WWW.DOC.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Различные документы
 

Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 7 |

«Нижегородский государственный университет им. Н.И.Лобачевского Национальный исследовательский университет Всероссийская общественная организация ...»

-- [ Страница 2 ] --

Виды с КБП100 были отнесены к интенсивным концентраторам элементов, с КБП1 – деконцентраторам. Интенсивными концентраторами Cu являются черника, брусника, костяника, земляника; деконцентраторами – вейник наземный, хвощ лесной, копытень европейский. Концентраторы Zn – земляника лесная, брусника, вейник лесной; деконцентраторы Zn не обнаружены. Концентраторы Pb – зверобой продырявленный, вьюнок полевой, земляника лесная; деконцентраторы – цикорий обыкновенный, трехреберник непахучий, синяк обыкновенный и др. Концентраторы Cd – тысячелистник обыкновенный, ландыш майский, зверобой продырявленный; деконцентраторы – бедренец камнеломка, лопух паутинистый, марь белая. Интенсивных концентраторов Fe среди исследованных растений не обнаружено – 85% проб растений относятся к деконцентраторам. Обнаружено превышение ПДК нормируемых элементов в некоторых дикорастущих растениях локального участка в Зеленодольском районе РТ: Pb в 2.0-5.5, Cd в 1.3-4.4 раза.

СТРУКТУРА ЦЕНОПОПУЛЯЦИЙ ЛОМКОКОЛОСНИКА ДЕРНИСТОГО

(PSATHYROSTACHYS CAESPITOSA(SUKACZEV) PESCHKOVA) В ЦЕНТРАЛЬНОЙ ЯКУТИИ

–  –  –

Якутский государственный университет им. М.К. Аммосова, Якутск, semveronika@mail.ru Комплексный подход изучения вида на организменном и популяционном уровнях может стать основой объективной оценки его состояния в природе и организации мониторинговых исследований. Изучали структуру ценопопуляций (ЦП) ломкоколосника дернистого (Psathyrostachys caespitosa (Sukaczev) Pesckova) – степного (полупустынныго) многолетнего плотнодерновинного злака. Изучили 17 ценопопуляций на степных склонах берегов

БИОРАЗНООБРАЗИЕ И ЭКОЛОГИЯ



рек Лена и Амга в Центральной Якутии. Эти ЦП отличаются по местообитанию, по степени крутизны, экспозиции и строению склонов (пологие, крутые, ступенчатые) и по уровню антропогенного пресса.

Проведена пятибалльная диагностика ЦП по совокупности организменных и популяционных параметров, при котором выделены оптимумы и пессимумы организмов. Анализ оценок ЦП показывает, что в большинстве случаев оптимум организма не совпадает с оптимумом популяции: организменные признаки особей сильнее, лучше развиты, чем популяционные.

Анализ соотношения онтогенетических групп дает представление об общем жизненном состоянии ЦП, ее способности к самовоспроизведению и перспективах развития. ЦП Psathyrostachys caespitosa нормальные, но неполночленные с правосторонним онтогенетическим спектром. В онтогенетическом спектре преобладают генеративные особи, в основном это среднегенеративные и старые генеративные особи. Доля молодых растений во всех изученных ЦП очень мала (0,47-26,83%) и слагают их только виргинильные особи. Особи младших возрастных состояний отсутствуют. Субсенильные и сенильные особи присутствуют во всех ЦП. В онтогенезе ломкоколосника можно выделить состояние временно нецветущих особей. Их доля варьирует от 0,93% до 51%.

Значения индексов восстановления и замещения имеют малые значения (соответственно 0,01-0,38 и 0,01-0,27), что указывает на затруднения процессов самоподдержания.

Одной из главных характеристик популяции является ее виталитет, которая определяется по морфологическим признакам особи. Не все параметры одинаково информативны, поэтому виталитетное состояние оценено по ключевым, биологически значимым, признакам: организменные – по 10 из 35 параметров, популяционные – по 7 из 11. В 2008 г.





выявлены все три типа ЦП – процветающие, равновесные и депрессивные. Преобладающее большинство ЦП -70,6% - находились в процветающем состоянии. Равновесные (ЦП 9 и ЦП 14) и депрессивные ЦП составили соответственно 11,7% и 17,7%. В 2009 г. картина изменилась. В целом также преобладали процветающие ЦП - 63,1%, остальные ЦП – 36,9% по морфометрическим показателям характеризуются как депрессивные. Отсутствовали равновесные ЦП, так как равновесная ЦП 9 перешла в статус депрессивной, а ЦП 14 стала процветающей. Виталитетная структура наиболее отзывчива на изменение эколого-ценотической обстановки.

Psathyrostachys caespitosa выработал комбинированную онтогенетическую стратегию – стрессово-защитную.

При ухудшении жизненных условий в начале проявляется стрессовая компонента, т.е. уменьшение показателя морфологической целостности растения. Дальнейшее усиление стресса приводит к дезинтеграции морфологической структуры, т.е. наблюдается стрессовая компонента. Такая смешанная стратегия выживания позволяет данному виду существовать длительное время при различных стрессирующих экологических и антропогенных воздействиях.

К БИОЛОГИИ БОКОПЛАВОВ CRANGONYX CHLEBNIKOVI BORUTZKY, 1928 (CRANGONYCTIDAE)

ИЗ ПОДЗЕМНЫХ ВОД ПРИУРАЛЬЯ

–  –  –

Крангониксы Хлебникова – небольшие бокоплавы, обитающие в подземных водах юго-востока Пермского края, известного как область распространения классического карбонатно-гипсового карста. Длина половозрелых форм достигает 20-27 мм, а их вес изменяется в пределах 25.6-107.0 м. Эти рачки совершенно слепы, а их покровы, лишенные кутикулярных пигментов, стекловидно-прозрачны.

В основу настоящей работы положены материалы, собранные в озерах Большой Мечкинской, Бабиногорской и Кунгурской ледяной пещер с августа 2002 по март 2010 г. Объем материала составляет 402 улова мини-вершами при общей продолжительности их экспозиции 1308 ловушко-суток, поймано и изучено 1513 экземпляров крангониксов. Продолжительность жизни рачков, их смертность в отдельные периоды онтогенеза и скорость весового роста изучались методом анализа частотно-размерной структуры популяций. Сроки размножения и характеристики плодовитости определялись путем регистрации и подсчета яиц в выводковых сумках самок. Вес яиц устанавливался геометрическим способом.

Анализ материала позволил установить, что для крангониксов характерна высокая смертность в стадии яйца и в первый год жизни; в это время погибает 83.2-86.9% исходной численности когорты. С возрастом смертность рачков снижается, достигая минимальных значений на третьем-пятом годах жизни (15.8-42.9% в год). На шестом году жизни смертность крангониксов вновь увеличивается, приближаясь к 100% в возрасте 6.5 лет. Максимальная продолжительность жизни рачков превышает 8 лет, однако этого возраста достигают лишь единичные особи.

Продолжительность жизни крангониксов значительно больше, чем у бокоплавов из поверхностных вод, живущих 1-2 года. Конфигурация кривой выживания крангониксов достаточно типична для беспозвоночных и низших позвоночных с малой жизнеспособностью молодняка и высокой адаптированностью взрослых форм.

Крангониксам, в отличие от большинства других троглобионтных животных, присущ периодический тип размножения. Первые кладки яиц крангониксов Бабиногорской пещеры приходятся на начало февраля, Большой

БИОРАЗНООБРАЗИЕ И ЭКОЛОГИЯ

Мечкинской и Кунгурской ледяной – на конец мая. Инкубация икринок в выводковых сумках самок продолжается около месяца. По истечении этого срока из яиц выклевываются молодые рачки, которые уже через 1.0-1.5 месяца ведут самостоятельный образ жизни.

В размножении участвуют крангониксы на третьем-пятом годах жизни. Их вес в это время составляет 23-71 м.

Абсолютная плодовитость рачков варьирует в пределах 8…20 яиц на одну самку. Вес свежих кладок изменяется в пределах 2.4-6.0 мг, что составляет 5.9-11.4% индивидуального веса самок крангониксов. Абсолютная плодовитость рачков с возрастом закономерно возрастает, а удельная – уменьшается, что вообще характерно для пойкилотермных животных.

Средняя удельная скорость весового роста крангониксов Хлебникова изменялась от 0.00118-0.00149 сут –1 в Кунгурской ледяной пещере, до 0.00142-0.00159 сут –1 в Бабиногорской пещере, что значительно ниже, чем известно для бокоплавов из поверхностных водоемов (0.0044-0.0480 сут –1). По-видимому, это связано с низкой температурой воды в подземных озерах, тормозящей протекание обменных процессов, а также с дефицитом пищи и ее низким качеством.

