоноиды (кверцетин и его гликозиды, а также 7-глюкозиды лютеолина и апигенина), полисахариды, фенолкарбоновые кислоты (кофейная, хлорогеновая, эллаговая), кумарины и дубильные вещества.

В ходе фармакологических испытаний экстракта репешка было исследовано функциональное состояние ЦНС у крыс в опыте «гексобарбиталовая проба». После курсового введения на фоне экспериментального гепатита экстракты репешка увеличивали время засыпания подопытных животных, что можно расценить как восстановление функционального состояния ЦНС. На основании полученных данных можно предположить, что одной из групп БАВ, ответственных за работу гепатобилиарной системы, являются флавоноиды. Количественное определение последних проводили спектрофотометрическим методом при длине волны 400 нм после образования окрашенных комплексов со спиртовым раствором алюминия хлорида с использованием стандартного образца лютеолин-7-глюкозида (циннарозида). Установлено, что содержание флавоноидов составляет 10.58±0.22 %.

Таким образом, в результате проведенных химико-фармакологических исследований созданы предпосылки для создания новых фитопрепаратов, обладающих гепатопротекторной и гипогликемической активностью.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

МИКРОЭЛЕМЕНТНЫЙ СОСТАВ МЕДУНИЦЫ МЯГЧАЙШЕЙ

Круглов Д.С.*, Ханина М.А.*, Куценогий К.П.**, Чанкина О.В.**, Савченко Т.И.** *Новосибирский государственный медицинский университет, Новосибирск **Институт химической кинетики и горения СО РАН, Новосибирск E-mail: kruglov_DS@mail.ru Медуница мягчайшая (Pulmonaria mollissima A.Kerner) – многолетнее травянистое растение семейства Boraginaceae является перспективным лекарственным растением.

Экстракт из надземной части м.мягчайшей проявляет выраженную антианемическую активность [1] и может найти применение в фитотерапии социально-значимого заболевания – железодефицитной анемии (ЖДА). Элементный состав м. мягчайшей определялся методом рентгенофлуоресцентного анализа с использованием синхротронного излучения (РФА СИ) в Сибирском центре синхротронного излучения Института ядерной физики СО РАН [3].

Содержание Mg, Si и Al, которые не могли быть определены методом РФА СИ, определялось методом атомно-эмиссионной спектроскопии с индуктивно связанной плазмой [2] на приборе «Optima 4300DV» в Институте катализа СО РАН. В качестве объектов исследования служила надземная часть м.мягчайшей в фазе цветения (объект 1), в фазе розеточного листа (объект 2) и подземная часть растения в фазе цветения (объект 3).

Полученные результаты (приведены в таблице) позволяют сделать следующие выводы:

– в подземной части растения концентрация микроэлементов выше, что может быть объяснено активной ролью корневой системы в формировании пула микроэлементов;

– концентрация основных микроэлементов «кроветворного комплекса» Fe и Mn выше в фазе цветения, которая, по данному показателю, может быть рекомендована как оптимальная для заготовки лекарственного растительного сырья – herba Pulmonariae.

Содержание элементов в сырье м.мягчайшей (мкг/г в пересчете на а.с.с.) K Ca Mg Si Zn Al Fe Mn Cu Объект 1 60603.0 8499.0 2100.0 5800.0 32.0 40.0 469.0 135.0 7.0 Объект 2 61175.0 6555.0 2200.0 4700.0 46.0 60.0 160.0 105.0 9.0 Объект 3 48633.0 7089.0 600.0 200.0 35.0 600.0 978.0 260.0 20.0 4.0 4.0 2.0 3.0 4.0 10.0 6.0 4.0 6.0

–  –  –

Выявленная противоанемическая активность экстракта из надземной части Pulmonaria mollissima A.Kerner [1] может объясняться содержанием микроэлементов кроветворного комплекса (Fe, Cu, Mn). В этой связи представляется актуальной задача оптимизации условий получения экстракта по содержанию микроэлементов. Экстракт из надземной части P.

mollissima приготовлялся в соотношении 1:50 методом экстрагирования на кипящей водяной бане. Содержание микроэлементов определялось методом атомно-эмиссионной спектроскопии с индуктивно связанной плазмой [2] на приборе «Optima 4300DV» в Институте катализа СО РАН. В качестве экстрагента использовались вода очищенная, pH которой регулировалась добавками кислоты хлористоводородной и водного раствора аммиака, а также водно-спиртовые растворы с различной концентрацией этанола Сэ. Анализ полученных зависимостей содержания микроэлементов от pH водного извлечения (рис. 1) и концентрации этанола в водно-спиртовом растворе (рис.

2) позволяют сделать следующие выводы:

– изменение содержания микроэлементов в зависимости от pH водного извлечения согласуется с растворимостью солей изученных элементов;

– менее резкое, чем для Mn снижение концентрации Fe и Cu при увеличении содержания этанола связано, вероятнее всего, с нахождением их в виде хелатных комплексов со спирторастворимыми соединениями (например, флаваноидами);

– оптимальной является экстракция водно-спиртовой смесью с концентрацией этанола не более 40% при нейтральном pH экстрагента.

Рис. 1. Рис. 2.

Литература

1. Д.С.Круглов, М.А.Ханина, О.В.Третьякова. Оценка фармакологической активности экстракта из надземной части Pulmonaria mollissima // Фундаментальные исследования, 2004. – №1. – С. 28-29.

2. М.Томпсон, Д.Н.Уолш Руководство по спектрометрическому анализу с индуктивносвязанной плазмой. М.: Недра, 1988. – 288 с.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

–  –  –

Береза – один из наиболее распространенных видов деревьев в лесах Сибири и европейской части России [1]. По содержанию биологически активных тритерпеновых соединений береста является рекордсменом среди других видов растительного сырья [2].

Последние два десятилетия изучения соединений класса тритерпеноидов дали основание возлагать надежды на введение в терапию ряда серьезных заболеваний (вирусные заболевания различных этиологий, ВИЧ-1, гепатит С и др.) препаратов на основе тритерпеноидов лупанового ряда. Один из наиболее перспективных тритерпенов – бетулин. Бетулин является основным компонентом этанольного и гексанового экстракта коры березы, другой основной компонент – лупеол, и в небольших количествах содержатся альдегиды бетулина и лупеола [3]. Изучение иммуностимулирующей активности экстрактов проводилось на «Биохемилюминометре 3604» по хемилюминесцентной (ХЛ) методике, так как данный метод позволяет оценить функциональную активность лейкоцитов, являющихся показателем иммунного состояния организма человека [4]. При проведении ХЛ анализа у здоровых людей в возрастной группе от 20 до 50 лет с добавлением экстрактов установлено уменьшение скорости достижения максимального значения хемилюминесцентной кривой по сравнению с показателями контрольных проб.

Показатели хемилюминесценции нейтрофилов при изучении иммуностимулирующей активности экстрактов (р0,05 – достоверность различий с контролем, n=40) Контрольная Проба с раство- Проба с раствором Проба с раствором Показатели проба ром спирта гексанового экстракта этанольного экстракта Спонтанная хемилюминесценция Tmax, сек 2134 1583 1993 1972 Imax, имп/сек 3344 8073 9703 9753 S, имп*сек 352984 402321 501256 513471 Зимозан-индуцированная хемилюминесценция Tmax, сек 4700 2015 4973 4891 Imax, имп/сек 7692 9243 11934 11511 S, имп*сек 707847 798513 870331 828474 В контрольной спонтанной пробе максимум ХЛ достигается через 2134 сек, а в спонтанной пробе с добавлением гексанового и этанольного экстрактов через 1993 и 1972 сек соответственно. При индукции хемилюминесцентной реакции опсонизированным зимозаном для данных проб увеличивается время реагирования на стимул, относительно контрольных значений. По максимальным значениям интенсивности кривых хемилюминесценции мы можем сравнить активность лейкоцитарных клеток в контрольных пробах, индуцированных зимозаном, и в пробах с добавлением экстрактов. По данным таблицы, значение максимума кривой пробы с раствором гексанового экстракта в 1,6 раза превышает соответствующий показатель для контрольной пробы. Максимум кривой для пробы с этанольным экстрактом выше максимального значения кривой контрольной пробы в 1,5 раза. На основании этих показаний можно сделать вывод о том, что и гексановый, и этанольный экстракты внешней коры березы значимо увеличивают активность клеток нейтрофильного ряда и, следовательно, обладают иммуностимулирующей активностью.

1. Долгодворова С.Я., Черняева Г.Н. Биологические ресурсы лесов Сибири. Красноярск:

Изд.-во Ин-та леса и древесины СО АН СССР, 1980. 2. Кузнецов Б.Н., Кузнецова С.А., Левданский В.А. и др. Совершенствование методов выделения, изучение состава и свойств экстрактов березовой коры. Хим. в инт устойчивого разв., 2005, 13. 3. Маркова Н.П., Рощин Н.П., Ковалев В.Е. О составе экстрактивных веществ коры березы//Химия древесины, 1983, №4. 4. Афонина Г.Б., Майданник В.Г.

Клинические аспекты применения хемилюминесцентного анализа// Врач. Дело, 1990, №9.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

–  –  –

Наблюдающийся в мире высокий интерес к изучению антиоксидантов в растениях, их выделению и использованию в качестве биологически активных добавок и противоокислителей к пище, косметическим и моющим средствам привел к тому, что на протяжении 25-30 последних лет предпринимаются попытки создания методик для определения суммарной антиокислительной активности (АОА) ингибиторов свободнорадикальных реакций.

Для характеристики всего гетерогенного пула различных классов антиоксидантных веществ, в целом, было введено неспецифическое интегральное понятие, обозначаемое в литературе как “общая антиоксидантная емкость (АОЕ)”. Существует множество различных синонимов, обозначающих способность веществ ингибировать свободнорадикальные реакции (антиоксидантный потенциал, антиоксидантная буферная емкость и др.), среди которых наиболее часто применяется АОЕ. Идея определения суммарной АОЕ имеет смысл, так как позволяет определить интегральную составляющую, характеризующую потенциальную возможность антиоксидантного действия всех составляющих компонентов, присутствующих в образцах, причем не по отдельности, а в совокупности их взаимодействия между собой в сложной биологической системе, учитывая потенциальный синергизм их кооперативного антиоксидантного действия. Такое измерение значительно дешевле, быстрее и удобнее идентификации отдельных составляющих – антиоксидантов, не требует сложного оборудования и времени для выполнения исследования.

Цель работы – разработка методики определения антиоксидантной емкости водорастворимых полисахаридов растительного сырья.

Объектами исследования служили листья топинамбура сорта Восторг на различных стадиях вегетации с плантаций ООО Концерн “Отечественные инновационные технологии” г. Жердевка Тамбовской обл. В лаборатории концерна была разработана методика по определению АОЕ водорастворимых полисахаридов (ВРП) растений, включающая получение водных экстрактов, кулонометрическое определение АОЕ на серийном кулонометре “Эксперт-006” НПК ООО “Эконикс-Эксперт” г. Москва. ВРП осаждались раствором хлорида кальция и их АОЕ определялась по разнице значений с учетом разбавления экстрактов. Для определения ВРП кальций-пектатным методом мы использовали анализатор влажности МХ-50 A&D Company, Limited. Программное обеспечение “WinCT-Moisture” c анализатором влажности позволило нам определить оптимальную температуру сушки образцов листьев – 120°С, водных экстрактов листьев – 180°С. Исходные фильтры и фильтры с осадками кальциевых солей сушили при 105°С, согласно методике по определению пектинов кальцийпектатным методом.

