WWW.DOC.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Различные документы
 

Pages:     | 1 | 2 ||

«НАУЧНАЯ ДИСКУССИЯ: ВОПРОСЫ МЕДИЦИНЫ Сборник статей по материалам XLVIII международной научно-практической конференции № 4 (35) Апрель 2016 г. Издается с мая 2012 года Москва УДК 61 ББК 5 Н 34 ...»

-- [ Страница 3 ] --

СЕКЦИЯ 17.

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ХИМИЯ,

ФАРМАКОГНОЗИЯ

ВЛИЯНИЕ ЭКСТРАКТА ГАБЕРЛЕЙ РОДОПСКОЙ

НА ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ МОНОНУКЛЕАРНЫХ

КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА

В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТИ

ВОЗДЕЙСТВИЯ

–  –  –

Аннотация. Проведено изучение влияния тотального экстракта из листьев Габерлeй Родопской на жизнеспособность мононуклеарных клеток периферической крови человека in vitro в зависимости от продолжительности его воздействия. Установлено, что экстракт Габерлеи вызавает время- и дозозависимый ответ клеток в культуре.

Ключевые слова: Габерлея Родопская, жизнеспособность клеток, окраска трипановым синим.

Введение.

С древних времен, человечество использует растения не только для еды, но и для лечения и профилактики заболеваний. Растения являются богатым и неисчерпаемым источником ценных натуральных продуктов для здоровья человека. Применение растительных соединений с фармацевтическом целью вырастает постоянно. Более 150000 видов растений были изучены и в составе некоторых обнаружены терапевтические субстанции. По данным Всемирной организации здравоохранения, лекарственные растения является лучший источником различными лекарственных веществ. Использование растительных экстрактов и фитохимикалиев может иметь важные значение при лечении заболеваний. Но лекарственные растения также могут синтезировать токсичные вещества (для защиты от инфекций, от насекомых и от травоядных), но которые часто влияют и на организмы, которые питаются на этих растениях. Поэтому тщательной анализ цитотоксичного потенциала лекарственные растении необходим для их относительно безопасное применение [7, с. 34].

Габерлея родопская (Haberlea rhodopensis Friv., HR), многолетние растение из рода Gesneriaceae, субсемейства Didymocarpeae. Этот вид реликт доледниковой эпохи, а также и балканский эндемичный вид [1, с. 150]. Распространённый в Болгарии прежде всего в лесах Родопы, в некаторых областях Средной горы и Старoй планины. HR в последние годы усиленно изучается. Из экстрактов HR обнаружены гликозиды муконозид (Muconosid) и паусцифлосид (paucifloside), хиспидулин С-гликозиды, аминокарбоновые кислоты, жирные кислоты, феноловые кислоты, фитостеролы, глицериды и др. [4, с. 21; 6, с. 38; 5, с. 215].

Цель данного исследования – изучить влияние растительного экстракта из листьев Габерлeй Родопской на жизнеспособность мононуклеарных клеток периферической крови человека in vitro в зависимости от продолжительности его воздействия.

Материалы и методы исследования.

Экстракт и реактивы. Тотальный экстракт листей Габерлеи был любезно предоставлен доцентом Б. Попов. Предварительно высушенные и измельченные листья были мацерираны 70 % этиловым спиртом в течение 48 часов с последующей дистилляцией спирта в вакуумном испарителе до соотношении дрогы/жидкой фазы 1:1. Количество экстрагированных веществ составляли 100 мг/мл [3, с. 74–75].

Histopaque®-1077, питательная среда RPMI-1640, термоинактивированная фетальная телячья сыворотка (ФТС), смеси антибиотиков и антимикотиков и краситель Трипановый синий были приобретены у компании Sigma Aldrich.

Выделение и культивирование клеток. Мононуклеарные клетки (моноциты и лифоциты) выделили из крови 6 здоровых людей обоего пола в возрасте от 22 до 35 лет. Мононуклеарные клетки выделяли методом центрифугирование в градиенте плотности препарата Histopaque®-1077. Затем МНК культивировали в культуральных флаконах в среде RPMI-1640 с добавлением L-глутамина, 10 %-й эмбриональной телячьей сыворотки, 1 % по объему смеси антибиотиков и антимикотиков и растительного экстракта Габерлеи.

