WWW.DOC.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Различные документы
 

«Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Иркутский государственный медицинский ...»

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего образования

«Иркутский государственный медицинский университет»

Министерства здравоохранения Российской Федерации

Кафедра фармацевтической и токсикологической химии

Е.А. Илларионова, И.П. Сыроватский

ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

ИЗ ГРУППЫ НЕЙРОЛЕПТИКОВ

Учебное пособие Иркутск ИГМУ УДК 543.2:615.214.2(075.8) ББК 35.66я73 И 44 Учебное пособие обсуждено на методическом совете фармацевтического факультета ИГМУ, рекомендовано к печати и использованию в учебном процессе на кафедре фармацевтической и токсикологической химии, протокол № 2 от 03.11. 2016 г.

Авторы:

Е. А Илларионова – д-р хим. наук, профессор, зав. каф. фармацевтической и токсикологической химии ФГБОУ ВО ИГМУ Минздрава России, И.П. Сыроватский – канд. фарм. наук, доцент каф. фармацевтической и токсикологической химии ФГБОУ ВО ИГМУ Минздрава России.

Рецензенты:

Заведующая кафедрой «Фармакогнозии и ботаники» Иркутского государственного медицинского университета, доктор фармацевтических наук, доцент В.М. Мирович.

Заведующая кафедрой «Фармацевтической технологии» Иркутского государственного медицинского университета, кандидат фармацевтических наук, доцент В.В. Гордеева.

Илларионова Е.А.

И 44 Химико-токсикологический анализ лекарственных средств из группы нейролептиков:

учебное пособие / Е.А. Илларионова, И.П. Сыроватский; ФГБОУ ВО ИГМУ Минздрава России, кафедра фармацевтической и токсикологической химии. – Иркутск : ИГМУ, 2016. – 31 с.

Учебное пособие охватывает раздел токсикологической химии, касающийся определения нейролептиков в биологических объектах. В пособии отражены сведения по фармако-токсикокинетическим характеристикам, токсикологии, физико-химическим свойствам наиболее распространенных нейролептиков и их метаболитов.

Учебное пособие предназначено для студентов обучающихся по специальности высшего профессионального образования «Медицинская биохимия», дисциплина «Основы токсикологической химии».

УДК 543.2:615.214.2(075.8) ББК 35.66я73 © Илларионова Е.А., Сыроватский И.П., 2016 © ФГБОУ ВО ИГМУ Минздрава России, 2016 СОДЕРЖАНИЕ Обозначения и сокращения

ВВЕДЕНИЕ

Общая характеристика

Фармакология и токсикология нейролептиков

Токсикокинетика и биотрансформация

Пробоподготока и методы определения

Тонкослойная хроматография

Газовая хроматография

Масс-спектрометрическое определение

Жидкостная хроматография

Радиоиммунный и радиорецепторный анализ

Тестовые задания

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

Обозначения и сокращения

Бюро СМЭ – бюро судебно-медицинской экспертизы ВЭЖХ – высокоэффективная жидкостная хроматография ГЖХ – газожидкостная хроматография ЛС – лекарственное средство МС – масс-спектрометрия НД – нормативная документация ТСХ – тонкослойная хроматография ХТА – химико-токсикологический анализ УФ – ультрафиолетовая область спектра рН – водородный показатель ПФИА – поляризационный флюроиммуноанализ ИФА – иммуноферментный анализ ЖЖЭ – жидкость-жидкостная экстракция ТФЭ = твердофазная экстракция ИК – инфракрасная область спектра ПИД – пламенно-ионизационный детектор АФД – азотно-фосфорный детектор ЭЗД – электронозахватный детектор ВЭЖХ/МС – сочетание методов высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии ГХ/МС – сочетание методов газовой хроматографии и масс-спектрометрии





ВВЕДЕНИЕ

Многие вещества из этой группы, относящиеся к психотропным средствам, используются наркоманами как отдельно, так и в комбинации с другими наркотиками, вызывают привыкание, зависимость и часто являются причиной отравлений.

Синтетические лекарственные средства из группы нейролептиков в последние годы занимают все большее место в незаконном обороте наркотиков на территории России. Лекарственные средства группы фенотиазина используются как транквилизаторы, антидепрессанты, антигистаминные средства. Сочетание этой группы лекарственных средств с другими препаратами, а также алкоголем представляет большую опасность для здоровья. В группу нейролептиков кроме производных фенотиазина входят также и другие лекарственные средства (галоперидол, клозапин и др.).

Производные фенотиазина обладают кумулятивными свойствами и длительно выводятся из организма, поэтому отравления могут наблюдаться при приеме обычных терапевтических доз. Клиника течения отравлений не характерна, не характерна также паталогоанатомическая картина, что затрудняет их установление как у живых лиц, так и в трупном материале.

Знание физико-химических свойств, растворимости, значение рКа, коэффициента распределения основных токсикантов данной группы поможет проведению методологически правильно построенного химикотоксикологического анализа на всех его стадиях, сделать научно обоснованный выбор объекта анализа, его размерности, соответствующей пробоподготовки, выбора предварительных и подтверждающих методов анализа, количественного определения и правильной интерпретации полученных данных.

Общая характеристика Нейролептики группы фенотиазина подразделяются на 3 класса в зависимости от вида заместителя в положении 10: аминопропильного, пиперидинового или пиперазинового, но для всех них характерно наличие в молекуле фрагмента -C-C-C-N структуры, определяющей нейролептическое действие. Основными представителями этой группы являются аминазин, пропазин, левомепромазин, алимемазин, метеразин, этаперазин, френолон, трифтазин, фторфеназин, тиопроперазин, перициазин, тиоридазин. Соединения, имеющие в молекуле только 2 атома углерода в заместителе, не являются нейролептиками, но обладают антигистаминным (прометазин) или антимускариновым (этопропазин) эффектами.