Анализ показал, что содержание ВРП в исследованных образцах и их АОЕ в зависимости от времени сбора находятся в пределах 10-20 г и 10-20 кКл (на 100 г абс. сухого веса листьев), 40-60 г и 35-80 кКл (на 100 г абс. сухого экстракта).

Работа выполнена при финансовой поддержке ООО Концерна “Отечественные инновационные технологии”.

Исследования выполнялись на зараженных вирусом листьях табака Nicotiana tabacum L. сорта Ксанти-нк. Установлено, что действие соединений 1-22 в отношении ВТМ сильно зависит от их структуры. Наибольший антивирусный эффект проявили трикетон 8 и его Naсоль 20, которые в дозе 2.0 мг/мл уменьшали число локальных ВТМ-индуцированных некрозов, образующихся на инокулированных листьях табака, на 85 и 95% соответственно, не оказывая в этой концентрации токсического действия на ткани листьев. Эти соединения перспективны в качестве агентов для защиты сельскохозяйственных растений от вирусных заболеваний.

Работа выполнена при поддержке гранта ДВО РАН № 06-III-А-05-120.

Литература

1. X.-C. Li, D. Ferreira, M. R. Jacob et al. // J. Am. Chem. Soc., 2004. V.126. No. 22.

P. 6872-6873.

2. В.Л. Новиков, О.П. Шестак, В.В. Логачев, М.М. Анисимов // Раст. ресурсы, 2003. Т.39.

Вып. 4. С. 87-94.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

–  –  –

Проблема возникновения, развития и коррекции состояний, сопровождающихся нарушением функционирования иммунной системы организма человека и животных, является одной из важнейших проблем современности. Среди факторов, ведущих к развитию вторичной иммунной недостаточности, обоснованную тревогу вызывают факторы химической природы, к которым можно отнести применение некоторых медикаментозных средств (кортикостероидов, цитостатиков, антибактериальных препаратов и др.), а также средств защиты растений – пестицидов. С целью коррекции приобретенного иммунодефицита создан довольно большой набор лекарственных средств как синтетического, так и природного происхождения, восстанавливающих основные звенья иммунной системы. При этом следует отметить, что особенно перспективным является использование средств природного, в том числе растительного происхождения.

Применение лекарственных растений и их препаратов в лечении и профилактике заболеваний различной этиологии занимает все большее место в медицине и ветеринарии.

«Зеленая фабрика» природы уже сотни тысяч лет снабжает человечество надежными лечебными средствами, основным преимуществом действия которых являются многосторонность и мягкость воздействия на организм и вследствие этого хорошая переносимость, отсутствие, как правило, побочного действия и осложнений даже при длительном их применении.

Результаты собственных экспериментов продемонстрировали эффективность использования семикомпонентного растительного экстракта, составленного по прописям Тибетской медицины, при коррекции вторичных иммунодефицитных состояний у экспериментальных животных (мышей), вызванных факторами химической этиологии. При моделировании иммунодефицита вводили цитостатик азатиоприн в дозе 50 мг/кг массы тела ежедневно, перорально в течение 5 дней; гербицид 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту (2,4-Д) – в дозе 20 мг/кг массы тела аналогичным образом. Фитосбор, представляющий сумму экстрактивных веществ из 7 видов лекарственного растительного сырья (корневищ аира болотного, корней одуванчика, соцветий ромашки, плодов шиповника и боярышника, черных листьев бадана толстолистного и травы горца птичьего), растворенный в теплой воде и вводимый животным перорально в дозе 300 мг/кг массы тела один раз в сутки в течение семи дней, отменял супрессивное действие азатиоприна и гербицида 2,4-Д на клеточно-опосредованные иммунные реакции (реакция «трансплантат против хозяина», гиперчувствительность замедленного типа, активность Т-супрессоров антителообразования), антителогенез (число антителообразующих клеток и титр гемагглютининов в сыворотке крови) и функциональную активность перитонеальных макрофагов мышей (фагоцитоз, антигенпрезентирующая активность). Исследуемые показатели восстанавливались до уровня таковых у животных контрольной группы. При этом фитосбор не оказывал влияния на показатели интактных животных.

Таким образом, данное растительное средство может быть использовано в терапии вторичных иммунодефицитных состояний, вызванных действием факторов химической природы.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

–  –  –

С целью поиска новых противовоспалительных соединений исследовано действие раувольфана (RS), пектина из R. serpentina на острый язвенный колит у мышей.

Цель исследования: изучить действие раувольфана на стенку толстой кишки при экспериментальном язвенном колите у мышей.

Раувольфан выделяли из каллуса раувольфии экстракцией сырья водным раствором оксалата аммония. Мыши получали раувольфан однократно, в водном растворе перорально в дозах 25-100 мг/кг, за два дня до индукции колита. Острый язвенный колит вызывали ректальным введением уксусной кислоты. Определяли степень и площадь язвообразований.

Инфильтрацию стенки кишки нейтрофилами оценивали по активности миелопероксидазы (МПО) в ткани. Спектрофотометрически определяли адгезию перитонеальных фагоцитов, сосудистую проницаемость и количество слизи в толстой кишке.

Ректальное введение кислоты вызывает острое воспаление, которое характеризуется увеличением концентрации МПО в стенке кишки, развитием язв и снижением количества слизи в толстой кишке.

Пероральное введение раувольфана RS за двое суток до индукции колита снижает степень и площадь воспаления, уменьшается активность в стенке кишки МПО, предотвращается разрушение слизистой стенки толстой кишки. Противовоспалительное действие раувольфана RS имеет дозозависимый эффект и снижается при уменьшении дозы введения от 100 до 25 мг/кг.

После разделения раувольфана RS с помощью мембранной ультрафильтрации получилось две фракции пектинов, отличающихся молекулярной массой. Первая фракция, названная нами RS-1, имеет молекулярную массу 300-500 kDa, вторая фракция RS-2 100-300 kDa. Полученные фракции отличаются физиологическим действием. Пероральное введение раувольфана RS-1 ингибирует развитие воспаления, при этом как и в случае с исходным пектином RS, снижаются степень и площадь поражения, предотвращается разрушение слизистой и снижается инфильтрация ткани фагоцитами. Раувольфан RS-2 не оказывает противовоспалительного действия.

Таким образом, установлено ингибирующее действие раувольфана на колит у мышей.

Выявлена активная область молекулы, обеспечивающая противовоспалительное действие пектина.

Работа поддержана грантами программ «Молекулярная и клеточная биология» и «Фундаментальные науки – медицине» Президиума Российской академии наук.

Важное значение для поддержания здоровья, работоспособности и активного долголетия человека принадлежит полноценному и регулярному снабжению его организма всеми необходимыми микронутриентами: витаминами и минеральными веществами.

Отечественный и мировой опыт свидетельствуют, что наиболее эффективный путь обеспечения населения микронутриентами – дополнительное обогащения продуктов массового потребления биологически активными добавками.

Существенную роль в нормализации деятельности желудочно-кишечного тракта играют растительные волокна, представленные пектинами, относящимися к классу нерасщепляющихся ферментами кишечника нецеллюлозных полисахаридов.

Растительные волокна, функционируя как молекулярные и мягкие сорбенты, способные образовать нерастворимые комплексные соединения с ионами металлов, адсорбировать лекарственные и токсичные вещества, включая канцерогены. Кроме того, растительные волокна обладают способностью связывать и выводить желчные кислоты.

Перспективным источником биологически активных веществ является кора деревьев хвойных пород. Нами изучается процесс выделения пектиновых веществ из коры деревьев рода Pinaceae кислотным гидролизом. Изучено влияние технологических параметров (характера гидролизующего агента, его концентрации, гидромодуля, температуры, степени измельчения материала, продолжительности процесса гидролиз-экстрагирования) на выход и качественные показатели пектина.

В результате нашей работы выявлено, что повышение температуры гидролиз – экстрагирования уменьшает степень этерификации пектина. Возрастает содержание свободных и нейтрализованных карбоксильных групп, следовательно, возрастает ионообменная способность пектина. Также нами установлено, что концентрация гидролизующего агента не влияет на степень этерификации пектиновых веществ.

Качественные характеристики пектина, выделенного нами из коры деревьев рода Pinaceae, с использованием в качестве гидролизующего агента соляной кислоты, представлены в таблице.

Характеристика пектина коры деревьев рода Pinaceae

–  –  –

В связи с ухудшением экологической обстановки активно используются вещества, повышающие устойчивость организма к неблагоприятным условиям окружающей среды – адаптогены. Особое место среди них занимают фитоэкдистероиды, среди них – 20-гидроксиэкдизон (20Е), аналог гормона линьки и метаморфоза насекомых. Несмотря на активное практическое использование, весь спектр и механизмы его действия на организм теплокровных изучены явно недостаточно. Мы исследовали влияние 20Е на электрофоретические характеристики гемоглобина (Hb) крови белых лабораторных нелинейных мышей в норме и крыс Wistar в норме и в условиях гемолитической (фенилгидразиновой) анемии с помощью диск-электрофореза в столбиках полиакриламидного геля (ПААГ) в опытах in vivo и in vitro. Высокочувствительный метод позволяет обнаружить изменения в структуре Hb, детерминирующие изменения его функциональных свойств.

Hb мышей делится в электрическом поле на три фракции: быструю минорную, основную и медленную минорную. Половой дифференцировки во фракционном спектре Hb интактных мышей, в отличие от крыс, не выявлено. Однако, через сутки после однократной инъекции 20Е в дозе 20 мг/кг в летний период относительная электрофоретическая подвижность (ОЭФП) основной и медленной минорных фракций у самок оказывается достоверно (P0.05) выше, чем у самцов. 20Е увеличивает ОЭФП фракций Hb по сравнению с контролем: 5 мг/кг достоверно для основной фракции и быстрой минорной, 20 мг/кг – для всех трех. ОЭФП быстрой минорной и основной фракций Hb мышей в зимний период выше (P0.001), чем в летний. Однократные инъекции 20Е в дозе 20 мг/кг вызывают увеличение (P0.1-0.01) ОЭФП всех трех фракций Hb мышей в летний и зимний периоды с сохранением сезонной разницы: зимой выше, чем летом. Таким образом, реакция Hb мышей на 20Е оказывается поло-, дозо- и сезонозависимой.

На крысах показано, что их Hb делится – на 7 анодных фракций: основная – фракция IV и субосновная – III согласно их подвижности в электрическом поле, при этом ОЭФП фракций Hb самок выше, чем у самцов. Фенилгидразин, повреждая поверхностную мембрану эритроцитов (Эр), вызывает резкое снижение ОЭФП всех фракций Hb по сравнению с интактными животными. Предварительные инъекции 20Е сохраняют ОЭФП всех фракций Hb крыс почти на уровне их у интактных и даже с некоторым превышением. Считаем, что 20Е стабилизирует мембрану Эр, делая ее устойчивой по отношению к гемолитическому яду.

Известно, что 20Е относится к числу С27-стероидов, способных встраиваться в поверхностную мембрану Эр, модифицируя ее свойства. В серии экспериментов по введению 20Е на фоне уже развившейся гемолитической анемии показано, что эффект его аналогичен эффекту профилактического введения, но еще более выражен. Это означает, что 20Е может быть использован не только как профилактическое средство, облегчающее состояние гемолитической анемии и ускоряющее выход из нее, но и как средство, корректирующее повреждения, нанесенные гемолитиком, т.е. как лечебное средство. На основании результатов, полученных в опытах на крысах Wistar, можно сделать вывод о целесообразности использования 20Е в качестве полезного адаптогенного профилактического и (или) лечебного средства при гемолитических анемиях.