СООБЩЕСТВО ЗООПЕРИФИТОНА ТАЛЛОМА LAMINARIA SACCHARINA (LINNAEUS)

J.V.LAMOUROUX КАК СЛОЖНАЯ КОНСОРЦИЯ

–  –  –

Консорция – это совокупность видов (консортов), связанных различными биотическими отношениями и зависящих от ядра сообщества или эдификатора.

Для беломорской ламинарии L. saccharina изучена консорция из фитофильного фитоперифитона, для которой указано 44 вида-консорта, в т.ч. на ризоидах - 17, на стебельчатой части - 36, на пластинчатой части – 26. Доминируют факультативные голоэпифиты, а среди них - красные водоросли (Михайлова, 2007, 2008). Нами в июне-июле 2009 г. был изучен фитофильный зооперифитон таллома L. saccharina в сублиторальной зоне Керетского архипелага Белого моря: у о-вов Матренин и Виченная Луда, в проливе Оборина Салма и в губе Лебяжьей. Сбор спорофитов ламинарии длиной 0.5-2.4 м производился специальной волокушей, исследовано 22 слоевища. Температура и соленость воды у дна определялась с помощью батометра Молчанова ГР-18 и ручного рефрактометра. Полосы поселений располагались на каменистом, скалистом и ракушечном грунтах в сублиторальной зоне на глубине 7-10 м с солёностью 32,5‰ у острова Матрёнин, 3 м у острова Виченная Луда с солёностью 24‰, 7 м с солёностью 29‰ у Обориной Салмы и в губе Лебяжьей на глубине 5 м с солёностью 15,8‰. Обнаружен 51 вид-консорт из 10 типов и 15 классов беспозвоночных животных.

На пластинчатой части встречен 31 вид, на стебельчатой – 3 и на ризоидах – 32 вида. Самые многочисленные таксоны: Polychaeta (10 видов), Gastropoda (9 видов) и Bryozoa (8 видов). Сравнительный анализ эпибионтов в разных частях таллома позволил выделить зоны первичного поселения, климакса и деградации. Первичное поселение представлено активными фильтраторами и сестонофагами. Видовое разнообразие и плотность организмов в зоне первичного поселения не высоки. Самыми распространенными поселенцами здесь являются Spirorbis spirorbis (18 - 110 экз/дм2) и различные виды Cyclostomata (4 - 100 экз/дм2). В зоне климакса сообщество приобретает более сложную структуру. Эта зона является самой богатой по видовому разнообразию и занимает до 50% площади взрослого таллома ламинарии. Зона климакса постепенно переходит в зону деградации сообщества на рыхлом разрушающемся талломе. Она представлена домиками отмерших полихет S. spirorbis и мшанок Tubulipora uniformis, Crisiella producta и других, а также видами-утилизаторами Ophiura robusta, Ophiopholis acculeata, голожаберным моллюском Cadlina laevis. Зоны сообщества представляют собой непрерывную сукцессию консорции. Сукцессия сообщества проходит в направлении роста таллома, а зарождение консорции - навстречу росту таллома. Составлена ценотическая карта консорции. В 6% случаев отношения между видами-консортами и эдификатором являются трофическими, в 18% являются временным квартирантством и в 72% случаев - постоянным квартирантством. Выделены отношения случайных видов, они характерны для 4% видов. Отношения между видами-консортами более разнообразны - это конкуренция (68%), трофические отношения (20%), квартиранство (9%) и симбиотические отношения (3%). По коэффициентам Жаккара (Кж) и Серенсена (Кс) (Константинов,

1986) наиболее схожими по видовому составу консорции участками таллома являются пластинчатая часть и ризоиды: Кж - 0.22, Кс - 0.36. Наибольшее различие установлено для стебельчатой части и ризоидов: Кж - 0.09, Кс Виды зооперифитона таллома ламинарии вступают в многообразные биотические связи, как с ламинарией, так и друг с другом, и в целом данное сообщество может рассматриваться как сложная консорция.

–  –  –

На территории региона обитают представители североевропейского (L.t.tetrix L.) и степного (L.t.viridanus Lorenz) подвидов. Обе формы – характерные элементы лесостепной фауны. При этом область их обитания в связи с превращением лесной зоны в лесополье значительно расширилась. В результате указанного процесса в 1957 тетерев уже достиг Кольского залива. До второй половины Х1Х в. особенно много птиц отмечали в Оставшковском, Ржевском, Новоторжском уездах Тверской губернии. Однако после 50-х годов наблюдается повсеместное сокращение его численности. В Ленинградской области число птиц уменьшилось в 4-5 раз. Местами исчез тетерев в Латвии, Московской, Смоленской, Новгородской, Ярославской и Калининской областях. Тогда, изменение числа пернатых связывали главным образом с прямым и косвенным воздействием человека: использование гербицида 2,4-Д, выпас скота в местах гнездования, неумеренная охота, браконьерство. Из естественных причин выделяли чрезмерную численность хищников, например лисицы. Кроме того, массовая гибель тетерева в Калининской области в 1929г была вызвана суровой зимой, когда температура опускалась до – 45С. К 1981г численность птиц по области составляла от 8 до 550 особей на 1000га. При этом, по данным областного общества охотников, в среднем по области в 1975-1981 г она снизилась с 13 до 8 особей. В настоящее время по оценки численности в Тверской области вид относится к «обычным» и является объектом спортивной охоты.

Кроме динамики изменения общей численности тетерева в Тверской области можно проследить динамику изменения численности птиц на токах. Так, в Х1Х веке в бывшем Корчевском уезде тока состояли из 5-20 самцов, Новоторжском – из 8-10, Бежецком – из 1-4. Крупные тока из 50 птиц встречались в западных районах области.

В Завидовском заповеднике с 1933 г. по 1966 г. число токов колебалось в пределах 35-102, общее число косачей 204-1066, число косачей на одном току 5-80, в среднем 9,6. Там же на долю одиночно токующих тетеревов приходилось 20-70%. Вследствие зарастания древесно-кустарниковой растительностью с 1954 по 1964 г. в заповеднике исчезло 88 токов. В период 1966-1970г. в Завидовском заповеднике - число токов колебалось в пределах 28общее число самцов 229-542, число косачей на одном току 1-27, в среднем 5,8. На долю одиночно токующих тетеревов приходилось 80%. По результатам наблюдения периода 1966-1970г. отрицательное влияние на состояние тетеревиных птиц оказывает присутствие в угодьях оленей и кабанов. В период 1997-2002 гг количество тетеревиных токов на территории теперь уже национального парка «Завидово» составляло 84.

–  –  –

Пауки семейства Araneidae относятся к группе пауков-кругопрядов, изготавливающих колесовидную ловчую сеть. Пауки–кругопряды – одно из крупнейших семейств пауков (после семейств Salticidae и Linyphiidae): в нем насчитывается 2992 видов из 168 родов. Из них на территории бывшего СССР встречается более 120 видов из 18 родов. На Урале отмечен 41 вид из 14 родов, из них в Пермском крае 26 видов из 12 родов. Максимум видового разнообразия отмечен в зоне широколиственных лесов.

Некоторые кругопряды обладают крупными размерами и запоминающейся окраской, их идентификация практически лишена затруднений, однако многие мелкие виды отличаются друг от друга деталями строения копулятивных органов, что часто приводит к неправильному определению этих видов. К таким видам относятся, например, виды родов Aculepeira и Araniella.

Цель нашего исследования - провести ревизию уральских видов рода Aculepeira и Araniella.

Материалом для исследований послужили коллекционные фонды кафедры зоологии беспозвоночных Пермского Государственного Университета, а так же материал, полученный автором в ходе полевых исследований.

Нами для фауны Урала обнаружено 5 видов рода Aculepeira и 3 вида рода Araniella. Мы считаем, что следует восстановить вид Aculepeira vegae из синонимов вида Aculepeira carbonarioides. Один вид из рода Aculepeira на наш взгляд является новым для науки (в нижеприведенном списке указан как Aculepeira sp). Был составлен определительный ключ видов.

Также на смежных с Уралом территориях были обнаружен вид Aculepeira lapponica. Вполне возможно обнаружение данного вида в фауне региона.