–  –  –

Физико-химические свойства. Основной характер производных фенотиазина обусловлен наличием в структуре молекулы гетероциклического атома азота (рКа 4) и третичного атома азота в алифатическом радикале (рКа 9,1-9,8).

При взаимодействии с кислотами фенотиазины образуют соли, легкорастворимые в воде, спирте, хлороформе, но практически нерастворимые в эфире и бензоле.

Основания фенатиазинов липофильные вещества, нерастворимые в воде, но растворимые в спирте, эфире, хлороформе, этилацетате. Абсорбция производных фенотиазина в УФ-области спектра характеризуется наличием 2 максимумов при: = 250 – 260 нм (Еуд= 35000 ) и = 300 315 нм (Еуд= 4500).

Сравнение УФ-спектров солей производных фенотиазина со спектрами их оснований показывает, что они практически идентичны. Следовательно, их УФ-спектры отражают только электронную структуру фенотиазина.

Структурная формула нейролептиков группы структуру фенотиазиновой части молекулы фенотиазина.(хлорпромазин, прометазин).

Хлорпромазин (аминазин) Промазин (пропазин) S S

–  –  –

Исключение представляют те производные, которые в положении 2 содержат радикалы со свободными n-электронами (тиоридазин, левомепромазин).

Сульфоксиды фенотиазинов имеют в отличие от нативных (основных) соединений, 4 максимума в УФ-области: при 230, 265, 285 и 400 нм.

Производные пиперазина (трифтазин, фторфеназин) являются наиболее активными психотропными препаратами данной группы. Они обладают небольшой антихолинергической активностью, однако при их применении высока вероятность проявления симптомов лекарственного паркинсонизма.

Препараты тиоксантенового ряда, которые, как и препараты фенотиазинового ряда, имеют заместители в положениях 2 и 10, сходны с ними по фармакологическим эффектам, но они менее выражены. Тиоксантены имеют в своей структуре двойную связь и могут существовать в форме цис- и трансизомеров. Цис-изомеры примерно в 20 раз более активны транс-форм или рацематов, а некоторые препараты этой группы эффективны только в том случае, если преимущественно находятся в виде цис-изомера (например, зуклопентиксол).

Бутирофеноны и дифенилбутилпиперидины (галоперидол, трифлуперидол, меторин, дроперидол, флуспирилен, пимозид, пенфлюридол) сходны по химическому строению. Некоторые бутирофеноны рассматриваются как замещенные пиперидины, а азоперон и флуанизон — как производные пиперазина. Галоперидол обладает наименее выраженной седативной и антимускариновой активностью, однако экстрапирамидные симптомы при его применении проявляются чаще.

Галоперидол Cl

–  –  –

Сульпирид и клозапин выделили в отдельную группу атипичных нейролептиков, так как при их применении симптомы лекарственного паркинсонизма проявляются крайне редко.

Клозапин (азалептин)

–  –  –

Фармакология и токсикология нейролептиков Антипсихотический эффект нейролептиков обусловлен блокированием центральных дофаминовых рецепторов. Некоторые нейролептики блокируют также адренергические и серотониновые рецепторы. По современным представлениям, развитие психозов связано с нарушением обмена некоторых медиаторов нервной системы и в первую очередь дофамина, норадреналина, серотонина. Большинство существующих антипсихотических лекарств либо блокируют рецепторы этих медиаторов, либо тормозят их высвобождение и обратный захват. Нейролептики оказывают различное действие на центральную и вегетативную нервную систему (блокируют рецепторы многих медиаторов).

Антипсихотический эффект, обусловленный в основном торможением дофаминовой передачи, дополняется успокаивающим, связанным с блокадой рецепторов норадреналина и серотонина. На этом фоне усиливается и увеличивается продолжительность действия принимаемых совместно с нейролептиками лекарств, угнетающих ЦНС, — препаратов для наркоза, снотворных и др. Торможение дофаминовой передачи является причиной и основного побочного эффекта нейролептиков — паркинсонического синдрома, проявляющегося снижением общей двигательной активности, замедленностью движений, дрожанием, повышением мышечного тонуса. Паркинсонизм и болезнь Паркинсона возникают при снижении посреднической роли дофамина в головном мозге. Многие нежелательные свойства нейролептиков связаны с угнетающим влиянием на рецепторы вегетативной нервной системы. Это и расширение сосудов, и снижение артериального давления, и подавление секреции желез, и понижение температуры тела.

Нейролептики второго поколения (атипичные нейролептики), например клозапин (лепонекс) при клинически полном нейролептическом спектре активности оказывают по сравнению с классическими нейролептиками избирательное нейрохимическое действие. Они селективно блокируют только дофаминовые D2- и D3- рецепторы определенных областей мозга (в частности, мезолимбической) и имеют некоторое сродство к серотониновым рецепторам, чем объясняются особенности их клинического действия, в частности малая выраженность побочных экстрапирамидных эффектов.

Новейшие нейролептики (рисперидон, оланзапин) обладают практически равным сродством к дофаминовым и серотониновым рецепторам. По эффективности они сравнимы или даже превосходят классические нейролептики при значительно более высокой переносимости. Ведущий принцип применения нейролептических средств основывается на зависимости между особенностями психотропного действия (избирательное или общее) и основными характеристиками психопатологического синдрома.