Продукты переработки топинамбура, в том числе и экстракты из различных частей растения, проявляют биологическую активность при использовании как в чистом виде, так и в составе продуктов функционального питания, биологически активных добавок. Присутствие антиоксидантов позволяет повысить их биологическую стойкость, препятствующую окислительной деструкции нестабильных активных компонентов. Наличие пектиновых веществ способствует выводу тяжелых металлов и токсинов из организма человека.

В данной работе изучали содержание пектинов и антиоксидантную ёмкость в водных экстрактах клубней различных сортов и гибридов топинамбура. Образцы для приготовления экстрактов были получены с экспериментальных делянок концерна «Отечественные инновационные технологии» в Жердевском районе Тамбовской области. Клубни отбирались в начале ноября 2005 года. Высушивание нарезанного пластинами материала производилось на промышленной сушилке при температуре 80С. Содержание влаги в высушенных измельченных образцах определяли на анализаторе влажности МХ-50 фирмы «A&D Company Ltd.» (Япония) при температуре 120°С для последующего перерасчета данных на абсолютно сухую массу клубней. Измерение АОЕ проводили для свежеприготовленных водных экстрактов. Водные экстракты клубней топинамбура готовили в соответствии с Государственной фармакопеей 11 издания. Исследования водных экстрактов проводили методом кулонометрического определения антиоксидантной емкости (АОЕ) на приборе «Эксперт-006» с помощью электрогенерированного брома. АОЕ выражали в мг кверцетина на 100 мл экстракта, а также в г кверцетина на 100 г сухого вещества образца клубней.

Пектиновые вещества экстрактов осаждали 2 н раствором CaCl2. Навеску на фильтре сушили до постоянного веса при температуре 105°С. Содержание пектинов представляли в г на 100 г сухого вещества образца.

В работе исследовали отечественные сорта топинамбура: Интерес, Сеянец 19, Находка, Скороспелка, Интерес 21, топинсолнечник Новость ВИРа и французские сорта: Violet de rennes, Commun, полученные с Майкопской опытной станции Всероссийского института растениеводства им.Н.И.Вавилова и выращенные в условиях ЦЧЗ в 2005 г.

В результате проведенной работы показано, что наибольший показатель АОЕ соответствует сорту Сеянец 19 : 0,999±0,014 г кверцетина /100г сухого вещества образца (СВО). По уровню АОЕ далее следуют Commun и Новость ВИРа: 0,911±0,023 г кверцетина/100 г СВО и 0,903±0,04 г кверцетина/100 г СВО, соответственно.

У остальных сортов АОЕ ниже Violet de rennes: 0,814±0,037 г кверцетина/100 г СВО; Скороспелка:

0,800±0,005 г кверцетина/100 г СВО; Интерес 0,794±0,014 г кверцетина/100 г СВО; Интерес 21:0,793±0,018 г кверцетина/100 г СВО; Находка: 0,788±0,04 г кверцетина/100 г СВО.

Максимальное содержание пектина выявлено в сорте Новость ВИРа: 6,64г/100г СВО.

Наименьшее содержание пектина обнаружено в сорте Сеянец 19:, Находка и Интерес 21 2,15 г/100 г СВО, 2,35 и 2,8 г/100г СВО, соответственно. Остальные сорта имели содержание пектина в диапазоне концентраций 3,4-3,7 г/100г СВО.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

–  –  –

Химическое исследование копеечника щетинистого (Hedysarum setigerum) было предпринято в связи с тем, что имелись сведения о применении его в народной медицине для лечения хламидиоза и вирусного гепатита С. В настоящее время борьба с этими инфекциями мало успешна и требует больших финансовых затрат. Между тем хронический гепатит С смертельное заболевание. Решение проблемы его лечения одна из важнейших задач химико-фармацевтической науки.

В результате исследования химического состава надземной части копеечника щетинистого нами препаративно выделены флавонолы и их гликозиды – кверцетин, кверцитрин, рутин, 3-метоксикемпферол, кемпферол-3-О-арабинофуранозид [1], изорамнетин, авикулярин [2], дактилин [3]; флавоновые гликозиды – роифолин [2], лоницерин [3]; линарин, диосмин [2,4], необудоффицид [1]; лигнан тетрагидронафталинового типа – (+)-изоларицирезинол-9'-О--D-глюкопиранозид [1]; фенолокислоты – п-гидроксибензойная и протокатеховая [5]; алкалоид протоберберинового типа – берберин [5]; стерины – кампестерин, стигмастерин, -ситостерин, и стигмастанол [1].

В ходе литературного поиска установили, что 7 из 12, идентифицированных нами в копеечнике щетинистом флавоноидов, проявляют противовирусную активность (кверцетин, изорамнетин, 3-метоксикемпферол, кверцитрин, рутин, линарин, диосмин). Водные растворы хлорида берберина имеют не прямые антихламидийные свойства, подавляя развитие хламидий посредством иммуностимуляции организма.

На основе соединений, выделенных из Hedysarum setigerum, ведутся работы по созданию средства «Сольвир С» для борьбы с гепатитом С. «Сольвир С» прошел испытания на острую токсичность, эмбриотоксическое действие и раздражающее действие на кожу, слизистую оболочку глаза в НИИ Медицины труда и экологии человека при научном центре Медицинской экологии восточно-сибирского научного центра СО РАМН (г. Ангарск). В настоящий момент «Сольвир С» проходит клинические испытания в Иркутской городской инфекционной клинической больнице на добровольцах больных хроническим вирусным гепатитом С. Предварительные данные показали более быструю динамику нормализации биохимических показателей крови в опытной группе по сравнению с контрольной.

Литература

1. O.V. Neretina, A.S. Gromova, V.I. Lutsky, A.A. Semenov, I.A. Ushakov, T.N. Makar’eva, N.L. Owen // Chem. Nat. Comp., 2004. 40. №1. С. 91-92.

2. О.В. Неретина, С.В. Федоров, А.С. Громова, В.И. Луцкий, Ю.Н. Елькин // Химия природных соединений, 2002. №2. С.161.

3. O.V. Neretina, A.S. Gromova, V.I. Lutsky, A.A. Semenov, I.A. Ushakov, N.L. Owen // Chem. Nat. Comp., 2005. 41. №5. С. 602-603.

4. О.В. Неретина, А.С. Громова, В.И. Луцкий, А.А. Семенов // Растительные ресурсы, 2002. №1. С. 82-85.

5. O.V. Neretina, A.S. Gromova, V.I. Lutsky, A.A. Semenov, I.A. Ushakov, P.S. Dmitrenok, N.L. Owen // Chem. Nat. Comp., 2004. 40. №6. С. 609-610.

Изучались биологические свойства водных и водно-спиртовых флавоноидсодержащих экстрактов из растений сем. Гераниевые Geraniaceae и сем. Розоцветные Rosaceae, произрастающих на Южном Урале [1]. В сравнительных условиях проведено комплексное исследование антиоксидантной и антимикробной активности экстрактивных полифенолов в зависимости от вида растения, фазы его развития, условий произрастания и отбора образцов, а также состава экстрагента (этанол или вода).

Испытание антимикробной активности экстрактов полифенольных соединений из растений сем. Geraniacea (герань кровяно-красная, герань лесная, герань луговая, журавельник цикутовый) и сем. Rosaceae (малина лесная, ежевика сизая, лапчатка прямостоячая) проводилось относительно грамположительных и грамотрицательных бактерий рода Azotobacter, Bacillus и Pseudomonas. Показано, что экстракты полифенольных веществ оказывают бактерицидное действие на исследованные микроорганизмы. Подавляющая концентрация экстрактивных полифенолов растений для предотвращения роста микроорганизмов – 1000 мкг/мл. Из 32 исследованных штаммов она была эффективна в отношении от 18 до 29 культур. Устойчивостью к исследованным растительным полифенолам отличался род Bacillus, представленный видами В.subtilis и B. polymyxa, а наибольший бактериостатический эффект проявляли полифенолы из надземной части герани луговой, герани кровяно-красной и листьев ежевики сизой. Показано бактерицидное действие экстрактивных полифенолов из сем. Geranium (герани кровяно-красной и герани луговой) на патогенные культуры B. cereus, Escherichia coli, P. aeruginosa, Staphylococcus aureus [2].

Показано, что антиоксидантная активность полифенолов [3,4] уменьшается в ряду: а) при экстракции этанолом – герань луговая герань лесная герань кровяно-красная малина лесная лапчатка прямостоячая журавельник цикутовый ежевика лесная; б) при экстракции водой – ежевика лесная малина лесная лапчатка прямостоячая журавельник цикутовый.

Установлено, что изменчивость антимикробной активности экстрактов полифенолов коррелирует с приведенными выше рядами, как по виду растения, так и по качеству экстрагента. Полученные данные об антиоксидантной и бактерицидной активности растительных полифенольных соединений свидетельствуют о том, что изученные виды растений можно рассматривать в качестве перспективного сырья для создания фитопрепаратов, обладающих антиоксидантными, бактерицидными и антивирусными свойствами.

Литература

1. Никитина В.С., Оразов О.Э., Шендель Г.В. // Сибирский экологический журн., 2004.

№6. C. 825-834. 2. Никитина В.С., Кузьмина Л.Ю., Шендель Г.В., Мелентьев А.И., Логинов О.Н. // Сб. статей VIII Международного съезда “Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения”. Миккели (Финляндия), 2004. С. 492Никитина В.С., Шендель Г.В., Герчиков А.Я., Ефименко Н.Б. // Хим.-фарм. журн.,

2000. Т.34, №11. С. 25-27. 4. Никитина В.С., Герчиков А.Я., Гарифуллина Г.Г., Оразов О.Э., Шендель Г.В., Хайруллина В.Р. // Сб. статей VI Международного съезда “Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения”. СПб,

2002. С. 262-265.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

–  –  –

Герань луговая Geranium pratense L. характеризуется повышенным содержанием фенольных соединений и широко используется в народной медицине. Надземная часть герани луговой богата дубильными веществами, эфирными маслами, содержит витамин А, аскорбиновую кислоту. Известно, что при неблагоприятных условиях окружающей среды изменяется содержание свободных аминокислот. С другой стороны, на действие стрессового фактора отзывчив метаболизм фенольных соединений, вследствие чего в тканях растений происходит изменение содержания полифенолов. Изменение фенольного метаболизма при действии как биотических, так и абиотических факторов, несомненно, сказывается на жизнедеятельности растений. Среди других факторов стресса в растениях роль кофакторов или активаторов ферментов физиологически активных соединений могут играть металлы.

Они принимают непосредственное участие и в метаболизме фенольных соединений, играя регуляторную роль в их обмене и превращении. Целью работы являлось изучение изменений содержания фенольных соединений и флавоноидов, а также содержания свободных аминокислот в растениях герани луговой в качестве отклика на воздействие растворами солей CuSO4·5H2O и (NH4)2MoO4.

При обработке медью содержание суммы фенольных соединений при опрыскивании надземной части остается на уровне контроля, а при поливе под корень она увеличивается в

2.6 раза. При этом происходит значительное увеличение содержания флавоноидов. Если при опрыскивании содержание гликозидов флавоноидов увеличивается по сравнению с контролем в 1.3 раза, то при поливе их сумма возрастает в 2.7 раза. Такая же закономерность наблюдается и для агликонов, где их содержание при опрыскивании и поливе увеличивается в 1.9 и 3.1 раза соответственно. При обработке сернокислой медью возрастает содержание пролина, -аминомасляной кислоты и аланина как при опрыскивании, так и при поливе.

Следует отметить, что содержание пролина и аланина при поливе возрастает по сравнению с контрольным вариантом соответственно в 4,8 и 2,4 раза.

При обработке молибденом было выявлено, что сумма фенольных соединений уменьшается в надземной части. Уменьшается также сумма гликозидов флавоноидов и при опрыскивании и при поливе, а суммарное содержание агликонов практически не изменяется.