Список уральских видов из родов Aculepeira и Araniella:

–  –  –

В большинстве регионов мира подсолнечник (Helianthus annuus) выращивают как гибридную культуру с получением семян на основе цитоплазматической мужской стерильности (ЦМС) типа РЕТ1. Структурные изменения, связанные с абортивным развитием микроспор у линий с ЦМС РЕТ1 по хорошо изучены. В частности, описаны нарушения структуры мембранных органелл микроспороцитов, разрастание клеток тапетума и дегенерация микроспор. В коллекции ВНИИР им. Н.И. Вавилова имеется уникальная линия ВИР 109, представленная тремя аналогами: фертильным, ЦМС известного типа РЕТ1 и нового - RIG0 (на основе цитоплазмы однолетнего дикорастущего вида H. rigidus), перспективного для использования в гибридной селекции. Такая модель удобна для сравнительного анализа процессов микроспорогенеза ЦМС и фертильных форм. В связи с этим, целью работы явилось исследование с помощью световой и электронной микроскопии особенностей микроспорогенеза у ЦМС RIG0 растений подсолнечника. Фертильный и ЦМС РЕТ1 аналоги были взяты в качестве контроля. Материалом исследования служили пыльники фертильных и аналогичных стерильных растений линии ВИР 109 на двух стадиях развития: начальной (стадия спорогенных клеток и микроспороцитов) и более поздней (стадия формирования пыльцевых зерен у фертильной линии и полного абортирования пыльцы у стерильных). На ранних этапах гаметогенеза стерильные пыльники развиваются аналогично фертильным. Они состоят из четырех микроспорангиев (гнезд), четырехслойные стенки которых представлены эпидермисом, эндотецием, промежуточным слоем и тапетумом. Внутри гнезда пыльника локализованы многочисленные спорогенные клетки. Микроспоры (пыльцевые зерна) фертильного аналога формируются в результате двух мейотических делений спороцита. По мере роста микроспор стенки клеток тапеутма лизируются, тапетальный плазмодий проникает между клетками спорогенного комплекса. Вещество тапетального плазмодия расходуется на питание пыльцевых зерен и формирование экзины, и к концу развития в гнездах зрелых пыльников находятся лишь трехъядерные пыльцевые зерна с характерными удлиненными спермиями и шипиками на поверхности экзины. У растений с ЦМС типа RIG0 четко проявляется спорофитный характер действия ЦМС факторов, выражающийся, прежде всего, в абортивном развитии тапетальной ткани, ее гипертрофии уже на стадии спорогенных клеток, что приводит к постепенной дегенерации последних. Кроме того, наблюдаются изменения в структуре органелл клеток тапетума (расширении каналов ЭПР, вакуолизация цитоплазмы, появление амебоидных ядер) и микроспороцитов (нарушение структуры митохондрий и пластид) стерильной формы по сравнению с фертильной. В целом процессы, выявленные нами при абортивном микроспорогенезе у растений с новым типом ЦМС RIG0, сходны с таковыми, описанным для ранее изученной ЦМС типа РЕТ1. Однако имеются и отличия. Так, например, на ранней стадии развития пыльника (стадия микроспороцитов) в клетках тапетума не происходит чрезмерного отложения спорополленина; форма тапетальных пластид округлая, а не овальная; оболочка гипертрофированных ядер тапетума на данной стадии не фрагментирована; ядерная оболочка микроспороцитов не образует впячиваний и выростов.

Исследование выполнено при финансовой поддержке Министерства науки и образования РФ (грант «Развитие научного потенциала высшей школы (2009-2010)» № 2.1.1/4947).

–  –  –

В связи с восстановлением рыбхоза и организацией рыбохозяйственных работ в Сладковском районе на оснований хоздоговорной темы в 2009 были проведены исследования на озерах Бузан, Глубокое, Большое с площадью акватории соответственно 270 га,173 га и 302 га со средними глубинами 2 м. Озера располагаются в лесостепной зоне с недостаточной обеспеченностью осадками (305 мм в год). Исследования на озерах ранее не проводились.

Сумма основных ионов в оз. Бузан составляет 2,3 г/дм3, оз. Глубокое-3,3 г/дм3, оз. Большое-1,2 г/дм3. В рыбохозяйственных исследованиях важными являются морфофункциональные параметры. В качестве морфологических показателей были использованы длина и масса. Сбор проб проводился сетями в летний и осенний период. Отловленный материал представлен самками в возрасте от 2 до 5 лет. В результате обработки материала в оз. Бузан и Большое отмечено уменьшение средней длины тела соответственно от 205 до 170 мм и от 191 до 181 мм от лета к осени. В оз. Глубокое изменение этого показателя не значительно (185 мм-183 мм). В оз. Глубокое и Большое наблюдается линейная зависимость увеличения средней массы рыб к осени соответственно от 123 г до 188 г и от 153 г до 181 г. Снижение длинны и массы тела у карасей в оз. Бузан связано с высокой промысловой нагрузкой. В оз. Глубокое популяция карася тугорослая, т.к. изменение длины не значительно, а масса увеличилась. В качестве функциональных показателей исследовано питание и рассчитан индекс наполнения кишечника (ИНК), характеризующий интенсивность питания. Во всех озерах в состав пищевого комка входили растительные, животные организмы и детрит. В летний сезон из растительных компонентов по частоте встречаемости (ЧВ) преобладали водоросли (100%), из планктона - Daphnia magna (100%), D. longispina (71%) и ее эфиппии (67%), из бентоса - хиронамиды (100%). По ДМ (доля по массе) в оз. Бузан преобладает планктон (67%), в озерах Глубокое и Большое - бентос (36%). Доля детрита не высока 2,5% в оз. Большом, 17% в оз. Глубокое, в оз. Бузан детрит не отмечен. В осенний период по ЧВ из растительных организмов преобладают водоросли (100%), из планктонных-D. longispina (70%) и ее эфиппии (100%), из бентосных-хиронамиды (100%). По ДМ в оз. Бузан бентос составил 53%, в озерах Глубокое и Большое основную роль играл бентос (23-17% соответственно), детрит (35%). В пищевом комке рыб из озер Глубокое и Большое значительно увеличилась доля детрита, что не отмечено в оз. Бузан. Выявлено, что в озерах Большое и Глубокое у серебряного карася увеличивается интенсивность питания в осенний период (с 23о/ооо летом до 66о/ооо осенью). В озере Бузан наоборот наблюдалось снижение интенсивности питания с 35о/ооо до 9о/ооо. Важным показателем состояния рыб является пластический обмен, в частности общее содержание белка (СБ). Биохим. анализ показал, что СБ в мышцах серебряного карася во всех озерах составило в летом 12-14%, осенью 10-19%. По литературным данным (А.А.Иванов,2003) в пресных озерах Евр. России нормальное СБ в мышцах карася 20-28%. Заниженное СБ в исследованных озерах возможно связано с особенностями р-на. Выявлена зависимость СБ в мышцах от to, концентрации О2, ИНК. При снижений to к осени, СБ в мышцах рыб увеличивалось в озерах Большое и Глубокое, за исключением оз. Бузан (СБ уменьшалось). При уменьшении концентрации О2 в воде СБ в мышцах рыб уменьшалось в озерах Большое и Глубокое, за исключением оз. Бузан (уменьшение СБ с увеличением концентрации О2). Во всех озерах выявлено уменьшение СБ в мышцах карася серебряного с уменьшением ИНК.

–  –  –

Мордовский государственный университет им. Н. П. Огарева, Саранск, hapugin88@yandex.ru К настоящему времени во флоре Республики Мордовия выявлено 119 видов семейства Rosaceae Adans., относящихся к 27 родам. Группа древесных растений семейства Rosaceae во флоре Республике Мордовия насчитывает 59 видов, относящихся к 19 родам. На 3 лидирующих по количеству видов рода (Rosa L., Crataegus L., Malus Mill.) приходится 30 видов семейства Rosaceae. Кроме того, представители данной группы растений выращиваются в ботаническом саду МГУ им. Н. П. Огарева. Их видовой состав насчитывает 83 вида, которые относятся к 27 родам, из которых 54 вида не способны натурализоваться и встречаются лишь в культуре; однако, некоторые виды ботанического сада хорошо чувствуют себя и в перспективе могут включиться в естественные сообщества.

По системе жизненных форм К. Раункиера в составе группы древесных растений семейства Rosaceae выделяютБИОРАЗНООБРАЗИЕ И ЭКОЛОГИЯ ся 3 подтипа фанерофитов (нано-, микро- и мезофанерофиты) и типа хамефитов. Хамефиты представлены только 1 видом. Среди фанерофитов максимальное количество видов насчитывает группа нанофанерофитов (46 видов), минимальное – мезофанерофитов (5 видов). Экологический анализ выявил преобладание во флоре Мордовии видов групп ксеромезофитов (26 видов) и мезофитов (20 видов). Остальные экологические группы насчитывают от 1 до 6 видов.

Группа адвентивных видов насчитывает около половины всех древесных растений данного семейства – 29 видов, что говорит о широком использовании растений данной группы растений человеком. Среди них преобладают ненатурализующиеся виды (колонофиты и эфемерофиты), вместе составляющие 24 вида. Стабильный компонент адвентивной фракции составляют эпекофиты (4 вида) и агриофиты (1 вид). По способу заноса наблюдается примерно равное число видов групп ксено-эргазиофитов (14) и эргазиофитов (13). Два вида составляют группу ксенофитов.