Одна из основных фармакологических особенностей нейролептиков — своеобразное успокаивающее действие, сопровождающееся уменьшением реакции на внешние стимуляторы, ослаблением психомоторного возбуждения и аффективной напряженности, подавлением чувства страха, ослаблением агрессивности. Они в основном используются для лечения различного рода психических заболеваний, главным образом, шизофрении или паранойи, а также: мании, делирия, ажитированной депрессии, тревожных состояний.

Кроме того, они эффективны при сильных беспокойствах, а некоторые из них обладают антидепрессивным действием. В качестве противорвотных средств их используют для контроля тошноты и рвоты, возникающих, например, при химиотерапии рака, и могут назначаться в комбинации с наркотическими аналгетиками, действие которых они потенцируют. Помимо действия на дофаминовые рецепторы, они вызывают антимускариновые, антигистаминные и антисеротониновые эффекты. Некоторые психотропные препараты этой группы блокируют -рецепторы, что способствует развитию ортостатической гипотензии. Применение клозапина часто сопровождается развитием у больных агранулоцитоза, поэтому при его использовании необходим постоянный контроль показателей крови и при первых проявлениях лейкопении следует прекратить прием препарата. Почти все препараты, применяемые как нейролептические средства, относятся к списку сильнодействующих веществ.

При их терапевтическом применении у некоторых больных отмечаются побочные нежелательные эффекты, а в случае передозировки или умышленного принятия их в повышенном количестве возможны серьезные отравления и летальный исход.

Отравления наблюдаются при приеме 5-10г (субстанции) и характеризуется резкой слабостью, потерей сознания, комой. Зрачки сужены, артериальное давление снижено, понижается температура тела, кожные аллергические реакции.

Первая помощь. При пероральном приеме препарата производят промывание желудка, используют активированный уголь, дают солевые слабительные для форсирования диуреза, крепкий чай (кофеин). На госпитальном этапе детоксикационная гемосорбция.

Токсикокинетика и биотрансформация Большинство нейролептиков характеризуется хорошим всасыванием в кровь из мест поступления при разных путях введения (перорально, внутримышечно). Они проникают через гематоэнцефалический барьер, однако накапливаются в мозге в значительно меньшем количестве, чем во внутренних органах (печень, легкие). При пероральном приеме биодоступность хлорпромазина составляет приблизительно 30%.

Нейролептики подвергаются биотрансформации в печени и выделяются в значительных количествах с мочой и частично с калом. При поступлении в кровь нейролептики связываются с белками плазмы крови преимущественно с альбуминами. Кажущийся объем распределения Vd для большинства нейролептиков составляет более 20 л/кг, однако имеются и некоторые исключения. Так, Vd для сульпирида составляет всего 2л/кг. Т1/2 большинства нейролептиков равен 10–30 ч. Лекарственные препараты с наиболее сильно выраженными липофильными свойствами, такие как пимозид и пенфлюридол, имеют Т1/2 100–200 ч, в то время как сравнительно более гидрофильный сульпирид практически полностью выводится с мочой в неизмененном виде с Т1/2 около 10 ч. Т1/2 фторфеназина после инъекции в виде энантата составляет 3,5 дня, а при введении в виде деканоата его Т1/2 достигает 7-10 дней. Для сравнения, при пероральном или внутримышечном введении этих препаратов в неэтерифицированном виде Т1/2 составляет 15-20 ч.

Всасываются фенотиазины как вещества основного характера преимущественно из кишечника. Гидрофобный характер оснований фенотиазинов способствует взаимодействию их с белками. Vd приближается к 100%, поэтому фенотиазины локализуются в тканях органов (мозг, печень, почки). Выводятся почками, в моче обнаруживается в основном в виде метаболитов.

Биотрансформация фенотиазинов протекает 3 путями:

• 1-й путь — трансформация в радикалах R1 и R 2 : N-O-S-деметилирование, которое приводит к увеличению полярности соединений; окисление R1боковой цепи;

• 2-й путь — окисление гетероциклического атома серы в сульфоксид или сульфон. Сульфоокисление — образование сульфоксидов со степенью окисления серы +4 и +6.

• 3-й путь — ароматическое гидроксилирование в положении 3 и 6 с последующим конъюгированием с глюкуроновой кислотой.

В результате изучения биотрансформации хлорпромазина было установлено, что при объединении всех известных путей метаболизма образуется более 150 возможных метаболитов препарата. В плазме крови образуется хлорпромазина сульфоксид. В результате деметилирования образуются моно- (нор1)- и дидесметил (нор)- метаболиты хлорпромазина, при окислении – хлор-промазин-N-оксид. Происходит ароматическое гидроксилирование в положении 7 и в меньшей степени в положении 3.

Большая часть фенольных метаболитов присутствует в форме конъюгатов, которые можно гидролизовать с помощью D-глюкурониларил-сульфатазы.

Присутствие небольшого количества 3-гидроксипромазина свидетельствует о процессе дегалогенирования. Дезаминирование дает 2-хлорфенотиазин-10пропионовую кислоту, а при полной потере боковой цепи — 2-хлорфенотиазин.

Метаболизм хлопромазина реакция окисления гетероатома серы

–  –  –

Другие фенотиазины имеют сходные пути биотрансформации, однако препараты с более сложными заместителями образуют и большее количество метаболитов. Например, 2-тиометильная группа в тиоридазине окисляется в сульфоксид (мезоридазин) и сульфон (сульфоридазин), которые также обладают нейролептической активностью.