Обработка молибденом способствовала увеличению ряда свободных аминокислот. Так, при опрыскивании в растениях увеличивалось содержание аспарагиновой кислоты, треонина, пролина, серина, аланина, валина, фенилаланина, -аминомасляной кислоты, изолейцина и лейцина. Содержание аспарагина и глутаминовой кислоты уменьшилось по сравнению с контролем в 1,6 и 1,4 раза соответственно, резко снижалось содержание аргинина – в 6,2 раза.

Таким образом, при воздействии медью на растения герани луговой, вероятно, происходит активация ферментных систем, участвующих в биосинтезе фенольных соединений. Вместе с тем идет и активация аминокислотного метаболизма, увеличение содержания некоторых свободных аминокислот. При обработке испытуемых растений молибденом, наоборот, синтез фенольных соединений понижался. Это может быть связано с тем, что определенная часть энергии используется на процессы роста и развития растений, что мы и наблюдали по данным накопления биомассы.

Изучение проблемы стресса является важнейшей задачей теоретической и практической физиологии и медицины. Наиболее безопасными средствами профилактики и лечения болезней адаптации считаются биологически активные вещества, выделенные из растений, в том числе и фитоэкдистероиды.

Цель работы – исследовать действие фитоэкдистероидов на состояние симпато-адреналовой системы (САС), как важнейшего компонента общего адаптационного синдрома. Исследования проводились на эритроцитах крови взрослых крыс разного пола. Изучалось действие 20-гидроксиэкдизона (20Е), выделенного из серпухи венценосной (Serratula coronata L.) на агглютинабельность и адренореактивность эритроцитов крыс. Препарат 20Е получен в лаборатории физиологии и биохимии растений Института биологии Коми НЦ УрО РАН, зав.

лаб. д.б.н. В.В. Володин. Использовались методы фитогемагглютинации (ФГА) [1] и пропранолоновый тест (ПП). ПП тест позволяет смоделировать состояние стресса (активированной САС) in vitro. Если реакция эритроцитов на ПП отсутствует, или слабо выражена, то САС активирована и наоборот.

Ранее было показано, что ПП снижал ФГА, т.е. обладал мембраностабилизирующим эффектом [2]. Эффект ПП у интактных крыс, независимо от пола, был максимален на первых мин наблюдения, что свидетельствовало об отсутствии активации САС. Сохранялась четкая линейная зависимость эффекта ПП от времени его действия. При однократном (20 мг/кг), многократном (в течение 5 дней, суммарная доза 20 мг/кг) введении 20Е, реакция эритроцитов на ПП была значительная (35-45 %), независимо от пола, что свидетельствовало об отсутствии активации САС. При введении крысам такого же количества физиологического раствора, как растворителя для 20Е, реакция на ПП эритроцитов крыс была незначительна (в пределах 5-14 %), с нарушением линейной зависимости ПП от времени его действия, что указывает на активацию САС и нарушение функционального состояния

-адренорецепторов на мембране эритроцитов.

При введении 20Е на фоне фенилгидразиновой анемии параметры РАЭ и адренореактивность эритроцитов были максимально приближены к соответствующим показателям в интактной группе.

Таким образом, 20Е, как в норме, так и на фоне фенилгидразиновой анемии снижал активность САС. Из литературы известно, что стероидные гормоны позвоночных животных повышают активность САС за счет увеличения концентрации катехоламинов в крови и повышения чувствительности к ним тканей. Следовательно, в отношении САС действие 20Е не идентично действию стероидных гормонов позвоночных животных.

Литература

1. Мойсеенко Н.А., Иржак Л.И. Агглютинация эритроцитов кролика при напряженном эритропоэзе // Общая биология. 1972. Т.33. №6. С. 779-786.

2. Петрова Н.Б., Рау И.В., Канева А.М., Изъюрова Е.В. Адренореактивность эритроцитов человека и животных при различных воздействиях // Тез. III Всерос. симпоз.

«Физиологические механизмы природных адаптаций» Иваново, 1999. С. 123-124.

На актуальность поиска новых высокоэффективных средств природного происхождения серьезный отпечаток накладывает ресурсный фактор, так как в современных рыночных условиях доступность сырья, наряду с фармакологическими свойствами БАВ, в конечном итоге, определяют спрос на предлагаемый препарат.

С данной точки зрения внимание привлекает широко распространенные в Омской области источник БАВ – сапропель [1]. Для изучения и разделения на активные фракции и выделения группы БАВ использованы различные способы переработки.

Сапропели различной природы (содержание органической массы 83-54 %) были подвергнуты термической (300°С) и термохимической (диапазон температур 300-450 °С, в присутствии протонодонорного растворителя) обработке. Далее жидкие продукты разделялись на фракции методом температурного фракционирования.

Для изучения качественного и количественного состава полученные фракции (до 100°С, 100-140 °С, 140-230 °С, выше 230°С) анализировались методом газовой хроматомасс-спектрометрии (ГХМС).

Наиболее интересной, с точки зрения проявления биологической активности, оказалась фракция с температурой выкипания в диапазоне 140-230 °С, которая была дополнительно изучена методом ТСХ, на предмет обнаружения флавоноидов, дубильных веществ, кумаринов и сексвитерпеновых лактонов. Анализ ГХМС показал наличие групп биологически активных веществ, которые представлены суммами фенольных соединений, азотсодержащих веществ и органических кислот.

Совместно с ОмГМА разработан препарат, содержащий в качестве основного компонента экстракт сапропеля и линимент с сапропелевой фракцией 140-230 °С. Проведены предварительные экспериментальные исследования, которые показали, что наряду со стимуляцией заживления кожной раны у экспериментальных животных препарат обладает антисептическим свойством, что клинически проявлялось в отсутствии нагноения кожных ран у подопытных. Очень важным моментом является то, что жидкие продукты переработки сапропелей, имея минимальную концентрацию бенза--пирена, не обладают более выраженным общетоксическим действием, чем широко применяемые в клинике их аналоги (бальзам Шостаковского-винилин, линимент по Вишневскому).

Таким образом, благодаря наличию в своих составах веществ, обладающих биологической активностью, жидкие продукты переработки сапропелей Омской области являются перспективными для изолированного применения в медицине в качестве лекарственного средства дерматотропного ряда, а также для включения в различные композиты.

Литература

1. Третьяков А.Г. «Черное золото» – это не только нефть: О существенном богатстве Омской области – залежах сапропеля / А.Г. Третьяков, В.А. Левицкий // Регион России, 1999. – № 4. – С. 93-97.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

ГЕМОРЕОЛОГИЧЕСКАЯ И ЦЕРЕБРОПРОТЕКТОРНАЯ АКТИВНОСТЬ

ЭКСТРАКТОВ ЭКДИСТЕРОИДСОДЕРЖАЩИХ РАСТЕНИЙ И РАЗРАБОТКА

НА ИХ ОСНОВЕ НОВЫХ ПРЕПАРАТОВ

Плотников М.Б.*, Алиев О.И.*, Васильев А.С.*, Плотникова А.М.*, Логвинов С.В.**, Пугаченко Н.В.**, Потапов А.В.**, Краснов Е.А.**, Калинкина Г.И.** *НИИ фармакологии Томского НЦ Сибирского отделения РАМН, Томск **Сибирский государственный медицинский университет, Томск E-mail: mbp2001@mail.ru Изменения реологических свойств крови, объединяемые под общим понятием синдрома повышенной вязкости крови (СПВК), являются важным звеном в патогенезе различных патологических состояний (сердечно-сосудистые расстройства, сахарный диабет, опухолевый рост и т.д.) и осложняют их течение, поэтому актуально изыскание средств – корректоров СПВК. На оригинальной модели СПВК in vitro проведен скрининг ряда экстрактов растений Сибири и их действующих начал и показано, что экдистероидсодержащие растения могут быть перспективными источниками для разработки эффективных гемореологических средств. В условиях экспериментальных моделей патологических состояний, сопровождающихся СПВК – сердечно-сосудистых заболеваний (ишемия головного мозга, инфаркт миокарда, артериальная гипертензия), диабета, а также истощающей физической нагрузке, выявлена способность экстрактов отдельных экдистероидсодержащих растений проявлять свойства корректоров нарушений гемореологического статуса путем воздействия на плазменные и клеточные факторы формирования СПВК. Среди исследованных объектов наиболее выраженной гемореологической активностью обладали экстракты левзеи сафлоровидной (ЭЛС), лихниса хальцедонского (ЭЛХ) и серпухи венценосной (ЭСВ).

У крыс с моделями ишемии головного мозга, инфаркта миокарда и артериальной гипертензии ЭЛС и ЭЛХ препятствовали патологической модификации формы эритроцитов, что проявлялось повышением количества дискоцитов и снижением доли дегенеративно измененных форм. Этот положительный эффект исследуемых экстрактов экдистероидсодержащих растений связан с их влиянием на содержание и соотношение различных фракций липидов в мембранах эритроцитов. ЭЛС ограничивал снижение общего содержания липидов и фосфолипидов в эритроцитарных мембранах, повышал количество сфингомиелина и фосфатидилсерина. ЭЛХ не оказывал влияния на общее количество липидов в мембранах эритроцитов, однако доля фосфолипидов значимо возрастала за счет повышения содержания сфингомиелина и фосфатидилхолина. ЭЛС и ЭЛХ препятствовали избыточному накоплению в мембранах лизофосфолипидов.

Снижение выраженности гемореологических нарушений у крыс с ишемией головного мозга под влиянием ЭЛС и ЭЛХ сопровождалось уменьшением доли нефункционирующих капилляров в коре головного мозга, ограничением депрессивного действия ишемии на электрическую активность головного мозга, снижением количества нейронов с обратимыми и необратимыми изменениями (тотальный хроматолиз с образованием «клеток-теней», гиперхромия и сморщивание).

На модели сахарного диабета, развивающегося при введении крысам аллоксана, наряду с выраженной гемореологической активностью ЭСВ, ограничивал снижение массы тела животных и проявил гипогликемическое действие.

Полученные результаты обосновывают перспективность разработки новых средств, обладающих гемореологической активностью, на основе экстрактов экдистероидсодержащих растений.

Тромбозы и нарушения микроциркуляции являются важным звеном патогенеза сердечно-сосудистых заболеваний и существенным фактором риска таких осложнений, как инфаркт миокарда и инсульт. При интенсивных физических нагрузках у спортсменов и особенно у нетренированных людей также происходит активация свертывающей системы крови.

При воспроизведении моделей артериальной гипертензии, инфаркта миокарда и ишемии мозга у крыс наблюдалось повышение АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов и активация плазменного звена коагуляции. Кроме того, у спонтанно гипертензивных крыс отмечено снижение антиагрегантной активности эндотелия сосудистой стенки, а у животных с моделью ишемии мозга уменьшалось время образования фибринового сгустка и повышалась максимальная скорость свертывания крови.

Однократная истощающая физическая нагрузка при беге на тредбане вызывала существенный рост агрегации тромбоцитов и увеличение ряда параметров, характеризующих коагуляционные свойства крови.

Экстракты лихниса и левзеи, стандартизованные по содержанию экдистерона, в дозе 150 мг/кг вводили внутрижелудочно животным с моделями ишемии мозга и сердца ежедневно в течение 5 дней, спонтанно гипертензивным крысам и при истощающей физической нагрузке – 14 дней. Курсовое введение исследуемых экстрактов у крыс в условиях всех моделей вызывало уменьшение АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов.

У спонтанно гипертензивных крыс исследуемые экстракты при их курсовом применении в два раза повышали антиагрегантную активность эндотелия сосуда. В опытах in vitro было установлено, что экстракты левзеи и лихниса ослабляли агрегацию тромбоцитов, вызванную различными индукторами, реализующими свой эффект через различные сигнальные системы: тромбином, коллагеном, арахидоновой кислотой, что свидетельствует о неспецифическом характере антитромбоцитарной активности экстрактов.