В составе группы древесных растений семейства Rosaceae имеются два критических таксона – роды Rosa и Crataegus. Они лидируют по количеству видов в изучаемой группе растений. Род Rosa насчитывает во флоре Мордовии 18 видов, многие из которых способны скрещиваться друг с другом, образуя гибриды с комплексом переходных признаков от одного вида к другому. Примером могут служить виды секции Cinnamomeae DC., отличающиеся друг от друга в основном лишь по опушению листочков, в связи с чем некоторые исследователи рассматривают их как формы одного полиморфного вида Rosa majalis Herrm. Род Crataegus насчитывает 7 видов, кроме того около 10 видов рода на территории региона используются в озеленении, не «уходят» из культуры.

В 2009 начато формирование электронной базы распространения видов древесных растений семейства Rosaceae на территории Республики Мордовия. Сейчас она содержит материалы по 10 видам семейства, в общей сложности 67 путевых точек, в том числе 38 путевых точек видов рода Rosa. Она позволит наглядно показать распространение того или иного вида на территории Мордовии.

Таким образом, изучение древесных растений семейства Rosaceae, и особенно видов родов Rosa и Crataegus, представляется актуальным как в плане определения статуса видов в составе критических таксонов, так и в отношении исследования состояния видов адвентивной фракции.

ОСОБЕННОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ГУСЕОБРАЗНЫХ ВЕРХНЕКАМЬЯ (КОМИ-ПЕРМЯЦКОГО

ОКРУГА И ПРИЛЕГАЮЩЕЙ ТЕРРИТОРИИ)

–  –  –

Исследуемая территория охватывает бассейн верхнего течения р. Камы с прилегающей территорией и расположена в пределах Удмуртии, Кировской области и Пермского края. Северная часть (бассейны рр. Порыша, Весляны, Лупьи, Тимшера и Косы, водно-болотный комплексе «Озеро Адово», «Кумикушские озера» и оз. Нахты) – зона среднетаежных сосновых и пихто-еловых лесов, отличается значительной лесистостью и заболоченностью.

Южная (бассейн р. Иньвы) – зона южнотаежных пихто-еловых лесов с меньшей лесистостью и заболоченностью, с развитым сельским хозяйством.

Проведен анализ сведений о птицах Верхнекамья и прилегающей территории с конца XIX века, всей информации из фондов кафедры зоологии позвоночных и экологии ПГУ с 80-х г прошлого века и материала собранного в 2005-2009 г Это позволило проследить изменения в распространении отдельных видов и определить их современные границы.

Обычные, широко распространенные гнездящиеся виды по всему Верхнекамью и на сопредельных территориях:

кряква (Anas platyrhynchos), чирок-свистунок (Anas crecca), свиязь (Anas penelope), шилохвость (Anas acuta), чирок-трескунок (Anas querquedula), широконоска (Anas clypeata), хохлатая чернеть (Aythya fuligula).

Лебедь-кликун (Cygnus cygnus) – был распространен очень широко, от тундры до лесостепи, но уже в конце XIX века отмечается исчезновение на большей части ареала. Единичные пары птиц встречены на Редикорской старице, Кумикушских озерах и в верхнем течении р. Тимшер. За 20 лет наблюдений ни разу не обнаружен на оз.

Адово и оз. Нахты.

Серая утка (Anas strepera) – В.К. Рябицев (2008) современную северную границу ареала проводят по южным окраинам исследуемой территории. Однако наблюдается ее проникновение севернее. Птиц регистрировали в Юрлинском районе на рр. Сюрол и Лопан в августе 1992 г. Еще севернее, в Гайнском районе, встречены 2 особи на старице у пос. Кебраты 14 июля 2006 и 17-18 июля 2008 в среднем течении р. Весляна – самки с гнездовым поведением и с птенцами.

Луток (Mergus albellus) – на территории Гайнского района найден дважды – на оз. Адово 24 мая 1990 г. и на пролете 6 мая 2009 г. на р. Каме у пос. Кебраты.

БИОРАЗНООБРАЗИЕ И ЭКОЛОГИЯ

Периодически на осеннем пролете в конце сентября у пос. Кебраты наблюдаются гуси – Anas sp. До вида не определены, но возможны встречи трех видов – белолобый гусь (Anser albifrons), пискулька (Anser erythropus) и гуменник (Anser fabalis).

Так же на пролет встречаются: морская чернеть (Aythya marila), морянка (Clangula hyemalis), синьга (Melanitta nigra) и обыкновенный турпан (Melanitta fusca). Морскую чернеть находили у пос. Усть-Черная по рр. Весляна и Черная 22-23 мая 1990 г. и на Адовом озере 24-25 мая 1990 Морянку – на р. Каме между пос. Гайны и Харино 22-23 мая 1990 Синьгу – на р. Каме у пос. Харино 22 мая 1990, на р. Весляне ниже пос. Усть-Черная. Турпаны наблюдались 22-23 мая 1990 г на р. Каме у пос. Харино, 26 июня 1993 на Адовом озере, в середине-конце июля на р. Утьве в 1992 г. и на р. Весляне в 2008 Виды горных, северо-восточных районов, отмеченные на пролете в мае: длинноносый крохаль (Mergus serrator)

– в верхнем течении р. Тимшер и р. Каме у пос. Кебраты и большой крохаль (Mergus merganser) – на р. Каме у пос. Кебраты и у пос. Сейва.

Лебедь-шипун (Cygnus olor) – залетный вид. В 90-х г прошлого века отмечался на миграциях в южной части Пермского Прикамья. В последующее время залетает до северных районов Верхнекамья и севернее, гнездится на юге Пермского края.

ЭНТЕРОБАКТЕРИИ В СОСТАВЕ МИКРОФЛОРЫ ПЧЕЛ И МЕДОНОСНЫХ РАСТЕНИЙ

–  –  –

Нижегородский государственный университет им.

Н.И.Лобачевского, Н.Новгород, ulyana.85@mail.ru Окружающая среда, медоносные пчелы и их микрофлора представляют собой единую экологическую систему, которая реагирует на любые изменения как внешней, так и внутренней среды. При нормальном физиологическом состоянии взаимоотношение организма пчелы и микрофлоры носит симбиотический характер, и флора при этом выполняет ряд положительных функций, в то же время сдвиг микрофлоры в сторону патогенных представителей приводит к заболеванию. В ряде работ сообщается о патогенности для пчел некоторых представителей семейства Enterobacteriaceae. По данным Э. К. Африкяна (1973) в патологии медоносных пчел отмечаются энтеробактерии родов: Escherichia sp., Citrobacter sp., Enterobacter sp., Hafnia sp., Salmonella sp., Klebsiella sp. Сальмонеллез, шигеллез, протеоз, гафниоз, колибактериоз, цитробактериоз – распространение этих болезней происходит при контакте больных пчел со здоровыми, перестановке сотов от больных семей в здоровые, нападах пчел, использовании ими воды из стоячих, загрязненных водоемов. До сих пор мало, что известно о путях формирования патогенной для пчел микрофлоры и о роли окружающей среды в этом процессе. Известно, что чаще болеют рабочие пчелы, непосредственно контактирующие с различного рода природными субстратами, прежде всего, с медоносными растениями. Информация о возможности растений служить резервуаром для персистенции условно-патогенных бактерий последнее время подтверждается экспериментальными исследованиями. Но до сих пор не показано, какова роль медоносных растений в формировании микробоценоза пчел, в частности, той его части, которая представлена бактериями – представителями семейства Enterobacteriaceae (энтерофлора).

Целью работы явилось исследование видового состава энтерофлоры пчел и некоторых медоносных растений.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи: выделение и идентификация микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae, изолированных от пчел и из проб цветов медоносных растений, таких как липа сердцевидная, кипрей узколистный, малина обыкновенная, одуванчик лекарственный, клевер луговой.

Спектр энтеробактерий в составе микробоценоза пчёл оказался разнообразным и включал 18 видов, представителей 10 родов семейства Enterobacteriaceae. Такое разнообразие еще не свидетельствует о заболевании пчел, наличие большого числа различных энтеробактерий, возможно, обуславливает формирование нормальной микрофлоры насекомых, в то время как сдвиг микрофлоры в сторону какого-либо одного микроорганизма может привести к заболеванию. В составе энтерофлоры медоносных растений обнаружены 14 видов, представителей девяти родов семейства Enterobacteriaceae.

В наших исследованиях показано, что в микрофлоре пчел и цветов встречаются схожие роды энтеробактерий.

Общими для всех исследуемых нами видов растений и пчел стали бактерии родов Hafnia, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, Erwinia.

Таким образом, медоносные растения могут выступать как звено в циркуляции микроорганизмов в системе насекомые-растения, что подтверждают результаты наших исследований.