–  –  –

Галоперидол в организме подвергается биотрансформации примерно на 40%. Галоперидол всасывается в основном в тонком кишечнике, в неионизированной форме, путем пассивной диффузии. Максимальная концентрация в плазме крови достигается через 2-6 ч. Биодоступность препарата составляет 60-70%. Около 90% галоперидола связывается с белками плазмы крови, 10% представляют собой свободную фракцию. Отношение концентрации в эритроцитах к концентрации в плазме крови составляет 1:12.

Концентрация галоперидола в тканях выше, чем в крови; отмечена тенденция препарата к кумуляции в тканях. Метаболизируется в печени. Окислительное дезалкилирование дает 1-(4-фторобензоил)-пропионовую кислоту и ее конъюгат с глицином, а также 4-фторофенилуксусную кислоту, ее конъюгат с глицином и 4-фторофенилацетуровую кислоту, которые являются фармакологически неактивными соединениями. Вероятно, галоперидол может быть конъюгирован с глюкуроновой кислотой и/или сульфат-ионами без предварительных метаболических изменений. При восстановлении галоперидола образуется вторичный спирт, часто называемый восстановленным галоперидолом (RHAL). Это соединение обладает фармакологической активностью (около 25% активности исходного вещества) и может окисляться снова в галоперидол. Галоперидол экскретируется с мочой (40%) и калом (60%). Т1/2 после перорального применения составляет 12—37 ч. Проникает через гематоэнцефалический барьер и плаценту. Другие бутирофеноны имеют сходные пути метаболизма, например бромперидол.

–  –  –

В результате биотрансформации могут образовываться стереоизомерные соединения, например восстановление карбонильной группы пропиомазина и галоперидола приводит к образованию асимметрического атома углерода.

Конфигурация восстановленного галоперидола может оказывать влияние на его фармакологическую активность. Энантиомеры обычно присутствуют в приблизительно равных количествах, выделение и количественное определение одного из них могут привести к недооценке реального количества токсичного вещества.

Пробоподготока и методы определения Для выделения нейролептиков из биологических материалов используют ЖЖЭ, ТФЭ и ферментативный гидролиз.

Жидко-жидкостная экстракция. Многие психотропные препараты легко экстрагируются из плазмы в относительно неполярные растворители щелочной среде. Наиболее часто для этого используются н-гептан, н-гексан и н-пентан, обычно с добавлением небольшого количества изоамилового или изопропилового спирта для уменьшения адсорбционных потерь. Более полярные соединения экстрагируют более полярными растворителями (хлороформ). При количественном определении метаболитов используют диэтиловый эфир, дихлорметан и этилацетат.

Если пробу исследуют газохроматографически, в частности с электронозахватный детектор (ЭЗД), необходимо добавить кислоту в следовых количествах, а после установления необходимого рН провести последующую реэкстракцию в органический растворитель. В тех случаях, когда параметры разделения позволяют, используют экстрагирование в небольшой объем органической фазы, для того чтобы впоследствии не было необходимости в ее упаривании. Пробы, анализируемые методом ГХ с азотно-фосфорным детектором (АФД) или методом ВЭЖХ, как правило, не подкисляют.

Твердофазная экстракция. ТФЭ нейролептиков дает хорошие результаты при последующем определении методами ВЭЖХ и ГХ/МС. ТФЭ хлорпромазина и его 13 метаболитов проводят на колонке С8 (100 мг, 1 мл), которую подготавливают последовательным промыванием избыточным объемом 0,2М фосфорной кислоты, 0,25% натрия карбоната, метанола и воды.

Плазму крови (1 мл) подкисляют Н3Р04 (3М, 0,05 мл) и наносят на колонку, которая затем последовательно промывают водой, метанолом (0,5 мл) и Na2C03 (25%). Определяемые вещества (аналиты) элюируют метанолом. Для ТФЭ нейролептиков используют различные типы патронов.

Ферментативный гидролиз. Гидролиз глюкуроновых и сульфатных конъюгатов с помощью Р-глюкуронидазы/арилсульфатазы предпочтительны, чем кислотный гидролиз, потому что фенольные метаболиты легче окисляются в кислой среде. Для определения хлорпромазина и его метаболитов, а также тиоридазина в тканях, взятых после вскрытия трупа, используют протеолитические ферменты это дает хорошие результаты.

Цветные реакции (предварительные испытания). Многие нейролептики при окислении образуют характерные окрашенные соединения в присутствии серной кислоты. Для экспресс диагностики фенотиазинов в моче используют групповую реакцию с FNP-реактивом (смесь хлорида железа (III), хлорной и азотной кислот) Цветные реакции могут лежать в основе фотометрического метода определения. Коэффициент светопоглощения и цвет окрашенного соединения в 50% растворе серной кислоты представлены в табл. Как правило, электроноакцепторные группы изменяют окрашивание раствора от зеленосинего (650-600 нм) до красного (530 нм) и оранжево-розового (500 нм).

Метиловые эфиры, например 7-метоксихлорпромазин, и фенолы образуют соединения, окраска которых идентична. Фенольные метаболиты менее стабильны по сравнению с исходными соединениями.

–  –  –

Тонкослойная хроматография Обычно ТСХ используется для качественного или промежуточного полуколичественного скрининга, но иногда ее применяют для количественного определения, например хлорпромазина и его 11 метаболитов, трифторпиперазина и др. с использованием денсиметрического сканирования.