Для изучения действия использовали 5 концентраций экстракта – 65 мкл/мл, 26 мг/мл, 13 мг/мл, 1,3 мг/мл, 0,13 мг/мл, и контролой без экстракта. Клетки инкубировали при 37 С в атмосфере с 5 % СО2 в течение 12 ч, 36 ч и 60 ч. Затем подсчитывали количество жизнеспособных клеток в контрольных (без внесения препарата) и в опытных пробах, используя тест исключения красителя с применением трипанового синего.

Тест на выживаемость при окраске трипановым синим. Тест проводили по методикам, описанным в книге «Лимфоциты.

Методы» [2, с. 50]. В лунку панели для микротитрования вносили по 10 мкл клеточной суспензии и 10 мкл 0,4 % раствора трипаного синего. Ресуспендировали клетки пипетированием и вводили каплю клеточной взвеси в гемоцитометрическую камеру. Затем подсчитывали не менее 100 клеток, отмечая голубые (погибшие) и неокрашенные (живые). Жизнеспособность (%) клеток рассчитывали по формуле: (количество живых клеток /общее количество клеток) х100.

Статистический анализ. Результаты были представлены в виде среднего значения.Для оценки статистической достоверности различий между соответственными средними значениями использовали непараметрическый дисперсионный анализ Крускала-Уоллиса.

За достоверные принимали различия средних величин при р0,05.

Обработка данных проводилась с использованием пакета программ STATISTICA 6.0 (StatSofInk., США).

Результаты и их обсуждение Результаты изучения влияния экстракта представлены на рисунке 1:

Рисунок 1. Влияние экстракта Габерлеи Родопской при разной продолжительности воздействия Результаты показывает, что экстракт Габерлеи вызавает время – и дозозависимый ответ клеток в культуре.

Во всех трёх случаях разной длительности экспозиции (12 ч 30 и 60 ч) с увеличением концентрации экстракта понижается жизнеспособности (р0,05). В интервале от 0,13 до 1,3 мкл/мл концентрации этот эффект более сильно выражен при более продолжительным воздействием. Различия между средними значениями изучаемых величин разной длительности инкубации при концентрацей 0 мкл/мл, 0,13 мкл/мл и 1,3 мкл/кл являются достоверными (p0,05). При концентрации 13 мкл/мл, 26мкл/мл и 65 мкл/мл определённая жизнеспособность ниже 40 %.

Её вычисленные стойности при разных длительности воздействия очень близкие и не имеют статистически достоверной разницы (р 0,05).

Заключение.

Полученные результаты исследования углубляют и расширяют представление о влияния экстракта Габерлеи Родопской.

Они дополняют аналитическую базу для специалистов, изучающих биологически активные вещества растительного происхождения в отношении их влияния на жизнеспособности клеток в условиях in vitro.

Список литературы:

Георгиева С.Й. Лучезащитный и антигенотоксичный потенциал 1.

растительных экстрактов и природных продуктов. – Изд-во КОТА, 2013 – С. 150–166.

Клаус Дж. Лимфоциты. Методы. – М.: Мир, 1990. – С. 50.

2.

Попов Б.Н. Антимутагенный потенциал тоталного экстракта Haberlea 3.

Rhodopensis: Дис... канд. биол..наук. – Ст. З. – 2011. – С. 74–75.

Радев Р. Фармакологические эффекты фенилэтаноидных гликозидов // 4.

JCM – 2010. Vol. 2. № 1 – С. 20–23.

5. Berkov S., Nikolova M., Hristozova N. Momekov G., Ionkova I., Djilianov.

DGC–MS profiling of bioactive extracts from Haberlea rhodopensis: an endemic resurrection plant// J. Serb. Chem. Soc. – 2011. Vol. 76 № 2. – P. 211–220.

Ebrahimi С.Н., Gafner F., Dell'Acqua G.,. Schweikert K., Hamburger M..