ГЕНОТОКСИЧНОСТЬ ДЕЛЬТАМЕТРИНА В ОПЫТАХ С DROSOPHILA MELANOGASTER И RATTUS

–  –  –

БИОРАЗНООБРАЗИЕ И ЭКОЛОГИЯ

Тюменский государственный университет, Тюмень, artbot89@mail.ru В последние годы проблемы охраны окружающей среды вошли в число наиболее приоритетных. Применение пестицидов – это один из частых вопросов глобальной проблемы устойчивого развития человеческого общества.

Наиболее удобным объектом, фиксирующим меру этого воздействия, является животный мир. Вполне очевидно, что животные относящиеся к разным систематическим категориям и экологическим группам, специфично реагируют на внесение пестицидов в биоценоз. Имеются данные о том, что некоторые пестицидные препараты обладают мутагенной активностью. В данной работе предпринята попытка оценки генотоксичности дельтаметрина, широко используемого в Тюменской области. Исследования проводились на кафедре экологии и генетики тюменского государственного университета. В эксперименте в качестве тест - объектов использовались Drosophila melanogaster и Rattus. В опытах с Drosophila melanogaster использовались концентрации 0,005% и 0,00005%.

Дельтаметрин добавляли в стандартную пищевую среду, на которой происходило развитие личинок. В качестве контроля использовалась среда без добавления пестицида. В каждом варианте опыта было заложено по три повторности. У личинок в трех последовательны поколениях исследовалась частота пуфов в политенных хромосомах слюнных желез. Образование пуфа связано с деспирализацией отдельных хромомер диска, и в пределах одной ткани многие пуфы сохраняются на всех стадиях развития, некоторые временно появляются только на определенных стадиях.. В наших исследованиях наблюдается увеличение частоты пуфов с увеличением концентрации пестицида. Причем дельтаметрин в концентрации 0,005% индуцирует трехкратное увеличение частоты пуфов в трех последовательных поколениях. Наблюдаемый эффект является стойким, так как в третьем поколении не происходит снижения показателей. Для проведения эксперимента в опытах с Rattus были использованы следующие концентрации дельтаметрина: 0.5%, 0.1%, 0.01%, 0.001%,0.0001%. Первоначально была взята кровь в качестве контрольного образца, после чего пестицид был введен лабораторным животным из расчета 0,5 мл на 100 г, далее пробы крови отбирались дважды с интервалом в две недели. Препараты крови фиксировались в парах уксусного алкоголя в течении десяти минут, после чего были окрашены 2-х %-ным раствором Гимза в течении пятнадцати минут. В пробах крови подсчитывалось количество микроядер в пределах 20 полей зрения микроскопа. В крови животных из всех опытных вариантов обнаружены лимфоциты с микроядрами. По окончании опыта были взяты пробы печени первоначально зафиксированные в уксусном алкоголе. Для окрашивания проб печени использовался регрессивный ацетоарсеиновый метод, длительность окрашивания составила 16 часов.

Дифференцировка окраски осуществлялась в растворе 45%-ой уксусной кислоты на часовом стекле. Были приготовлены временные давленные препараты. Подсчитывалось количество нормальных гепатоцитов и гепатоцитов с микроядрами в пределах десяти полей зрения микроскопа. Печень является органом в котором происходит детоксикация ядов. Изменение гепатоцитов под воздействием пестицида имеет более выраженный характер, однако проявляется лишь при концентрациях дельтаметрина:0,5%, 0,1%, 0,01%. Различия между опытными вариантами с концентрациями: 0,5% и 0,01%; 0,1% и 0,01% носят статистически достоверный характер ( Р 0,05).

Таким образом дельтаметрин обладает генотоксичностью, проявившейся в опытах с Drosophila melanogaster в увеличении частоты пуфов; в опытах с Rattus в появлении микроядер лимфоцитов и аномальных гепатоцитов.

–  –  –

Главный ботанический сад им. Н.В. Цицина РАН, Москва, Maks-BsB@yandex.ru Изучение состояния репродуктивной сферы растений, являющейся одной из важнейших характеристик популяции и вида в целом, становится особенно актуальным при решении проблем сохранения биоразнообразия. В связи с этим, целью нашего исследования стало выявление особенностей самоподдержания, репродуктивной стратегии и тактик популяций в различных, в том числе стрессовых, условиях произрастания.

Была изучена изменчивость структуры генеративного побега корневищной орхидеи – Epipactis palustris (L.) Crantz., из популяции отмеченной на территории минеротрофного ключевого частично осушенного болота на северо-восточной окраине Андреаполь Тверской области.

Популяция насчитывает несколько тысяч особей, представленных более 7 тыс. побегов, находящихся в разных онтогенетических состояниях. Детальные исследования по 7 признакам выявили различия побегов особей E.

palustris, произрастающих на основной части болота и на его осушенном участке. Средняя высота генеративных побегов на болоте составила 48,56 см, а на осушенном участке – 22,28 см, то есть побег оказался уменьшенным более чем в 2 раза. Такая же тенденция наблюдалась и при изучении листовой серии побегов.

В неблагоприятных условиях у E. palustris, также как и у других корневищных видов, как правило, вегетативное размножение преобладает над семенным. Однако данные исследования показали, что корневищные орхидные

БИОРАЗНООБРАЗИЕ И ЭКОЛОГИЯ

наряду с интенсивным вегетативным размножением образуют максимальное число плодов с жизнеспособными семенами. Осушение болота привело к затруднению прорастания семян (из-за уменьшения влажности почвы и увеличения ее плотности), при этом максимальное образование плодов увеличило шансы образования новых особей. Так, у побегов осушенного участка высота соцветия уменьшилась в 1,8 раза, но число цветков в нем практически не изменилось. Компактные соцветия способны привлекать больше опылителей, что обусловливает высокий процент плодообразования (92,24%). При этом на болоте опыляется лишь 50 – 75 % цветков.

Изменение эдафических условий произрастания вида привело и к более медленному пространственному распространению побегов, а также образованию компактных локусов.

Изучаемый вид хорошо приспособился к жизни в условиях умеренного климата. Наблюдения показали, что в дождливые годы процент плодообразования довольно высок даже в отсутствии насекомых-посетителей и насекомых-опылителей. Иногда в качестве пассивного агента-опылителя выступает капля воды, которая при попадании на колонку в цветке, приводит в действие механизм «выворачивания поллинария» (набухание и наплывание его на воспринимающую поверхность рыльца), что приводит к самоопылению.

Как показали наблюдения, наиболее изменчивыми структурами побега являются следующие признаки: высота побега и соцветия, число листьев, число жилок и ширина листовой пластинки. Число цветков практически не изменяется. Данные признаки находятся в прямой зависимости от влияния внешних факторов.

Таким образом, была выявлена репродуктивная стратегия на осушенных участках болота, выражающаяся в образовании компактных локусов, сближении цветков в соцветии, уменьшении высоты и числа метамеров побега, а также ширины листовой пластинки. В неблагоприятных условиях наряду с вегетативным размножением наблюдали высокий процент плодообразования и замену энтомофилии гидрофилией.

ВЛИЯНИЕ НЕКОТОРЫХ ФАКТОРОВ СРЕДЫ НА ВЫЖИВАЕМОСТЬ РАЗЛИЧНЫХ

МИКРООРГАНИЗМОВ

–  –  –

Основные области биотехнологии – это здравоохранение, сельское хозяйство, ферментная технология и технология окружающей среды. Но в последнее время интерес биотехнологов сосредоточен на построении новых биологических машин с самими разнообразными структурами, функциями и применениями. Эта тенденция усилилась с приходом нанотехнологий.

Были проведены исследования влияния некоторых факторов среды: физических ( - и - излучений), химических агентов (ЭДТА) и наночастиц на выживаемость следующих штаммов микроорганизмов: E. coli XL-1 Blue tet (клонированная культура, устойчивая к антибиотику тетрациклину), Bacillus Oligonytrophilus KU1. Данные культуры были выбраны нами не случайно. Благодаря широким биохимическим возможностям, бациллы активно используют в пищевой, фармакологической и биохимической промышленности. На сегодняшний день показано, что штамм Bacillus oligonitrophilus KU1 обладает противораковой активностью. Клетки Bacillus oligonitrophilus KU1 повышают сопротивляемость организма к опухолевым клеткам без использования ингибирующих агентов. Данный штамм устойчив к антибиотику рифампицину, мономицину, ристомицину, но активность подавляется такими препаратами, как хлорамфеникол и канамицин. Штамм Escherichia coli XL1 Blue устойчив к таким антибиотикам, как налидиксовая кислота и тетрациклин (гены устойчивости маркируются плазмидой F).

Также этот штамм может быть использован как продуцент препроинсулина.