Плазму крови (4 мл) с добавленным внутренним стандартом трифлуофеназина экстрагируют гептаном. После реэкстракции устанавливают рН раствора карбонатом натрия и вновь экстрагируют аналит пентаном. Двухмерную хроматографию проводят на пластинах HP для ТСХ размером 10x10 см. Первое проявление в среде толуол–ацетон (60:40) проводят для очистки от мешающих соединений. Флуфеназин (Rf 0,2) и внутренний стандарт (Rf 0,5) разделяют в среде толуол–ацетон–аммиак (60:40:2). После рассмотрения пластинок в УФсвете, определяют содержание веществ по их флюоресценции.

Чувствительность определения флуфеназина составляет 0,1 мкг/л, коэффициент вариации при обнаружении вещества в концентрации 0,5 мкг/л составляет 8%.

Аналогичный способ применяют для определения хлорпромазина и тиоридазина. Пластины HP подвергают воздействию паров азотной кислоты и проводят количественное определение вещества в пятне, измеряя оптическую плотность при 365 нм (хлорпромазин) и 375 нм (тиоридазин). Чувствительность метода составляет 10 мкг/л.

Газовая хроматография Использование ПИД (пламенно-ионизационный детектор). Нейролептики являются липофильными соединениями. При низких дозах поступления (стандартная терапия) концентрации препаратов в плазме крови невысоки.

Поэтому ПИД используют для определения ограниченного числа препаратов в плазме, метаболитов в моче или при значительной передозировке.

ПИД применяют для определения хлорпромазина и некоторых его метаболитов в моче (колонка – 5% SE-30). Деметилированные метаболиты выделяют в форме ацетамидов. Хлорпромазина нитрат и хлорпромазина нитрат-сульфоксид селективно экстрагируют и исследуют в УФ-свете (сульфоксиды восстанавливают до соответствующих сульфидов перед началом определения). Для определении в моче фенольных и нефенольных метаболитов хлорпромазина используют колонки OV-3 и OV-17. Дериватизацию проводят триметилсилилимидазолом.

Использование ЭЗД (электронно-захватный детектор). ЭЭД и усовершенствованные силиконовые стационарные фазы, например OV–17, позволяют проводить мониторинг концентраций нейролептиков в плазме крови даже при их применении в терапевтических целях. Так определяют хлорпромазин и его деметилированные и сульфоксидные метаболиты в плазме крови. Соединения экстрагируют из подщелоченной плазмы в гептан, проводят реэкстракцию в кислой среде и после установления необходимого рН экстрагируют в небольшой объем толуола.

ГЖХ-ЭЗД используют для количественного определения в крови и плазме. Перед определением проводят дериватизацию соединения уксусным ангидридом. В образце объемом 5 мл предел обнаружения составил 0,2 мкг/л.

Для определения галоперидола, его восстановленного метаболита RHAL и трифлуперидола используют ЭЗД с применением капиллярных колонок (DB– 17, 15 м х 0,53 мм) или колонки с 3% OV-17. Внутренний стандарт – флюразепам. При определении в насадочных колонках соединения дериватизируют – ацетилируют трифторуксусным ангидридом.

Чувствительность метода 10 мкг/л.

Использование АФД (азотно-фосфорный детектор). Применение газовой хроматографии с использованием селективного АФД, который отличается от предыдущих детекторов лучшим линейным диапазоном и стабильностью, расширило круг анализируемых нейролептиков. Фторфеназин, 7гидрокифторфеназин и фторфеназина сульфоксид детектируют в моче с использованием АФД. Соединения хроматографируют в форме триметилсилильных эфиров, которые имеют преимущество перед ацетатными эфирами, поскольку ацетилпроизводные фенольных и сульфоксидных соединений не могут быть успешно разделены. Чувствительность детектора – 2 мкг/л.

При определении клозапина в 1 мл плазмы на капиллярной колонке DB-5 чувствительность метода составила 1-2 мкг/л. В качестве внутреннего стандарта использовали ацетилированный мапротилин.

Масс-спектрометрическое определение Использование режима селективного мониторинга ионов позволяет детектировать низкие уровни метаболитов и проводить точное определение в присутствии других веществ. ГХ/МС применяют для определения хлорпромазина, норхлорпромазина и 7-гидроксихлорпромазина в плазме и спинномозговой жидкости. В работе использовали 2Н-меченые материалы в качестве внутренних стандартов. Чувствительность метода 1 мкг/л.

Используя капиллярные колонки, определяют галоперидол (0,2 нг) в образце плазмы объемом 2 мл. Для достижения такого уровня чувствительности проводят дериватизацию трифторуксусной кислотой, а затем масс-спектрометрию в режиме химической ионизации с аммиаком в качестве газа-реагента.

Клозапин и его деметилированный метаболит определяют в плазме крови с использованием капиллярных колонок, заполненных плавленым кварцем, и масс-спектрометрии в режиме селективного мониторинга ионов. Н-пропильный гомолог используют как внутренний стандарт. Чувствительность 1 и 5 мкг/л для основного препарата и метаболита соответственно.

Жидкостная хроматография ВЭЖХ самый распространенный способ определения нейролептиков в настоящее время. Разработано много методик для широкого круга препаратов.

Для хроматографирования чаще всего используют модифицированный кварц и щелочные элюенты. Работа на кварцевых колонках обеспечивает хорошую форму пиков и их полное разделение при правильном выборе мобильной фазы.

Аналиты связываются с липофильными основаниями (примесями), поэтому относительное удерживание может варьировать при изменении рН. Замена ацетонитрила метанолом улучшает форму пика и разрешение метода. Вначале элюируются липофильные примеси, а затем более полярные метаболиты.