Снижение под действием экстрактов левзеи и лихниса функциональной активности тромбоцитов, являющихся пусковым звеном каскада плазменных реакций свертывания крови, способствовало уменьшению гиперкоагуляционного синдрома у животных с моделями сердечно-сосудистых расстройств, что проявлялось замедлением фаз свертывания крови и увеличением протромбинового времени. Этот эффект экстрактов экдистероидсодержащих растений также может быть связан с их отмеченной ранее способностью снижать в крови уровень фибриногена. В отличие от выраженного действия экстрактов левзеи и лихниса на свертывающую систему крови в условиях моделей сердечно-сосудистых заболеваний, препараты оказались малоэффективны в этом виде активности при однократной истощающей физической нагрузке.

Полученные данные позволяют считать целесообразным разработку новых лекарственных средств на основе экстрактов экдистероидсодержащих растений лихниса и левзеи в качестве комплексно действующих и не имеющих противопоказаний средств влияния на гемостаз при сердечно-сосудистых заболеваниях.

Одним из направлений научной работы фармацевтического факультета ОмГМА является поиск противопаразитарных лекарственных средств из растительного сырья, произрастающего в Омской области.

Население Западной Сибири, особенно проживающее в районах Обь-Иртышского басейна, на 80-90 % поражено описторхозом [1]. С другой стороны, гигиеническое состояние условий проживания населения способствует распространению лямблиоза – не менее опасной кишечной инвазии. Все чаще встречается микст-патология описторхоз + лямблиоз, требующие назначения нескольких препаратов.

Значительный интерес в этом плане представляет род Соссюрея и, в частности, с. горькая, ряд видов которого широко используется в народной медицине для лечения заболеваний печени, почек, желудочно-кишечного тракта, при диарее, экземе и др.[2].

Целью настоящей работы явилось фитохимическое и анатомо-морфологическое исследование соссюреи горькой как перспективного лекарственного растения для разработки средств фитотерапии лямблиоза и описторхоза.

Материалы и методы Сырьем для исследования служили надземные части растений, заготовленные в фазу цветения (конец июля – конец августа) в районе пос. Одесский и г. Калачинск Омской области.

Проведенные фитохимические исследования растений, выявили наличие сесквитерпеновых лактонов, флавоноидов, кумаринов, дубильных веществ, эфирных масел, полисахариды, аминокислоты и др. Кроме того, были определены товароведческие показатели травы соссюреи горькой. Результаты представлены в таблице.

Товароведческие показатели травы соссюреи горькой

–  –  –

Исследование морфологических признаков соссюреи горькой проводилось на свежем и гербарном образцах визуально с использованием бинокулярного микроскопа МБС-10.

Микроскопические исследования соссюреи горькой проводили на свежем и гербарном материалах. При приготовлении препаратов применялось осветление в 5 %-ном растворе натрия гидроксида, с последующей заливкой хлоралгидратом.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006 Выводы

Таким образом, в соссюрее горькой были обнаружены следующие классы БАВ:

сесквитерпеновые лактоны, флавоноиды, кумарины, дубильные вещества, эфирное масло, полисахариды, аминокислоты и др.

По товароведческим признакам сырье соответствует нормам, установленным для трав ГФ XI издания.

Характерными диагностическими признаками соссюреи горькой могут служить:

• стебли ребристые, шероховатые, голые;

• прикорневые и нижние листья эллиптические, черешковые, выемчатонеравнозубчатые, редко – цельнокрайние; стеблевые – короткочерешковые или сидячие, более мелкие, иногда немного низбегающие, цельнокрайние;

• наружные листочки обертки короткие, ланцетные, острые или на верхушке зубчатые, средние – на верхушке расширенные в округлые, пленчатые, по краям зазубренные;

• ярко выраженная кутикула;

• эпидерма образует складки, создавая морщинистость листовой поверхности;

• лист дорзивентрального строения;

• кутикулярная мозаика хорошо выражена на верхней эпидерме - складчатость лучеобразного характера;

• волоски нитевидные двух типов: многоклеточно-прямые и изогнутые, туповерхушечные, 4-6-клеточные и одноклеточно-извилистые с многоклеточным базисом;

• эфирно-масличные железки на обеих сторонах листа, расположены в углублениях.

Литература

1. Завойкин В.Д., Зеля О.П., Сокерина О.А. Современное состояние проблемы описторхоза в Западной Сибири // Материалы I Междунар. конф. «Актуальные проблемы инфектологии и паразитологии». Томск, 2001. С.99.

2. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование. Санкт-Петербург: Наука, 1993. С. 165-166.

Метод фракционирования позволяет выделить из растительного сырья узкую группу органических соединений. Диэтиловый эфир извлекает основную массу терпеноидных соединений, а также фенольные, жирные и смоляные кислоты. При экстракции этилацетатом в раствор переходят катехины, стиблены, лейкоантоцианы. В изопропиловый спирт и воду переходят сахара, полиглюкозиды флаваноидов, олигомерные лейкоантоцианы и конденсированные фенольные соединения.

В работе использовали надземную часть кипрея узколистного Chamerion angustifolium (L.) Holub, заготовленного в Саянском районе Красноярского края в июле 2004 года. Сырье сушили в тени до воздушно-сухого состояния и измельчали до размера частиц 1-2 мм.

Изучение химического состава кипрея показало, что основными компонентами являются полисахариды (43,09%), целлюлоза (16,01%) и лигнин (21,67%).

Методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой с использованием спектрометра серии IRIS Intrepid (Thermo Electron, США) проведен анализ кипрея на содержание макро- и микроэлементов. Навески образцов предварительно разлагали путем мокрого озоления. Данным методом в кипрее узколистном обнаружено содержание 26 элементов. Установлено, что растение накапливает большое количество (мг/кг сухого сырья): кальция – 5824,0; калия – 3116,2; магния – 908,4; натрия – 279,0; алюминия – 169,3; железа – 159,6; хрома – 77,3; цинка – 56,9; марганца – 55,1; стронция – 30,1; бария – 13,4 и меди – 12,8.

С целью определения количества и состава основных классов экстрактивных веществ была проведена последовательная экстракция кипрея узколистного группой растворителей с возрастающей полярностью. Выход экстрактивных веществ от абсолютно сухой навески составил: диэтиловым эфиром – 4,10%, этилацетатом – 3,24%, изопропанолом – 11,50%, водой – 26,31%. Общий выход – 45,15%.

Экстракты кипрея, полученные в результате последовательной экстракции, были проанализированы на содержание витаминов:

аскорбиновой кислоты (С), рутина (Р) и каротина (А) (таблица).

Содержание витаминов в экстрактах, выделенных при последовательной экстракции кипрея узколистного растворителями с возрастающей полярностью Витамины (мг% вес.) Экстракты С Р А Эфирный 69,38 33,04 12,90 Этилацетатный 164,17 64,32 21,69 Изопропанольный 93,85 47,58 17,54 Водный 244,07 84,00 29,87 Анализ результатов проведенных исследований показывает, что в кипрее узколистном высоко содержание микро- и макроэлементов, а также экстрактивных веществ, обогащенных витаминами.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

АНТИОКСИДАНТНЫЕ СВОЙСТВА ВОДНОГО ЭКСТРАКТА

ВЕГЕТАТИВНОЙ ЧАСТИ КИПРЕЯ УЗКОЛИСТНОГО

Полежаева И.В.*, Веселова О.Ф.**, Полежаева Н.И.*** *ГОУ ВПО «Красноярский государственный торгово-экономический институт», Красноярск **ГОУ ВПО «Красноярская государственная медицинская академия», Красноярск ***ГОУ ВПО «Сибирский государственный технологический университет», Красноярск E-mail: piv@akadem.ru Перспективность использования антиоксидантов растительного происхождения определяется тем, что в них содержится комплекс биологически активных веществ с различными механизмами действия. Чем разнообразнее препарат способен вмешиваться в процессы, вызываемые дефицитом кислорода при физических нагрузках, тем более выражен его защитный эффект [1].

Целью работы являлось изучение антиоксидантного действия водного экстракта кипрея узколистного Chamerion angustifolium (L.) Holub.

Исследования проводили на белых беспородных мышах, разделенных на две группы:

контрольную и опытную. У животных контрольной группы ежедневное плавание проводилось без фармакологической коррекции с введением по 0,3 мл дистиллированной воды. В опытной группе на фоне плавания с 1 по 21-й день эксперимента через металлический зонд в желудок вводили по 0,3 мл экстракта вегетативной части кипрея, приготовленного из расчета 1:30.

Результаты проведенных экспериментов свидетельствуют, что уровень физической работоспособности мышей в контрольной группе достоверно снижался вследствие ежедневных чрезмерных нагрузок по сравнению с исходным значением на 83,46 %, достигая минимума на 21-й день наблюдения.

Ежедневное введение водного экстракта кипрея опытным животным приводило к увеличению продолжительности плавания животных в режиме тестирующей нагрузки.

Работоспособность мышей повышалась по сравнению с исходным уровнем на 21-й день, а по сравнению с контрольной группой уже на 7-й день (таблица). Прирост средней продолжительности плавания составил по сравнению с исходным уровнем: на 14-й день на 28,0%, на 21-й день – 48,8%.

Влияние экстракта кипрея узколистного на продолжительность плавания мышей, мин День эксперимента Группа животных 1-й 7-й 14-й 21-й Контрольная 13,9±2,7 9,8±3,0 6,5±1,8 2,3±0,8 Опытная 13,5±3,5 14,6±2,2 17,4±1,5 20,1±1,2 Полученные результаты свидетельствуют, что водный экстракт кипрея, приготовленный из расчета 1:30 обладает антиоксидантным действием и способствует оптимизации резервных возможностей организма при выполнении интенсивных физических нагрузок.

Литература

1. Е.А.Александрова // Журнал экспериментальной и клинической фармакологии, 2005.

Т.68. № 5. С. 72-78.

В последние годы установлено, что полисахариды растений обладают широким спектром биологической активности. Однако в литературе очень мало данных об их влиянии на ионные каналы возбудимых мембран. В то же время, очевидно, что сведения о мембранотропных свойствах растительных полисахаридов необходимы для понимания механизмов многостороннего физиологического и фармакологического действия этих веществ. В Отделе молекулярной иммунологии и биотехнологии Института физиологии Коми НЦ УрО РАН выделены пектиновый полисахарид – танацетан TVF из пижмы обыкновенной Tanacetum vulgare L.[1], пектиновый полисахарид-силенан SVC и кислый арабиногалактан AG из каллусной культуры смолевки обыкновенной Silene vulgaris [2]. Цель данной работы – сравнительное изучение влияния танацетана, силенана и арабиногалактана на калиевые каналы мембраны нейронов моллюска Lymnaea stagnalis.

Опыты проведены на изолированных нейронах брюхоногого моллюска – прудовика обыкновенного Lymnaea stagnalis при комнатной температуре (20-22 °С). Использовали методику внутриклеточного диализа и фиксации мембранного потенциала на целой клетке.