Результаты показали, что ответная реакция выбранных штаммов микроорганизмов на действие различными факторами имеет сходный характер, но степень проявления может варьироваться. Так, наночастицы золота стимулируют пролиферацию клеток, увеличивая выживаемость, а наночастицы серебра ингибируют рост колоний; по мере увеличения концентрации ЭДТА наблюдали снижение выживаемости. При воздействии - и – излучений, в зависимости от времени действия, было показано снижение выживаемости исследуемых микроорганизмов.

Эколого-генетическая оценка результатов показала, что реакция различных микроорганизмов на исследуемые факторы имеет сходный характер, в зависимости от концентрации реагирующих веществ и времени воздействия.

Таким образом, степень выживаемости исследуемых объектов качественно не отличается в ответ на различные экологические воздействия.

–  –  –

Казанский государственный университет, Казань, chern.ekaterina@gmail.com Бескишечные турбеллярии (Acoela) представляют собой важную в эволюционном плане группу беспозвоночных животных. Ультраструктурные особенности спермиев широко используются в систематике Acoela. Прежде всего, различия в их строении касаются формулы аксонемы жгутиков и расположения свободных микротрубочек.

Впервые морфология сперматозоидов Сonvoluta convoluta была описана Мамкаевым Ю.В. и Ивановым В.П.

(1970). Нами были уточнены и дополнены сведения по ультратонкому строению сперматозоидов и изучен процесс сперматогенеза.

Зрелый сперматозоид C. convoluta состоит из трех отделов – головки, шейки и хвостика. Вдоль всей его длины проходят два жгутика, инкорпорированные в цитоплазму. По центру головки проходит длинное, вытянутое ядро.

Оно не просматривается только на самом проксимальном конце (макушке), куда заходят только аксонемы двух жгутиков, имеющие формулу 9+0.

В проксимальной части аксонемы окружены дополнительной двойной мембраной, в средней части (шейке) наружные обкладки пропадают, остаются только внутренние. Свободные цитоплазматические микротрубочки, не входящие в состав аксонем, могут занимать два положения. Кортикальные микротрубочки, распределенные равномерно по периферии клетки, проходят вдоль всей длины спермия. В проксимальной части спермия между ядром и каждой аксонемой проходит ряд аксиальных микротрубочек, расположенных в форме полукруга. В среднем отделе (шейке) аксиальные микротрубочки заканчиваются, в цитоплазме присутствуют многочисленные митохондрии, имеющие вытянутую или гантелевидную форму, и мелкие электронно-плотные включения. В дистальном отделе спермия (хвостике) присутствуют только аксонемы двух жгутиков и их внутренние мембранные обкладки. На самом конце хвостика остаются только их кинетосомы.

Наиболее ранние из обнаруженных нами сперматоцитов представляют собой крупные округлые клетки, цитоплазма которых заполнена многочисленными овальными митохондриями и диктиосомами комплекса Гольджи.

Кроме того, в цитоплазме присутствуют скопления гранул с электронно-плотной сердцевиной и прозрачным ободком вокруг нее, и своеобразные включения, имеющие вид округлых мембраноограниченных телец, заполненных мелкими прозрачными пузырьками. У более зрелых сперматоцитов формируется аксиальный цилиндр, свободные микротрубочки разбросаны по цитоплазме и появляются два свободных жгутика. Если в начале сперматогенеза кинетосомы располагаются вблизи ядра, то в ходе дальнейшего развития жгутики погружаются в цитоплазму таким образом, что их кинетосомы остаются в дистальной части будущего сперматозоида. Такое положение жгутиков называется инвертированным. Аксиальный цилиндр распадается на два ряда микротрубочек, располагающихся полукругами между ядром и аксонемами. Остальные микротрубочки перемещаются на периферию клетки и занимают кортикальное положение.

Данные по морфологии спермиев Convoluta convoluta (наличие двух типов свободных микротрубочек и своеобразных мембранных «обкладок» у аксонем) и факт инвертированного положения жгутиков у данного вида приводятся нами впервые.

СИНАНТРОПИЗАЦИЯ И УРБАНИЗАЦИЯ ПТИЦ В УСЛОВИЯХ КРАЙНЕГО СЕВЕРА

НА ПРИМЕРЕ Г. СЕВЕРОМОРСКА

–  –  –

В естественной среде с появлением и дальнейшим развитием поселений человека образуется совершенно новая – городская среда, имеющая целый ряд особенностей и отличий от условий природного ландшафта. Но при этом все процессы, протекающие в ней, всё же подчиняются тем же фундаментальным принципам реализации глобальной роли Живого вещества в переносе вещества и энергии, что и в естественной среде.

В настоящее время наибольшую актуальность приобретают исследования реакции Живого вещества на изменение естественной среды, и значительный интерес представляет проблема адаптации птиц к новым условиям. Так, особый интерес представляет изучение адаптивных процессов к условиям антропогенной среды у птиц в условиях Крайнего Севера (в частности, на примере Североморска) вследствие ряда особенностей, характерных для высоких широт.

Работ, посвященных проведению подобных исследований на территории г.Североморска нет, что является дополнительным стимулом к разработке данного вопроса.

БИОРАЗНООБРАЗИЕ И ЭКОЛОГИЯ

Целью данной работы являлось изучение авифауны в условиях городской среды на примере Североморска.

Задачи:

Выявление видового состава и определение статуса птиц, обитающих на территории города.

1.

Прослеживание сезонной динамики авифауны Североморска и его окрестностей.

2.

Изучение специфики обитания птиц на территории Североморска.

3.

Определение индекса синантропизации наблюдаемых видов и определение сезонного изменения 4.

степени синантропности.

Наблюдения проводили с 8 февраля 2008 по март 2010 При проведении настоящего исследования в основном использовался метод маршрутных учётов, адаптированный под использование в условиях городской среды. В качестве участков проведения наблюдений на территории города выбирали пять наиболее характерных биотопов, (различающиеся по значению фактора беспокойства, наличию искусственных насаждений, укрытий и пищевых ресурсов). На территории прилегающих окрестностей выделили один природный участок в прибрежной зоне (губа Грязная, п. Сафонова) и один, представляющий собой естественные условия Тундры.

В результате проведённых наблюдений, было выявлено, что:

1. Авифауна Североморска представлена 28 видами пяти отрядов.

2. На видовой состав птиц, периодически или постоянно обитающих в городе, оказывают влияние: наличие укрытия (мест для гнездования) и кормовых ресурсов. При этом фактор беспокойства является лимитирующим лишь для ряда видов с низкими значениями Si.

3. Установлено, что на территории Североморска из 30 видов птиц лишь два – домовой воробей и сизый голубь

– являются ярко выраженными синантропами.

4. Сезонные миграции Серебристой чайки на территорию «города» в летний период свидетельствуют о начале развития процесса синантропизации данного вида.

5. Динамика численности массовых видов определяется видовыми этолого-экологическими особенностями, позволяющими реализовать их адаптивные способности в сильно измененных районах природной среды на территории города.

ВЛИЯНИЕ СОЛЕЙ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ НА ТРОФИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ DAPHNIA MAGNA

–  –  –

Саратовский государственный технический университет, Саратов, tysacomsa@rambler.ru Ежегодно в природные водоемы поступает огромное количество различных химических веществ, значительная часть которых относится к соединениям тяжелых металлов. Многие из них являются токсичными как при высоких, так и при очень низких концентрациях. Циркулируя в биосфере, металлы в итоге аккумулируются в гидробионтах, в том числе на уровне фотосинтезирующих организмов первого звена трофической цепи, которые являются основой функционирования водных экосистем, что приводит к нарушениям в первичном продуцировании органического вещества.

В планктоне стоячих и слабопроточных пресноводных водоемов, широко распространенных на территории России, обитают низшие ракообразные Daphnia magna, которые относятся к отряду ветвистоусых. По характеру питания дафнии относятся к фильтраторам, в природе они питаются взвешенными в воде бактериями, одноклеточными водорослями, детритом, растворенными органическими веществами. Дафнии очень чувствительны к присутствию в водной среде загрязняющих веществ, поэтому их используют в биотестировании токсичности среды обитания.

По стандартной методике биотестирования водной среды определяют выживаемость (смертность) и плодовитость Daphnia magna. Биотесты по определению острой токсичности (по выживаемости дафний) длятся 24-96 ч, по хронической токсичности охватывают 3 поколения. Одной из первых реакций дафний на действие токсиканта является изменение трофической активности, поэтому данный показатель можно использовать в качестве тестреакции гидробионтов на присутствие в водной среде токсичных веществ.

Целью данной работы было изучить влияние солей тяжелых металлов на трофическую активность Daphnia magna и возможность использования данного показателя для оценки токсичности сточных вод и состояния природных водоемов.