Разделение тиоридазина и его метаболитов методом ВЭЖХ показано на рисунке.

Рис. ВЭЖХ разделение тиоридазина и некоторых его метаболитов на кварцевой колонке (по Watkins и др.). 1— тиоридазин-2-сульфон; 2, 2а — тиоридазин-2-сульфон-5-сульфоксид; 3 — мезоридазин; 4, 4а — тио-ридазин-5-сульфоксид;

5 — тиоридазин-2-сульфоксид; 6, 6а — тиоридазин-2,5-дисульфоксид; 7 — деме-тилтиоридазин; 8, 8а — деметилтиоридазин-5-сульфоксид; 9 — дезметилтиоридазин-2-сульфоксид. УФ-детектирование при 254 нм.

Детектирование в методе ВЭЖХ. Фенотиазины имеют максимум поглощения в УФ-области при коэффициенте экстинции около 30 000 М - 1 см-1 в области 245-260 нм, поэтому можно проводить УФ-детектирование. При оптимальном выборе режима хроматографирования нижняя граница определения составляет несколько нанограммов на 1 л. Так, галоперидол имеет

-1 см-1, a RHAL – тах 200 нм с небольшим mах при 245 нм, е = 13000 М поглощением при 250 нм, поэтому определяя оба соединения, надо проводить детектирование при более низких длинах волн или при одной более высокой длине волны в случае определения одного галоперидола.

Фенотиазины при окислении образуют флюоресцирующие соединения, и это особенно часто используется в отношении тиоридазина, который окисляется после прохождения через колонку с КМп04. Избыток перманганата удаляют реакцией с Н202, продукты второй реакции измеряют флюориметрически. Собственная флюоресценция некоторых соединений позволяет проводить количественное определение без дериватизации и химической модификации, что характерно для сульпирида и пимозида.

Радиоиммунный и радиорецепторный анализ Разработаны методики определения радиоиммунным методом соединений фенотиазинов и их метаболитов, среди которых галопиридол, хлорпромазин, фторфеназин, перфеназин, трифторперазин, прохлорперазин, тиоридазин. Предел определения при использовании 1 мл плазмы составляет 20 нг/л. Для определения галоперидола в присутствии метаболитов была получена высокоспецифичная антисыворотка, но при ее использовании наблюдали кроссреакцию с другими бутирофенонами, такими, как бромперидол, моперон, трифлуперидол и спиперидон. В настоящее время из крови морских свинок получена антисыворотка с использованием гаптена, связанного в положении, занимаемом атомом фтора, которая дает кросс-реакцию менее чем с 1% известных метаболитов. Разработан способ иммунного анализа для сульпирида.

Метод радиорецепторного определения нейролептиков был разработан Creese и Snyder. Чувствительность метода (в микрограммах на 1 л) зависела от природы соединения: для фторфеназина — 1,8, трифторперазина — 2,2, галоперидола — 2,5, хлорпромазина — 8,6, тиоридазина — 30.

Концентрация нейролептиков в плазме крови во время терапии и при передозировке Эффективность лечения хлорпромазином может быть достигнута при концентрации препарата в плазме более 30 мкг/л. Токсические эффекты могут быть вызваны хлорпромазином при концентрации более 500 мкг/л, а летальной считается концентрация более 2000 мкг/л.

Многие фенотиазины эффективны при концентрации значительно ниже, чем для хлорпромазина. Так, фторфеназин (деканоиновый эфир) оказывает терапевтическое действие при концентрации его в плазме крови от 0,2 мкг/л. В 2 смертельных случаях концентрация фторфеназина в печени составила 5 и 23 мг/кг соответственно. Определение терапевтической концентрации тиоридазина осложнено высокой концентрацией активных метаболитов: при стабильных условиях концентрация мезоридазина сравнима с концентрацией основного соединения. Для обеспечения терапевтической эффективности предположительно требуется концентрация более 100 мкг/л. В 8 смертельных случаях отравления концентрация тиоридазина в крови погибших варьировала от 300 до 8500 мкг/л; аналогичная концентрация была отмечена для мезоридазина.

После приема терапевтической дозы концентрация тиотиксена в плазме крови 10-22,2 мкг/л. Пример. Максимальная концентрация 520 мкг/л была определена у погибшего пациента, который принял 800 мг препарата. При смертельном отравлении, обусловленном приемом хлопротиксена, концентрация в плазме крови основного препарата и сульфоксидного метаболита была равна 100 и 600 мкг/л соответственно.

ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ

Выберите один правильный ответ

1. ПРЕДВАРИТЕЛЬНАЯ ПРОБА, ПРЕДСТАВЛЕННЫХ ВЕЩЕСТВЕННЫХ

ДОКАЗАТЕЛЬСТВ, С FNP-РЕАКТИВОМ ОКАЗАЛАСЬ ПОЛОЖИТЕЛЬНОЙ

1) делается заключение о присутствии производных фенотиазина

2) проводятся дополнительные исследования с использованием других методов анализа

3) делается заключение о присутствии психотропных средств

4) проводится очистка, и проба с FNP-реактивом повторяется

2. ОСНОВАНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ФЕНОТИАЗИНА ОБЛАДАЮТ

СЛЕДУЮЩИМИ СВОЙСТВАМИ

1) хорошо растворяться в воде и хорошо растворяться в не полярных органических растворителях

2) хорошо растворяться в воде и хорошо растворяться в полярных органических растворителях

3) не растворяться в воде и не растворяться в органических растворителях

4) не растворяться в воде и хорошо растворяться в органических растворителях Укажите название отдела ЖКТ

3. ПРИ ПЕРОРАЛЬНОМ ПРИЕМЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ФЕНОТИАЗИНА

ВСАСЫВАЮТСЯ В ОСНОВНОМ В (____________________).

4. ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ,

ГРУППОВОЙ РЕАКЦИЕЙ НА ПРОИЗВОДНЫЕ ФЕНОТИАЗИНА

ЯВЛЯЕТСЯ РЕАКЦИЯ С

1) с нитритом натрия

2) конц. серной кислотой

3) ацетатом кобальта

4) аммиаком

–  –  –

7. НЕЙРОЛЕПТИКИ В ОСНОВНОМ НАКАПЛИВАЮТСЯ

1) в тканях и органах

2) в плазме крови

8. ОДНОВРЕМЕННЫЙ ПРИЕМ ФЕНОБАРБИТАЛА

1) будет приводит к ослаблению фармакологического действия аминазина

2) будет приводит усилению фармакологического действия аминазина

3) не влияет на фармакологический эффект аминазина

9. ПРОИЗВОДНЫЕ ФЕНОТИАЗИНА ИМЕЮТ ЗНАЧЕНИЕ рКа В

ИНТЕРВАЛЕ 1) 3-5 2) 5-7 3) 7-9 4) 9-11

–  –  –

11. В СЛУЧАЕ НЕНАПРАВЛЕННОГО ХТА (изолирование по методу СТАСАОТТО) ПРОИЗВОДНЫЕ ФЕНОТИАЗИНА ОБНАРУЖИВАЮТСЯ

1) в остатке извлечении органическим растворителем из кислого раствора

2) в остатке извлечении органическим растворителем из щелочного раствора Укажите название

12. ПРИ АНАЛИЗЕ МЕТАБОЛИТОВ ПРОИЗВОДНЫХ ФЕНОТИАЗИНА

ПРОВОДЯТ ГИДРОЛИЗ: КИСЛОТНЫЙ ИЛИ (________________)

13. ПРИ ЗНАЧЕНИИ рН ВОДНОГО РАСТВОРА РАВНОГО ЕДИНИЦЕ

ПРОИЗВОДНЫЕ ФЕНОТИАЗИНА БУДУТ НАХОДИТЬСЯ

1) в ионизированной форме

2) в неионизированной форме

14. ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ И КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ,

ПРОИЗВОДНЫХ ФЕНОТИАЗИНА В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ

МОЖНО ИСПОЛЬЗОВАТЬ СОЧЕТАНИЕ

1) хромогенных реакций и ТСХ

2) иммунохимического и титриметрического методов

3) ТСХ и ВЭЖХ

4) цветных реакций и иммунохимического метода Выберите несколько правильных ответов

15. ПРИ МЕТАБОЛИЗМЕ КЛОЗАПИНА В ОРГАНИЗМЕ ПРОХОДЯТ

РЕАКЦИИ

1) N-окисление

2) О-деметилирование

3) N-деметилирование

4) конъюгация с глицином

16. МЕТАБОЛИЗМ ГАЛОПЕРИДОЛА В ОРГАНИЗМЕ СВЯЗАН С

1) окислением

2) S-деметилированием

3) N-деметилированием

4) конъюгацией с глицином

17. ПРОИЗВОДНЫЕ ФЕНОТИАЗИНА ХАРАКТЕРИЗУЮТСЯ НАЛИЧИЕМ

МАКСИМУМОВ ПОГЛОЩЕНИЯ В УФ-ОБЛАСТИ В ИНТЕРВАЛЕ

1) 200-210 нм 2) 250-260 нм 3) 300-310 нм 4) 400-410 нм

18. ПРОИЗВОДНЫЕ ФЕНОТИАЗИНА ИМЕЮТ ЗАМЕСТИТЕЛИ В

ПОЛОЖЕНИИ 1) 1 2) 2 3) 9 4) 10

19. МЕТАБОЛИЗМ ПРОИЗВОДНЫХ ФЕНОТИАЗИНА ПРОИСХОДИТ

СЛЕДУЮЩИМИ ПУТЯМИ

1) ароматическое гидроксилирование в положение 3 и 6

2) окисление гетероциклического атома серы

3) N-деметилирование

4) О-деметилирование

20. ПРИ АНАЛИЗЕ МОЧИ НА НАЛИЧИЕ ПРОИЗВОДНЫХ ФЕНОТИАЗИНА

МЕТОДОМ ГХ ИСПОЛЬЗУЮТ ПРОЦЕССЫ

1) дериватизации

2) гидролиза

3) восстановления

4) окисления

21.СИМПТОМАМИ ОТРАВЛЕНИЯ АМИНАЗИНОМ ЯВЛЯЮТСЯ

1) повышение артериального давления

2) понижения артериального давления

3) повышение температуры тела

4) понижения температуры тела

22. ПРОИЗВОДНЫЕ ФЕНОТИАЗИНА ВЫВОДЯТСЯ ИЗ ОРГАНИЗМА

1) с выдыхаемым воздухом

2) с мочой

3) с желчью

4) с потом

23. ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ТСХ – скрининга, ПРОИЗВОДНЫЕ ФЕНОТИАЗИНА