Показано, что полисахариды TVF, SVC и AG в диапазоне концентраций от 0.1 до 10.0 мкг/мл, добавленные во внеклеточный физиологический раствор, т.е. при внеклеточном действии, слабо дозозависимо увеличивают амплитуду медленного калиевого ионного тока на 5-10 %. Эффекты развиваются быстро и стабилизируются через 2-3 мин. После отмывания в контрольном физиологическом растворе без полисахаридов в течение 7-10 мин K+-ток восстанавливается до исходных значений. Характер активирующего влияния полисахаридов TVF, SVC и AG на быстрый калиевый ток сходен с влиянием на медленный ток, т.е. также наблюдается незначительное обратимое увеличение амплитуды этого тока. Кинетика развития быстрого и медленного калиевых токов под влиянием изученных полисахаридов практически не изменяется. Кроме того, наблюдается начальное незначительное увеличение (возможно, в результате накопления полисахаридов на мембране) и последующее уменьшение неспецифических токов утечки мембраны под действием TVF, SVC и AG, что указывает на их мембраностабилизирующее действие, улучшающее функциональное состояние нервной клетки.

Таким образом, TVF, SVC и AG, активируя калиевые токи нейронов и снижая неспецифические токи утечки мембраны, обладают нейротропным и мембраностабилизирующим действием. Можно предположить, что именно с арабиногалактаном и с этим фрагментом в пектиновых полисахаридах: силенане и танацетане, – связаны обнаруженные нами электрофизиологические эффекты на нейрональную мембрану.

Литература

1. Полле А.Я, Оводова Р.Г., Чижов А.О., Шашков А.С., Оводов Ю.С. // Биохимия, 2002. – Т.67, №12. – С.1661-1667.

2. Gunter E.A., Ovodov Yu.S. // Phytochemistry, 2002. – V.59. – P. 703-708.

Изучали влияние синтетического стимулятора роста “Рифтал” (тетрагидрофуранол-3) на ростовые показатели (cырая и сухая масса, длина, относительная скорость роста);

физиологические показатели (фотосинтез, суммарное темновое дыхание, отношение суммарного темнового дыхания к гросс-фотосинтезу, альтернативные пути дыхания) надземных и подземных частей растений Triticum aestivum сорта Казахстанская 10, выращенных в норме и условиях дефицита элементов минерального питания.

“Рифтал” оказывал небольшое стимулирующее воздействие на массу корней, длину побега, относительную скорость роста (в 1,05; 1,1; 1,19 раза соответственно). Изучение влияния стимулятора роста на интенсивность процессов фотосинтеза и дыхания показало, что на процесс фотосинтеза он влиял незначительно, а дыхание усиливалось в 1,4 раза.

Расчет отношения суммарного темнового дыхания к гросс-фотосинтезу показал, что препарат увеличивал отношение (R/Pg) в 1,4 раза относительно контроля. С помощью ингибиторного анализа установили, что доля цитохромного, альтернативного пути и остаточного дыхания под действием стимулятора роста не изменялась.

В условиях дефицита элементов минерального питания действие препарата приводило к увеличению массы корней, длины побега, относительной скорости роста (в 1,05; 1,06; 1,19 раза соответственно). Под действием “Рифтала” наблюдалось усиление интенсивности дыхания в 1,12 раза. Расчет отношения суммарного темнового дыхания к гросс-фотосинтезу показал, что препарат увеличивал отношение (R/Pg) в 1,12 раза. С помощью ингибиторного анализа установили, что доля цитохромного пути усиливалась в 1,35 раза, а доля альтернативного пути и остаточного дыхания под действием “Рифтала” уменьшалась (в 0,83 и 0,67 раза соответственно).

Изучали влияние экзогенной салициловой кислоты на ростовые показатели (сырая и сухая масса, длина, относительная скорость роста); физиологические показатели (фотосинтез, суммарное темновое дыхание, отношение суммарного темнового дыхания к гросс-фотосинтезу, альтернативные пути дыхания) у проростков Triticum aestivum сорта Казахстанская 10.

Показано, что под влиянием салициловой кислоты наблюдается увеличение сырой массы растений в 1,12 раз, сухой массы растений в 1,13 раза, по сравнению с контрольными. Под действием салициловой кислоты происходило усиление роста растений в длину в 1,22 раза, относительно контрольных растений. Салициловая кислота оказывала стимулирующее влияние на относительную скорость роста растений в 4,87 раза. У исследуемых растений наблюдалось усиление интенсивности фотосинтеза в 1,21 раза, а суммарное темновое дыхание уменьшалось в 0,78 раза. Салициловая кислота способствовала снижению и стабилизации отношения суммарного темнового дыхания к гросс-фотосинтезу. В ходе ингибиторного анализа было установлено, что доля цитохромного пути под влиянием салициловой кислоты усиливалась на 26,7%, альтернативный путь дыхания снижался на 35,3%.

Таким образом, анализ морфофизиологических показателей исследуемых растений показал, что ускорение ростовых процессов под влиянием салициловой кислоты связано, в первую очередь, с интенсификацией процессов ассимиляции СО2, улучшением баланса основных энерго-трансформирующих процессов, а также стимуляцией более энергетически выгодного цитохромного пути.

Гуминовые (ГК), фульвиновые (ФК) кислоты и хитозан (Хз) являются стимуляторами роста растений и в то же время они могут быть использованы для очистки окружающей среды. Благодаря своему строению гуминовые и фульвиновые кислоты связывают органические и неорганические загрязняющие вещества, такие как соли тяжелых металлов [1]. Хитозан отличается высокой сорбционной способностью по отношению к ионам тяжелых металлов.

Для нашего исследования были выбраны стимуляторы роста растений: хитозан (Хз), гуминовые (Гк) и фульвиновые кислоты (Фк). В качестве загрязнителей мы использовали Сd(NO3)2 чда и Pb(NO3)2 чда в количестве: ПДК, 2ПДК, 4ПДК и 8ПДК. Нитраты металлов вносились в чистый песок, который и служил средой для выращивания гречихи сорта «Наташа». Дополнительно в контейнеры с песком в одинаковых количествах были внесены стимуляторы роста, полученные стандартными методами. Гуминовые и фульвиновые кислоты были получены экстрагированием из торфа, согласно методике Орлова Д.С. Хитозан был получен деацетилированием хитина панциря рачков Gammarus lacustris [2]. Cтимуляторы роста использовались в общепринятых массовых долях (в виде 0,01%-ных водных растворов).

Контрольный контейнер с песком был обработан только дистиллированной водой. По истечении 30-ти дней растения извлекались из песка и фиксировалось количество выживших растений, длина надземной и корневой частей. И по этим показателям судили о фитотоксичности Сd(NO3)2 и Pb(NO3)2. Опыты были поставлены в трехкратной повторности.

Так, урожайность гречихи, выращенной на грунте, в который помимо Сd(NO3)2 были добавлены хитозан, гуминовые и фульвиновые кислоты, составила в зависимости от массовой доли Сd(NO3)2 769–1319 шт/м2; 695–1429 шт/м2; 1136–1282 шт/м2 соответственно в сравнении с 293–842 шт/м2 без обработки стимуляторами (грунт содержал только Сd(NO3)2).

Длина надземной части растений, выращенных на грунте, содержащем Сd(NO3)2, составила 8,1-10,1 см, на грунте с Сd(NO3)2 + Гк составила 8,8-10,2 см, на грунте с Сd(NO3)2 + Фк – 11,1-12,8 см, на грунте с Сd(NO3)2 + Хз – 8,9-13,4 см. Урожайность гречихи, выращенной на грунте, содержащем Pb(NO3)2 составила 293-586 шт/м2, в то время как урожайность растений, выращенных на грунте, обработанном Pb(NO3)2 +Гк, находилась в пределах 659-1575 шт/м2;

Pb(NO3)2 + Фк – 476-1685 шт/м2; Pb(NO3)2 + Хз – 1135-1392 шт/м2. Длина надземной части гречихи, выращенной на песке, в который был внесен нитрат свинца, находилась в пределах 8,3-11,5 см в сравнении с 10,2-13,6 см для Pb(NO3)2 +Гк, 8,6-14,7 для Pb(NO3)2 + Фк и 10,6-14,8 для Pb(NO3)2 + Хз. В длине корневой части существенных изменений не было зафиксировано. Таким образом, полученные результаты показали, что используемые стимуляторы роста снижают фитотоксическое действие Сd(NO3)2 и Pb(NO3)2 на развитие гречихи.

Литература

1. Р. Тейт Органическое вещество почвы. – М. : Мир, 1991. – 399 с.

2. Голицин В.П., Цветков В.Г., Иванов А.В., Гартман О.Р. Способ получения хитозана // Патент РФ № 2065447 от 20.08.1996.

Исследовали функциональные свойства лейкоцитов периферической крови 2.5 мес.

крыс самцов Wistar (133.1±4.2 г, n=23 шт) с фенилгидразиновой (ФГ) анемией и с ФГ-анемией на фоне предварительных инъекций фитоэкдистероида – 20-гидроксиэкдизона (20Е).

Показано, что в ответ на введение ФГ происходит достоверное снижение фагоцитарной активности (ФА) клеток, что можно объяснить, например, мембраноповреждающим действием ФГ. В подтверждение этому мы наблюдаем снижение (P0.2) осмотической стойкости лейкоцитов. У анемичных крыс в опытах с гипоосмотическими нагрузками зафиксировано максимальное увеличение размеров клеток. Характер объемных изменений клеток при повышении трансмембранного осмотического градиента демонстрирует нарушение реакций регуляции объема, невозможность полного восстановления объема клеток (1 ч в 0.45% NaCl). О наличии гемолитической анемии свидетельствует существенное увеличение (P0.01) количества ауторозеток, способствующих освобождению крови от поврежденных и старых эритроцитов. Как следствие развития защитной реакции клеток в ответ на действие гемолитика, наблюдаем достоверное (P0.1) увеличение общего количества лейкоцитов в периферической крови, особенно гранулоцитов. Наряду с этим в лейкоформуле отмечается снижение агранулоцитов (моноцитов), участвующих в процессе фагоцитоза.

Введение ФГ на фоне предварительных инъекций 20Е приближают показатели фагоцитоза к таковым у интактных. Вместе с тем, повышается осморезистентность клеток как по с равнению с анемичными крысами (57.7 против 26.2%, P0.1), так и по сравнению с интактными (57.7 против 52.2%). Общее количество лейкоцитов и лейкоформула при этом оказываются близки к таковой у интактных (за исключением повышенного уровня моноцитов), что можно рассматривать как адаптивное действие препарата 20Е. В крови крыс отмечается меньшее количество ауторозеток по сравнению с анемичными, которым вводили только ФГ (P0.02). То есть, 20Е способствует стабилизации мембраны эритроцитов.

В результате – более быстрый выход животных из состояния гемолитической анемии.

Опытами с гипоосмотическими нагрузками показано формирование «сберегающего» типа реагирования нейтрофилов и лимфоцитов крови животных, которым вводили 20Е до гемолитика, на физико-химические параметры среды, проявляющегося в ограничении набухания клеток при снижении концентрации окружающего раствора (с 0.9 до 0.2% NaCl).

Осморегуляторные реакции лейкоцитов обеспечивали практически полное восстановление исходного объема клеток только у интактных животных и, у тех, которым вводили 20Е до гемолитика.

Таким образом, 20Е, введенный до гемолитика, повышает фагоцитарную активность клеток белой крови крыс Wistar, осморезистентность лейкоцитов, способствует «нормализации» картины крови, стабилизирует мембрану клеток, снижает количество ауторозеток, свидетельствуя, тем самым, об адаптивных возможностях исследуемого препарата в присутствии гемолитического яда – фенилгидразина, и о возможности использования его в качестве профилактического средства при опасности развития гемолитических анемий.