Эксперименты проводились в растворах ацетатов Ni2+, Cu2+, Co2+, Zn2+, Pb2+, с концентрацией 5,0 … 0,03 мг/л, приготовленных на отстоянной водопроводной воде методом последовательного разведения. Для определения трофической активности дафний в растворы солей помещали по 5 рачков 6-8-дневного возраста, оставляли их на сутки, корм не добавляли. Через сутки в пробы помещали водоросли Chlorella vulgaris Beijer. На спектрофлуориметре «Флюорат-02-Панорама» измеряли интенсивность флуоресценции сред сразу после добавления водорослей и по прошествии 1 часа.

БИОРАЗНООБРАЗИЕ И ЭКОЛОГИЯ

Установлено, что трофическая активность дафний уменьшается в присутствии каждого из металлов, начиная с концентрации - 0,03 мг/л. Определена корреляция между содержанием в среде ионов металлов и трофической активностью дафний для растворов ацетатов Pb(II), Co(II) и Ni(II) в интервале концентраций 0,03-1,25, 0,03 и 0,03 - 0,07 мг/л, соответственно.

Показатель трофической активности дафний оказался более чувствительным для определения токсичности растворов солей тяжелых металлов, чем стандартный метод биотестирования, что свидетельствует о возможности его применения в качестве критерия оценки состояния природных и сточных вод.

ФАУНА БЕНТОСНЫХ ИНВАЗИОННЫХ ВИДОВ ВЕРХНИХ ПЛЕСОВ КУЙБЫШЕВСКОГО ВОДОХРАНИЛИЩА

–  –  –

Казанский государственный университет, Казань, d.bugensis@mail.ru Проблема биологических инвазий в последние десятилетия привлекает повышенное внимание, что вызвано проникновением чужеродных видов из одного региона в другой и усилением их влияния на структурнофункциональную организацию экосистем. Инвазионные виды считаются одной из основных угроз для биоразнообразия экосистем. Несколько видов высших ракообразных и моллюск Dreissena polymorpha (Pallas) встречались на Средней Волге еще до создания каскада водохранилищ. В 1960–1970-х г резко возросло число инвазионных видов в зообентосе Куйбышевского водохранилища в результате целенаправленного выпуска беспозвоночных для улучшения кормовой базы рыб. В последние десятилетия интенсифицировался процесс уже стихийного распространения вселенцев по водохранилищам Волги.

В целом Куйбышевское водохранилище, включая его верховье, выделяется среди многих водохранилищ Волги и других водоемов РФ большим количеством инвазионных видов. В верхних плесах водохранилища (Волжский, Камский и Волжско-Камский) из 277 выявленных таксонов на долю вселенцев приходится 10.8% всего состава зообентоса. По разнообразию среди вселенцев особо выделяются ракообразные – в основном представители Понто-Каспийского комплекса фауны. Из 40 бентосных инвазионных видов, указанных для всего Куйбышевского водохранилища, в его верхних плесах их выявлено 30, из которых 3 – полихет, 2 – олигохет; 1 – пиявок, 5 – моллюсков, 19 – ракообразных (гаммарид – 9, корофиумы – 2, кумовые и мизиды – по 3, узкопалый рак Astacus leptodactilus (Eschscholz) и креветка Macrobrachium nipponense (De Haan)). Впервые нами для Куйбышевского водохранилища указаны следующие виды: олигохета Potamothrix heuscheri (Bretscher), северо-американский моллюск Physella acuta (Draparnaud), ракообразные Stenocuma cercaroides Sars, Dikerogammarus villosus (Sowinsky) и Pontogammarus robustoides (Sars).

Если сравнивать состав чужеродных бентосных видов верхних плесов Куйбышевского водохранилища с другими водоемами, то видно, что он относительно близок к другим водохранилищам Волги и водоемам Северозапада РФ. В рассматриваемой акватории представлены все инвазионные виды, обнаруженные в Рыбинском и Иваньковском водохранилищах. Лишь половина состава видов-вселенцев указана для бассейнов крупных рек Белоруссии. Моллюск Dreissena bugensis (Andrusov) и полихета Hypania invalida (Grube) отмечены во многих пресноводных бассейнах Европы и Северной Америки. Наименьшее сходство характерно для фауны ракообразных. Чужеродный вид Lithoglyphus naticoides C. Pfeiffer пока еще не указан для бассейна Верхней Волги. Крайне редкий в верхних плесах Куйбышевского водохранилища байкальский бокоплав Gmelinoides fasciatus (Stebbing), широко распространен в бассейне Верхней Волги, Ладожском, Чудском и других водоемах Северо-запада РФ.

Моллюски D. polymorpha и D. bugensis наиболее широко распространенные инвазионные виды в пресноводных бассейнах Европы и Северной Америки. Они обычно становятся видами-эдификаторами в специфических консорциях, в состав которых входят преимущественно другие бентосные вселенцы и ряд представителей аборигенной фауны.

Таким образом, в верхних плесах Куйбышевского водохранилища инвазионные виды стали важными элементами донных сообществ, доля которых в численности и биомассе всего зообентоса составляет около 70%.

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

ИДЕНТИФИКАЦИЯ ШТАММОВ ЭНДОФИТНЫХ БАКТЕРИЙ ИЗ КЛУБЕНЬКОВ РАСТЕНИЙ

ФАСОЛИ (PHASEOLUS VULGARIS L.)

–  –  –

Эндофитные бактерии встречаются во всех тканях и органах различных видов растений, в том числе и в клубеньках бобовых растений, в которых численность культивируемых бактерий, не относящихся к Rhizobiaceae, может составить от 104 до 107 КОЕ/г клубенька. Возникает вопрос о возможной роли этих бактерий в симбиозе с растением. Мы предположили, что так же, как и эпифитные ризосферные бактерии, эндофиты клубеньков могут обладать полезными для растений свойствами. С этой целью был проведен скрининг эндофитных бактериальных ассоциаций из клубеньков растений фасоли (Phaseolus vulgaris L.), способных подавлять рост фитопатогенов, стимулировать рост корней и сохранять в своем составе ризобий после длительного хранения и пересевов. Полевые опыты по инокуляции фасоли бактериальными ассоциациями проводили в 2007-2008 гг на серой лесной почве и черноземе выщелоченном. По данным семенной продуктивности растения оказались наиболее отзывчивы на инокуляцию ассоциацией Ф4, которая способствовала увеличению массы семян на 19% (серая лесная почва) и 28% (чернозем), и ассоциацией Ф6, обеспечившей повышение урожая семян на 25% по сравнению с контролем. Обработка ассоциацией Ф5 привела к увеличению на 30% семенной продуктивности растений фасоли в смягченных условиях засухи 2008 г. на серой лесной почве, но в критически засушливых условиях на черноземе в 2 раза снизила урожай. Указанные ассоциации были отобраны для изучения их бактериального состава.

Для идентификации бактерий использовали Определитель бактерий Берджи. Три ассоциации были разделены на 12 штаммов, изучены морфолого-культуральные признаки их колоний и клеток, а также физиологобиохимические свойства. По результатам проведенных исследований, мы пришли к выводу, что изученные штаммы относились к Rhizobium sp. (420, 530 и 621), Bacillus megaterium (411, 412, 413, 511, 512, 521, 610, 622) и Bacillus sp. (522).

Колонии Rhizobium sp. на бобовом агаре на 3-и сутки инкубации при 28°С составляли 8 мм в диаметре, имели белый цвет, слизистую консистенцию и прозрачный ровный край, клетки под микроскопом были подвижными, палочковидной формы размером 0.51.5 мкм. Окраска по Граму отрицательная. Рост на МПА не обнаружен.

Колонии Bacillus megaterium были кремовые, кремово-желтые, полусухие, имели ровный край с прозрачным ободком, диаметр колоний от 10 до 14 мм. Суточная культура под микроскопом имела клетки палочковидные 1.52-5 мкм, для штамма 522 – размер клеток составил 0.82.5 мкм. Споры изученных штаммов имели эллипсовидную форму и занимали центральное положение. Все штаммы были грамположительными, оксидазоотрицательными, проявляли каталазную активность, не росли в анаэробных условиях, гидролизовали крахмал, не утилизировали цитрат, малонат, лизин, орнитин, утилизировали сорбит и инозит, не росли на средах с маннитом, лактозой, глюкозой, сахарозой с добавлением бромтимола блау. Положительную уреазную активность имели все штаммы кроме 522, 622, активность -галактозидазы была отрицательная, фенилаланиндеаминазы – положительная.

В дальнейшем предполагается изучить свойства этих штаммов, обеспечивших повышение продуктивности инокулированных растений, в системах in vitro и in planta.