6.

(2011). Flavone 8-C-Glycosides from Haberlea rhodopensisFriv.

(Gesneriaceae)// Helvetica Chimica Acta – 2011. Vol. 94. № 1. – P. 38–45.

7. Varalakshmi K.N., Sangeetha C.G., Samee U.S., Irum G. Lakshmi H., Prachi S.P. In Vitro Safety Assessment of the Effect of Five. Medicinal Plants on Human Peripheral Lymphocytes // Tropical Journal of Pharmaceutical Research-2011. Vol 10. № 1. – Р. 33–40.

НАУЧНАЯ ДИСКУССИЯ:

ВОПРОСЫ МЕДИЦИНЫ

Сборник статей по материалам XLVIII международной научно-практической конференции

–  –  –

Подписано в печать 17.04.16. Формат бумаги 60х84/16.

Бумага офсет №1. Гарнитура Times. Печать цифровая.

Усл. печ. л. 10,375. Тираж 550 экз.

–  –  –

Отпечатано в полном соответствии с качеством предоставленного оригинал-макета в типографии «Allprint»

Pages:     | 1 | 2 ||
Похожие работы:

«Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Оренбургский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации ФГБОУ ВО ОрГМУ Минздрава России СТАДНИКОВ А.А., ШЕВЛЮК Н.Н. УЧЕБНОЕ ПОСОБИЕ ОС...»

«mini-doctor.com Инструкция Софрадекс, капли глазные/ушные по 5 мл во флаконе ВНИМАНИЕ! Вся информация взята из открытых источников и предоставляется исключительно в ознакомительных целях. Софрадекс, капли глазные/ушные по 5 мл во флаконе...»

«Научно – производственный журнал "Зернобобовые и крупяные культуры", №3(11)2014 г. УДК 635.656:632 ОПАСНЫЕ БОЛЕЗНИ ГОРОХА И ОСОБЕННОСТИ ТЕХНОЛОГИИ ВОЗДЕЛЫВАНИЯ КУЛЬТУРЫ В УСЛОВИЯХ ЦЕНТРАЛЬНОГО И ЮЖНОГО ФЕДЕРАЛЬНЫХ ОКРУГОВ В.И. ЗОТИКОВ, доктор сельскохозяйст...»

«САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Кафедра медицинской психологии и психофизиологии Зав. кафедрой Председатель ГАК, медицинской психологии и психофизиологии доктор медицинских наук, ведущий _ Щелкова О.Ю. науч...»

«1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛЕВУЗОВСКОГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ ПО ОТРАСЛИ Медицинские науки 1.1. Ученая степень, присуждаемая при условии освоения основной образовательной программы подготовки ас...»

«УДК:616-056.3-022.854 © Н.В. Минаева1, Л.В. Новоселова2, К.В. Плахина1, Е.Н. Новожилова2, М.В. Ременникова2 ГБОУ ВПО "Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера" Минздрава России 2Ф...»

«НАУЧНЫЕ ВЕДОМОСТИ Серия Гуманитарные науки. 2016. № 21 (242). Выпуск 31 153 ПСИХОЛОГИЯ УДК 159.944.4:356.131 УСТАНОВОЧНАЯ РЕГУЛЯЦИЯ СОСТОЯНИЯ ПСИХИЧЕСКОГО ВЫГОРАНИЯ ПОЖАРНЫХ ГОСУДАРСТВЕННОЙ ПРОТ...»

«МОСКОВСКИЙ ПСИХОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 1999, №1 ВИНА И ЧУВСТВО ВИНЫ* МАРТИН БУБЕР I На Лондонской Международной конференции по медицинской психотерапии1 темой первого пленарного заседания был выбран "Генезис вины". Первый докладчи...»

«1 МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ ХАРЬКОВСКАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ ПОСЛЕДИПЛОМНОГО ОБРАЗОВАНИЯ Оказание медицинской помощи при политравме на догоспитальном этапе. (методические рекомендации) Харьков 2007г.Составит...»









 
2017 www.doc.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - различные документы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.