Препараты корней одуванчика Taraxacum officinale Webb.S.L. и листьев подорожника Plantago major широко используются официальной и традиционной медициной для лечения воспалительных процессов, заболеваний сердечно-сосудистой системы, желудочнокишечного тракта и печени, а также для лечения ран. Протеолитические ферменты играют существенную роль в жизнедеятельности растений, осуществляя гидролиз запасных белков при прорастании семян, активацию проферментов и прогормонов и многое другое. Наиболее изучены протеиназы плодов и семян растений, намного меньше – протеиназы листьев и корней. Методом высаливания, аффинной и ионообменной хроматографии выделены гомогенные сериновые протеиназы – тараксализин, плантаголизин и плантазин. Тараксализин, выделенный из корней одуванчика, имеет молекулярную массу 23 kDa. Оптимум рН, определенный по гидролизу GLP-AAL-pNA, равен 8.0; КМ=0.37 с-1. Температурный оптимум его активности – 40°С; фермент стабилен в области рН 6.0-9.0. Тараксализин гидролизует пептидные связи гидрофобных и кислых аминокислот, ингибируется специфическими ингибиторами сериновых протеиназ DFP и PMSF. N-концевая последовательность имеет 33% остатков, идентичных последовательности известного субтилизиноподобного фермента из сока дыни. Наибольшая активность протеиназы наблюдается в латексе корней в конце апреля, после появления растений из-под снега. Второй пик активности возникает в период массового цветения одуванчика и образования семян.

Плантаголизин, выделенный из листьев подорожника, имеет молекулярную массу 19 kDa, рН-оптимум 8.1; pI=5.0. Протеиназа может расщеплять связи гидрофобных аминокислот Phe, Lеu, хуже Pro, Arg, Lys, а также способна гидролизовать коллаген 1 типа плаценты человека. Плантаголизин теряет активность в присутствии DFP, PMSF, ионов Hg2+.

N-концевая последовательность на 37% совпадает с таковой для субтилизина дрожжей Schizosaccharomyces pombe.

Плантозин имеет молекулярную массу 25 kDa, pH-оптимум 8.0; pI=4.9. Субстратная специфичность протеазы сравнима с таковой для тромбина и тканевых калликреинов и гидролизует р-нитроанилиды пептидов с Arg и Lys в P1 положении. Протеиназа инактивируется DFP и PMSF, Hg2+, а также типичными ингибиторами трипсина.

Плантозин активирует в сыворотке крови тромбин и плазмин. Активность ферментов из листьев подорожника поддерживается на постоянном уровне в течение всего вегетационного периода.

Известно, что в формировании взаимоотношений с представителями фитопланктона и микроорганизмами участвуют углеводы высших водных растений и аминокислоты [1].

Консорциум микроорганизмов, формирующийся в ценозе растений, характеризуется присутствием всех таксонов бактерий, отмеченных для ризопланы и филлосферы высших растений, в том числе Azospirillum, Xanthomonas, Pseudomonas, Flavobacterium [2].

Цель нашей работы состояла в изучении активности гликополимеров рдеста пронзеннолистного по отношению к бактериям, широко распространенным в водном окружении макрофитов. Для реализации цели исследовали влияние растворов полисахаридов (ПС) рдеста на рост микроорганизмов.

В качестве тест-микроорганизмов использовали: Xanthomonas campestris B-610, Micrococcus luteus B-109, Azospirillum brasilense Sp245. Методом гель-фильтрации из водноспиртового и водного экстрактов биомассы рдеста были получены полисахаридсодержащие фракции, различающиеся по молекулярной массе и заряду: условно названные “нейтральными” (н-ПС1, н-ПС2) и “кислыми” (к-ПС3, к-ПС4, к-ПС5). Анализ моносахаридного состава полисахаридов рдеста методами тонкослойной и газожидкостной хроматографии показал наличие в составе н-ПС1 рамнозы, фукозы, глюкозы, маннозы, галактозы, глюкозамина для; глюкозы, маннозы, галактозы – для н-ПС2; рамнозы, глюкозы, галактозы, маннозы – для к-ПС-3; глюкозы, галактозы, рамнозы, маннозы – для к-ПС4 и рамнозы, маннозы, глюкозы – для к-ПС5.

Обнаружено влияние этих ПС на накопление биомассы тест-микроорганизмов, растущих в присутствии и отсутствии (контроль) указанных выше ПС в концентрации 40 мкг/мл, что составляло от 0,12 до 0,22 М ПС. Эксперименты выявили, что добавление к-ПС4 к среде выращивания приводит к уменьшению на 23% бактериальной массы A. brasilense Sp245, н-ПС1 и н-ПС2 – оказывают аналогичное действие (на 26%) на X. campestris B-610, а к-ПС5 на 13% на M. luteus B-109. В то же время к-ПС4 стимулирует рост X. campestris B-610 на 25% и M. luteus B-109 на 7%, а н-ПС2 приводит к нарастанию биомассы A. brasilense Sp245 на 43%. Все обнаруженные эффекты наиболее ярко проявляются после 11-13 часов выращивания культуры, при этом ПС не оказывают влияния на динамику роста популяции. Эти результаты согласуются с ранее полученными данными о таксисе, которые выявили следующую тенденцию: н-ПС1, н-ПС2 рдеста проявляли аттрактивные свойства для клеток A. brasilense Sp245, к-ПС3, к-ПС4 и к-ПС5 – для X. campestris B-610, а к-ПС3 и к-ПС4 – для M. luteus B-109. Проведенные эксперименты доказывают участие полисахаридов высших водных растений в формировании бактериального ценоза и несколько расширяют представление о спектре физиологической активности гликанов водных растений, в частности, об избирательном стимулировании или ингибировании роста отдельных групп микроорганизмов в окружающей растение среде.

Литература

1. И.В. Бурковский, А.П. Столяров // Успехи современной биологии, 2000. – Т.120, №5. – С. 433-440.

2. Г.М. Зенова, Э.А. Штина, С.Н. Дедыш и др. // Микробиология, 1995. – Т.64. №2. – С. 149-164.

В настоящее время в отечественной и мировой науке наблюдается повышенный интерес к изучению грибов. Это связано, прежде всего, с кардинальным пересмотром значимости и уникальности экологических функций, контролируемых грибами в природных экосистемах. Во-вторых, грибы были и остаются одними из основных и перспективных объектов биотехнологии.

Особое внимание привлекает ксилотрофный базидиомицет Fomitopsis officinalis (Vill.: Fr.) Bondartsev et Singer, известный как трутовик лекарственный или лиственничная губка, который активно используется в народной и официальной медицине на протяжении нескольких тысячелетий. В основном о целебных свойствах трутовика известно из прописей Диоскорида, древнегреческого врача. В России он тоже был известен и вплоть до прошлого века считался традиционным лекарством против туберкулеза и даже служил для России прибыльным товаром. Только в 1870 году Россия экспортировала в Европу 8 тонн сушеного трутовика. Трутовик, по описаниям русских знахарей и врачевателей Востока, применяют при следующих заболеваниях: инфекционные (грипп, вирусные заболевания, туберкулез), опухолевые (доброкачественные и злокачественные опухоли), заболевания почек и поджелудочной железы, желудочно-кишечные заболевания. Применяется как присыпка при гнойных ранах и язвах.

Цель – исследование антибиотической деятельности трутовика лекарственного.

В работе использовали штамм Fomitopsis officinalis из коллекции культур грибов лаборатории низших растений Биолого-почвенного института ДВО РАН, мицелий которого выращивали для эксперимента на сусло-агаре в чашках Петри. В качестве тест-объектов использовали штаммы следующих патогенных бактерий: Esherihia coli, Staphilococcus aureus, Salmonella typhimurium, Listeria monocutogenes, Yersinia pseudotuberculosis. Изучение антибиотической активности проводили с применением общеизвестного метода агаровых блочков.

В результате поставленных экспериментов установлена бактерицидная активность трутовика лекарственного в отношении Y. pseudotuberculosis (зона подавления роста и лизиса клеток составила от 5 до 11 мм), S. typhimurium (2-3 мм), E. coli (1-2 мм).

В экспериментах с L. monocutogenes обнаружены зоны ферментации в пределах 4-5 мм.

В экспериментах с St. aureus наблюдали вторичный рост бактерий.

Таким образом, нами установлено, что ксилотрофный базидиомицет F. officinalis обладает свойством активно ингибировать размножение Y. pseudotuberculosis – возбудителя дальневосточной скарлатиноподобной лихорадки (псевдотуберкулеза человека). Что свидетельствует о перспективности дальнейших исследований в направлении изучения биологической активности трутовика лекарственного.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ И АНТИМЕТАСТАТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ

АЛАНИЛАМИДНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ БЕТУЛОНОВОЙ КИСЛОТЫ

Сорокина И.В., Толстикова Т.Г., Жукова Н.А., Рутман М.Ю.

Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова СО РАН, Новосибирск E-mail: sorokina@nioch.nsc.ru Благодаря успехам, достигнутым в последнее время в области синтетической химии высших терпеноидов, в ряду производных лупана получены новые потенциально ценные для медицины соединения. В Новосибирском институте органической химии синтезированы производные бетулоновой кислоты (БК) с фрагментами - или -аланина у атома С-28 и их метиловые эфиры [1]. Установлено, что данные тритерпеноиды малотоксичны при внутрижелудочном введении (среднелетальная доза свыше 5000 мг/кг), оказывают антиоксидантное действие на мышей в модели токсического гепатита [2], снижают степень некротических и дистрофических повреждений, возникающих в печени и почках крыс под действием комплекса цитостатических препаратов [3]. В данной работе исследована противоопухолевая и антиметастатическая активность БК и ее аланиламидных производных у мышей линий C57BL/6 и СВА с перевиваемыми опухолями – карциномой легких Льюис и лимфомой RLS. Изучено также действие этих агентов на фоне полихимиотерапии (циклофосфан, винкристин, адриамицин, преднизолон).

Установлено, что амиды БК с остатками - и -аланина и их метиловые эфиры при однократном внутрижелудочном введении в дозе 500 мг/кг задерживают рост первичного узла карциномы легких Льюис на 22-26 % и в два раза уменьшают площадь ее метастазов в легких и печени по сравнению с контролем. При курсовом введении в дозе 50 мг/кг в течение 8 дней противоопухолевый эффект карбоксилированного амида БК с -аланином снижается, а антиметастатический – существенно повышается (в 7-9 раз). БК в этих же условиях не оказывает ингибирующего влияния на рост трансплантатов карциномы и лимфомы, однако заметно (в 1,5 и 6 раз соответственно) тормозит диссеминацию опухолей. Метилированные производные БК, по сравнению с карбоксилированными, проявляют меньшую противоопухолевую активность и не оказывают антиметастатического действия. Обнаружено, что амид БК с остатком -аланина значительно потенцирует цитостатический и антиметастатический эффекты противоопухолевых препаратов. Аналогичное действие его метилового эфира менее выражено. БК и ее эфир в условиях полихимиотерапии не усиливают противоопухолевое действие, хотя и не стимулируют митотическую активность опухолевых клеток карциномы и лимфомы.

Сделан вывод о том, что введение аланиламидных заместителей в молекуле БК усиливают противоопухолевое и антиметастатическое действие, а метилирование карбоксильной группы снижает противоопухолевый и антиметастатический потенциал БК и ее аланиламидов. Амид БК с остатком -аланина может рассматриваться как перспективный агент для включения в комплексную полихимиотерапию злокачественных опухолей.

Литература

1. Н.И. Петренко, Н.В. Еланцева, В.З. Петухова и др. // Химия природных соединений, 2002. – №4. – С. 276-283.

2. И.В. Сорокина, Т.Г. Толстикова, Е.Б. Бубнова и др. // Научный вестник Тюменской медицинской академии. Биоантиоксиданты, 2003. – №1. – С. 60-61.

3. И.В. Сорокина, Т. Г. Толстикова, Н.А. Жукова и др. // Доклады академии наук, 2004. – Т.399, №2. – С. 274-277.