МОЖНО ОБНАРУЖИТЬ НА ПЛАСТИНКЕ

1) при обработке реактивом Драгендорфа

2) при облучении УФ-светом

3) при обработке концентрированной серной кислотой

4) при обработке раствором дифенилкарбазона и солями ртути

24. УСТАНОВИТЕ СООТВЕТСТВИЕ МЕЖДУ ТОКСИКАНТОМ И ЕГО

ПРИНАДЛЕЖНОСТЬЮ К СООТВЕТСТВУЮЩЕМУ ПРОИЗВОДНОМУ

токсикант производное

1) галоперидол а) производное бензодиазепина

2) тиоридазин б) производное бутирофенона

3) клозапин в) производное фенотиазина

г) производное индола

–  –  –

РЕКОМЕНДУЕМАЯ ЛИТЕРАТУРА

Основная

1. Бадюгин И.С., Каратай Ш.С., Константинова Т.К. Экстремальная токсикология : руководство для врачей / Под ред. Е.А.Лужникова. - М.:

ГЭОТАР-Медиа, 2006. - 416 с.

2. Токсикологическая химия: учебник / под ред. Е. Н. Вергейчик. - М.:

МЕДпресс-информ, 2009. – 400 с.

3. Токсикологическая химия: учебник / под ред. Т. В. Плетеневой. – 2-е изд., испр.. –М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. – 512 с.

4. Токсикологическая химия. Метаболизм и анализ токсикантов: учебник для вузов / Под ред. Н.И. Калетиной. - М., ГЭОТАР-МЕД, 2008. -1015 с.

Дополнительная

1. Альберт А. Избирательная токсичность / Пер. с англ. - М.: Медицина, Т.1,2., 1989. - 400 с.

2. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия : учебное пособие : / В.Г. Беликов.

– М. : МЕДпресс-информ, 2009. – 616 с.

3. Лужников Е.А., Костомарова Л.Г. Острые отравления: руководство. - М.:

Медицина, 2000. - 434 с.

4. Симонов Е.А., Найденова Л.Ф., Ворнаков С.А. Справочник «Наркотические средства и психотропные вещества, контролируемые на территории РФ» / Под ред. В.В. Рогозина. - Одобрен ПККН М, 2003. - 411 с.

5. Фармацевтическая химия : учебное пособие / под ред. А.П. Арзамасцева.

– М. : ГЕОТАР-МЕДИА, 2008. – 640 с.

–  –  –

Илларионова Елена Анатольевна Сыроватский Игорь Петрович

ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ

ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

ИЗ ГРУППЫ НЕЙРОЛЕПТИКОВ





Похожие работы:

«П.И. Сидоров А.В. Парняков ВВЕДЕНИЕ В КЛИНИЧЕСКУЮ ПСИХОЛОГИЮ ИЗДАНИЕ ВТОРОЕ (ДОПОЛНЕННОЕ) Рекомендовано Министерством здравоохранения Российской Федерации в качестве учебника для студентов медицинских высших учебных заведений 2001 г. Учебник содержит систематич...»

«Министерство здравоохранения и социального развития Российской Федерации Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "ИРКУТСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ" (ГБОУ ВПО "ИГМУ" Минздравсоцразвития России) Лечебный факультет Кафедра акушерства и гинекологии лечебного факульт...»

«ВЕТШЕВА НАТАЛЬЯ НИКОЛАЕВНА ИНТРАОПЕРАЦИОННЫЙ УЛЬТРАЗВУКОВОЙ МОНИТОРИНГ РЕЗЕКЦИЙ НОВООБРАЗОВАНИЙ ГОЛОВНОГО МОЗГА 14.01.13 лучевая диагностика, лучевая терапия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2010 Работа выполнена в Учреждении РАМН Р...»

«Ядренцева Светлана Владимировна Мультиспиральная компьютерная томография в диагностике, стадировании, лечении и прогнозе острого панкреатита и его осложнений 14.01.13 – лучевая диагностика, лучевая терапия Диссертация на соискание учёной степени кандидата медицинских нау...»

«Министерство образования и науки Российской Федерации ФГБОУ ВО "Тверской государственный университет" тверждаю: :оводитель ООП "Клиническая логия" д.психол.н., 2015г. "У 4 сРЛ Рабочая программа дисциплины (модуля)(с аннотацией) ПРОИЗВОДСТВЕННАЯ ПРАКТИКА Специа...»

«Общероссийская общественная организация трансплантологов "Российское трансплантологическое общество"ПОСМЕРТНОЕ ДОНОРСТВО ОРГАНОВ Национальные клинические рекомендации 2013 год "Посмертное донорство органов" Национальные клинические рекомендации Рассмотрены и рекомендованы к утверждению Профильной комиссией...»

«Учебная деятельность кафедры неврологии, мануальной терапии и рефлексотерапии Главной задачей кафедры неврологии, мануальной терапии и рефлексотерапии является последипломное образование врачей, обучение в годичной интернатуре, двухгодичной клинической ординатуре и аспирантуре по специальност...»

«mini-doctor.com Инструкция Преципра таблетки, покрытые пленочной оболочкой, по 20 мг №14 (7х2) ВНИМАНИЕ! Вся информация взята из открытых источников и предоставляется исключительно в ознакомительных целях. Преципра таблетки, покрытые пленочной оболочкой, по 20 мг №14 (7х2) Действующее вещество: Циталопрам Лекарственная форма...»

«mini-doctor.com Инструкция Зелдокс капсулы по 40 мг №14 (14х1) ВНИМАНИЕ! Вся информация взята из открытых источников и предоставляется исключительно в ознакомительных целях. Зелдокс капсулы по 40 мг №14 (...»







 
2017 www.doc.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - различные документы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.