В работе выполнен сравнительный анализ накопления антоцианов в плодах и листьях некоторых видов Berberis и Mahonia. Показано, что для большинства видов барбариса различие антоцианового комплекса плодов и листьев значительно: в первом случае основным компонентом пигментов является пеларгонидина 3-глюкозид (Pg-3-Glu, около 50 мг на 100 г плодов), в то время как в листьях – цианидина 3-глюкозид. Комплекс изменяется при переходе к барбарису обыкновенному пурпурнолистной формы (B. vulgaris athropurpureum) – кроме заметно большего накопления антоцианов в плодах (до 200 мг) основным антоцианом является Cy-3-Glu, при существенном вкладе 3-цианидинов дельфинидина, петунидина, пеларгонидина, пеонидина и мальвидина; причем все эти компоненты присутствуют и в листьях. Частично это справедливо и для B. ottawiensis Schneid. Антоцианы плодов магонии падуболистной (M. aquifolia) не только накапливаются в заметно больших количествах (до 300 мг), но и заметно отличаются от антоцианов плодов барбарисов: при практически полном отсутствии гликозидов пеларгонидина обнаруживается сложный спектр 3-глюкозидов и 3-рутинозидов антоцианидинов дельфинидинового и цианидинового рядов при преобладании в комплексе либо 3-глюкозида цианидина, либо 3-глюкозида дельфинидина.

В листьях же этого растения был найден только 3-глюкозид цианидина.

В последнее время особое внимание уделяется алкалоидам изохинолинового ряда, накапливаемым в различных частях растений данного семейства. Исследования, проведенные с использованием метода обращенно-фазовой ВЭЖХ, показали, что алкалоиды барбарисов и магонии имеют одинаковый качественный состав при несколько различающемся соотношении (см. рисунок): основным компонентом является берберин (3), несколько меньше содержание ятроризина (1) и пальматина (2).

mV А В мин Рис. Разделение алкалоидов магонии падуболистной (А) и барбариса обыкновенного (В).

Колонка: 1504 мм, Диасфер-110-С18, 5 мкм; подвижная фаза 40 об.% СH3CN, 1 об.% CH3COOH, 10-3 М С6H13SO3Na, 1 мл/мин; детектор: 420 нм.

В работе приведены качественные и количественные данные о накоплении алкалоидов в корнях, ветках и плодах различных видов барбарисов и магонии, выращенных в условиях Белгорода (Ботсад БелГУ) и некоторых других регионов России.

ХИМИЯ И ТЕХНОЛОГИЯ РАСТИТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ – IV ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ – Сыктывкар, 2006

ЭКДИФИТ – НОВЫЙ АКТОПРОТЕКТОРНЫЙ ПРЕПАРАТ

ИЗ СЕРПУХИ ВЕНЦЕНОСНОЙ (Serratula coronata L.) Тарлыков П.В., Бердин А.Г., Карилхан И., Кусаинова Д.Д., Альжанов С.С., Тулеуова Г.Х., Тулеуов Б.И., Адекенов С.М.

Институт фитохимии МОН РК, 100009, Республика Казахстан, Караганды, ул. Газалиева, д.4 Факс: +7(3212) 433773, E-mail: arglabin@phyto.kz Для ослабления действия неблагоприятных экологических факторов природного и техногенного характера, с которыми сталкивается современный человек, уменьшения последствий физических и эмоциональных нагрузок применяются актопротекторные препараты.

Целью работы являлась разработка нового актопротекторного препарата на основе доступного в Республике Казахстан сырья серпухи венценосной (Serratula coronata L.), содержащего в качестве основных фармакологически активных компонентов фитоэкдистероиды.

В траве этого растения содержится до 2% 20-гидроксиэкдизона [1], что на порядок превышает его количественное содержание в общеизвестном фармакопейном сырье – корнях Rhaponticum carthamoides [2]. Уникальность действия 20-гидроксиэкдизона заключается в том, что наряду с весьма высокой активностью он не обладает побочными гормональными эффектами, обычно присущими анаболическим стероидам.



Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 9 |
Похожие работы:

«BY9800130 Глава 3. КОМПЛЕКСНАЯ РАДИАЦИОННО-ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ПРИРОДНОЕ " п ^ ш, МЕСТ РАБОТЫ И ПРОЖИВАНИЯ НАСЕЛЕНИЯ 3. КОМПЛЕКСНАЯ РАДИАЦИОННО-ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ПРИРОДНОЙ СРЕДЫ, МЕСТ...»

«Министерство образования и науки Российской Федерации ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "НИЖЕГОРОДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. Р.Е. АЛЕКСЕЕВА" УДК 6...»

«западного НИИСЗ (Суйдинец, Кармин и др.), Пензенского НИИСХ (Пеликан), Ставропольского НИИСХ (Наследник) и т. д. Учитывая генетико-биологические особенности вида клевера лугового – строгий перекрестни...»

«ИЗВЕСТИЯ АКАДЕМИИ НАУК РЕСПУБЛИКИ ТАДЖИКИСТАН ОТДЕЛЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ И МЕДИЦИНСКИХ НАУК №1 (189), 2015 г. ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ УДК 581.132.633.11 Д.М.ДАВЛЯТОВА, М.Б.НИЯЗМУХАМЕ...»

«УДК 574.3:599.742.41 А.Н. ФАЙБИЧ ДЕМОГРАФИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ДЕПРЕССИВНОЙ ПОПУЛЯЦИИ ЛЕСНОГО ХОРЬКА (MUSTELLA PUTORIUS L.) В СЕВЕРНОЙ БЕЛАРУСИ Age structure of depressive population of polecat (Mustella puto...»

«Биокарта Bufo garmani ЖАБА ГАРМАНИ Bufo garmani (Amietophrynus garmani) Garman's Toad Составили: Нуникян Е.Ф. Дата последнего обновления: 31.10.2013 1. Биология и полевые данные 1.1 Таксон...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Кубанский государственный аграрный...»

«Ученые записки Таврического национального университета им. В. И. Вернадского Серия "Биология, химия". Том 27 (66). 2014. №5. Спецвыпуск. С. 63-69. УДК 502.753 ОСОБЕННОСТИ ЕСТЕСТВЕННОГО ВОЗОБНОВЛЕНИЯ КРЫМСКОЙ ПОПУЛЯЦИИ JUNIPERUS FOETIDISSIMA WILLD. Коренькова О.О. Таврический национальный...»

«Зарегистрировано в Минюсте России 6 июня 2013 г. N 28702 МИНИСТЕРСТВО ПРИРОДНЫХ РЕСУРСОВ И ЭКОЛОГИИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ПРИКАЗ от 12 апреля 2013 г. N 139 ОБ УТВЕРЖДЕНИИ АДМИНИСТРАТИВНОГО РЕГЛАМЕНТА ПРЕДОСТАВЛЕНИЯ ФЕДЕРАЛЬНЫМ АГЕНТСТВОМ П...»

«Министерство сельского хозяйства Российской Федерации ФГБОУ ВО "Красноярский государственный аграрный университет" М.А. Юдахина ПЧЕЛОВОДСТВО Методические указания Электронное издание Красноярск 2016 Рецензент Е.А. Козина, кандидат биологических наук, доцент Юдахина, М.А. П...»

«Самарская Лука: проблемы региональной и глобальной экологии. 2015. – Т. 24, № 1. – С. 109-113. УДК 582 ЗАМЕТКА О НАХОЖДЕНИИ Asplenium ruta-muraria L. НА ТЕРРИТОРИИ ЗАПАДНОЙ ЧАСТИ СОКОЛЬИХ ГОР © 2015 А.А. Головлёв Самарский государственный экономический университет, г. Самара (Россия) Поступила 10.10.2014 г....»

«Труды Никитского ботанического сада. 2010. Том 132 19 ГЕНОФОНД ПЕРСИКА И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В.К. СМЫКОВ, доктор сельскохозяйственных наук; А.В. СМЫКОВ, кандидат сельскохозяйственных наук; Т.А. ЛАЦКО, кандидат сельскохозяйственных наук; А.А. Р...»

«АНТИПИНА Ольга Валерьевна СПОСОБНОСТЬ ЛИСТЬЕВ И КОРНЕЙ ТЕПЛОЛЮБИВЫХ РАСТЕНИЙ ТАБАКА К ФОРМИРОВАНИЮ УСТОЙЧИВОСТИ К ГИПОТЕРМИИ 03.01.05 – физиология и биохимия растений АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2010 Работа выполнена в л...»

«Государственное бюджетное учреждение дополнительного образования "Белгородский областной детский эколого-биологический центр" Направление воспитательной работы "Воспитанник и его здоровье" "О чём рассказала ромашка" Познавательная программа Возраст участников 8 9 лет Под...»

«СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫЕ НАУКИ УДК 619:614.3:637.1 КАЧЕСТВО И БЕЗОПАСНОСТЬ МОЛОКА-СЫРЬЯ КАК ФАКТОР КОНКУРЕНТОСПОСОБНОСТИ МОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ Сергей Николаевич Семёнов, кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры ветеринарно-санитарной эксп...»

«Шлыков Сергей Николаевич ИНТЕНСИФИКАЦИЯ ПРОИЗВОДСТВА ПРОДУКТОВ МЯСНОГО СКОТОВОДСТВА НА ОСНОВЕ ПРОГРЕССИВНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ СЕЛЕКЦИИ И КОРМЛЕНИЯ ЖИВОТНЫХ 06.02.10 – частная зоотехния, технология производства продуктов животноводства АВТОРЕФЕРАТ диссе...»

«Ученые записки Таврического национального университета им. В. И. Вернадского Серия "Биология, химия". Том 27 (66). 2014. № 2. С. 196-201. УДК 663.236:543.06 УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ ПРОИЗВОДСТВА КОНДИТЕРСКИХ ПОЛУФАБРИКА...»

«ISSN 0536 – 1036. ИВУЗ. "Лесной журнал". 2006. № 6 7 ЛЕСНОЕ ХОЗЯЙСТВО УДК 630*181.28 Н.А. Прожерина, О.А. Гвоздухина, Е.Н. Наквасина Прожерина Надежда Александровна родилась в 1973 г., окончила в 1995 г. Поморский международный педагогический университет, кандидат биологически...»

«Эдгар М. Морсман Искусство коммерческого кредитования Art_of_commercial+.indd 1 03.06.2005 16:47:06 Edgar M. Morsman Jr. The Art of Commercial Lending Art_of_commercial+.indd 2 03.06.2005 16:47:55 Эдгар М. Морсман Искусство коммерческого кредитования Перевод с английского Москва Art_of_commercial+.in...»

«Белорусский государственный университет УТВЕРЖДЕНО Проректор по учебной работе БГУ ОСНОВЫ ПРОМЫШЛЕННОЙ АСЕПТИКИ Учебная программа для специальности 1-31 05 01 Химия (по направлениям) Направление специальности: 1-31 05 01-03 Химия (фармацевтическая...»

«БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА МУНИЦИПАЛЬНОЕ ОБРАЗОВАНИЕ Г.ПЕТЕРГОФ САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОЕ ОБЩЕСТВО ЕСТЕСТВОИСПЫТАТЕЛЕЙ МАТЕРИАЛЫ IX ежегодной молодежной экологической Школы-конфер...»

«Ф ГБО У В О У льяновская ГС Х А "У Т В Е РЖ Д А Ю " П роректор по учебной и воспитательной работе -V— у с• М.В. П остнова " //" 2015 г. /1 РА Б О Ч А Я П РО ГРА М М А Д И С Ц И П Л И Н Ы Ф И ЗИ К А Н аправление подготовки 35.03.03 Агрохимия и агропочвоведение (академический бак...»









 
2017 www.doc.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - различные документы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.