СОДЕРЖАНИЕ АФК В РАЗЛИЧНЫХ КОМПАРТМЕНТАХ РАСТИТЕЛЬНЫХ КЛЕТОК В УСЛОВИЯХ

ГИПОКСИЧЕСКОГО СТРЕССА

–  –  –

Воронежский государственный педагогический университет, Воронеж, olgaberdn@mail.ru При действии гипоксического стресса в растениях происходит накопление активных форм кислорода (АФК), таких как супероксидные анион-радикалы, перекисные, гидроксильные радикалы, пероксид водорода. Ранее нами было показано, что образование АФК в тканевых гомогенатах растений происходило даже в условиях кратковременной гипоксии. Исследовали скорость образования супероксидного анион-радикала и пероксида водорода в различных клеточных компартментах (митохондриях, хлоропластах, цитоплазме) 10-дневных проростков гороха, подвергнутых воздействию (3-9 ч) гипоксии и среды диоксида углерода (100 %). Продукцию супероксидного анион-радикала (супероксида) определяли спектрофотометрически по накоплению адренохрома,

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

содержание пероксида водорода – с использованием пероксидазы и о-дианизидина. Выделение митохондрий и хлоропластов проводили методом дифференциального центрифугирования, контролируя чистоту по маркерным ферментам (сукцинатдегидрогеназа) и хлорофиллу. Показано, что через три часа действия на растения гипоксии и СО2 – среды накопление супероксида происходило только в хлоропластах клеток и оно превышало уровень контроля в 2,5 – 3 раза. В митохондриях и цитоплазме в первые часы опыта количество супероксида было на уровне аэрируемых растений. Через 6 часов влияния гипоксии и среды диоксида углерода количество супероксида в хлоропластах клеток снизилось в 1,5 – 2 раза по сравнению с трехчасовым действием различных газовых сред. В митохондриях и цитоплазме уровень супероксида наоборот начинал возрастать. В митохондриях произошло увеличение уровня супероксидного анион-радикала на 20 – 60 %, а в цитоплазме – на 20 – 40 % по сравнению с контрольными растениями. На протяжении последующих часов опыта накопление супероксида отмечалось только в цитоплазме, а в митохондриях и хлоропластах происходило снижение исходного уровня супероксида. К концу опыта (9 час) количество супероксида в цитоплазме возросло в 2,5 – 3,5 раза по сравнению с контрольными необработанными растениями. В хлоропластах скорость образования супероксидного анионрадикала в условиях гипоксии была на уровня контроля, а в СО2 – среде – на 40 % выше уровня аэрируемых растений. В митохондриях растительных клеток продолжалось снижение количества супероксида как в условиях гипоксии, так и в среде высоких концентраций диоксида углерода. Продукция пероксида водорода в митохондриях, хлоропластах и цитоплазме в условиях гипоксического стресса менялась так же, как и содержание супероксида. Таким образом, при исследовании было впервые показано накопление супероксидного анион-радикала и пероксида водорода в различных клеточных компартментах растений гороха. Отмечено, что в первые часы гипоксического стресса накопление супероксида и пероксида водорода происходит только в хлоропластах клеток. А в митохондриях и цитоплазме содержание данных АФК начинало возрастать только через 6 часов. При увеличении сроков экспозиции в цитоплазме продолжалось дальнейшее накопление супероксида и пероксида водорода, а в митохондриях и хлоропластах оно снижалось до уровня контрольных растений. Высокие концентрации СО2 усиливали эффекты гипоксии на продукцию АФК во всех клеточных компартментах.

ВЛИЯНИЕ СЛАБОГО ИМПУЛЬСНОГО МАГНИТНОГО ПОЛЯ НА ПЕРЕКИСНЫЙ ГОМЕОСТАЗ

МИКРОМИЦЕТА TRICHODERMA VIRIDE

Борисова И.В., Лазарева Е.С., Игнатова О.С., Смирнов В.Ф.

Нижегородский государственный университет им. Н.И.Лобачевского, Н.Новгород, laser.85@mail.ru Микромицеты играют важную роль в биоповреждении природных и синтетических промышленных материалов, что связано с высокой лабильностью их метаболических процессов, которая обуславливает значительные адаптационные возможности. В настоящее время, наряду с химическими способами защиты (фунгицидные вещества, химические присадки), широкое применение находят и физические: ионизирующее излучение, ультразвук, электрохимическая защита, обработка электрическим и магнитным полем, которые также существенно подавляют развитие микроорганизмов.

Слабые магнитные поля, характеризуются низким повреждающим действием в отношении промышленных материалов (отсутствие термального и механического эффекта), вследствие чего их исследование является перспективным в рамках проблемы биоповреждений. В то же время, физиолого-биохимические механизмы действия полей на метаболизм микромицетов изучены недостаточно. Одним из важных биохимических процессов, характеризующих степень стрессового воздействия на живые организмы, в частности, на грибы, является перекисное окисление липидов (ПОЛ) биомембран. Следует отметить, что сведения о влиянии физических факторов на ПОЛ у микромицетов практически отсутствуют.

В связи с этим целью нашей работы было исследование влияние слабого импульсного магнитного поля на перекисный гомеостаз микромицета Trichoderma viride.

Объектом исследования служил штамм Trichoderma viride ВКМ-1117. Культура выращивалась на полной питательной среде Чапека-Докса на качалках (200 об/мин). На 14 сутки культивирования мицелий гриба помещали на 30, 90 и 150 минут в слабое импульсное магнитное поле (пачки из 20 импульсов длительностью 227 мкс с амплитудой 1.5 мТл, следующих с частотой 15 Гц). Интенсивность ПОЛ оценивали по содержанию в мицелии диеновых (ДК) и триеновых коньюгатов (ТК). Активность внутримицелиальной каталазы определяли по скорости расщепления пероксида водорода. Концентрацию белка оценивали по методу Лоури. Все измерения проводили сразу после обработки магнитным полем.

Было установлено, что воздействие магнитного поля в течение 30 и 90 минут вызывает снижение содержания ДК на 30 и 40%, соответственно. 150- минутная экспозиция повышала содержание ДК на 60 %. Зависимость ТК от времени воздействия поля имела сходный характер. Активность каталазы недостоверно возрастала после 30 и 90 минут и достоверно снижалась на 12 % после 150 минут воздействия. Содержание белка в мицелии

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

снижалось на 15% после 30 и 90 минут и на 5% после 150 минут воздействия поля. Выход белка в культуральную жидкость возрастал на 40% при всех экспозициях.

Исходя из полученных результатов, можно сделать вывод, что слабое импульсное магнитное поле может оказывать мембранотропный эффект, связанный, в частности, с нарушением целостности биомембран, что подтверждается возрастанием выхода белка на всех временных интервалах действия этого фактора. Более короткие экспозиции, предположительно, вызывают замедление метаболических процессов, что проявляется в снижении интенсивности ПОЛ. При увеличении длительности воздействия и росте повреждающего эффекта ПОЛ возрастает, и запускаются адаптационные механизмы, связанные с синтезом специфических белков, обладающих антиоксидантным действием (тиоредоксинов, глутаредоксинов, металлотионеинов и др.).

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ И ГАЗОВЫЙ СОСТАВ ЭВТРОФНОГО БОЛОТА

ЗАПАДНОЙ СИБИРИ

–  –  –

Томский государственный педагогический университет, Томск, 05alla@mail.ru Роль болот Западной Сибири в формировании потоков газообразных соединений углерода огромна, что обусловливает необходимость изучения эмиссии парниковых газов. Интенсивность выделения парниковых газов определяется микробиологической активностью. Многие ученые считают, что в переувлажненных болотах активность микрофлоры проявляется только в окислительных условиях торфяной залежи (ТЗ). Вопрос о микробиологической активности всей ТЗ остается открытым.

Целью данной работы было исследование газового состава (выделение СО2 и СН4) и динамики численности микроорганизмов, участвующих в процессах трансформации органического вещества торфа, в профиле ТЗ эвтрофной болотной экосистемы в зависимости от гидротермического и окислительно-восстановительного режимов за период вегетации 2009 года. Определение концентрации СО2 и СН4 в ТЗ проводили «peepers»методом. На протяжении всего вегетационного периода в ТЗ определяли уровень болотных вод (УБВ), окислительно-восстановительный потенциал и температуру.

Микробиологический анализ включал определение:

аммонификаторов – на МПА; микроорганизмов, усваивающих минеральный азот – на КАА; аэробных целлюлозолитических микроорганизмов – на среде Гетчинсона-Клейтона; денитрификаторов – на простой среде для денитрификаторов.

Объектами исследований послужили торфяные залежи пункта 1 (естественная залежь) и пункта 2 (залежь с элементами агролесомелиорации) эвтрофного болота «Таган» (Томская область). Мощность залежей составляет 3–3,5 м.

По результатам исследований, проведенных в условиях умеренно влажного вегетационного периода 2009 г.

(ГТК=1,22) установлено, что все слои ТЗ обоих пунктов наблюдений активны. При этом концентрация диоксида углерода в ТЗ п. 1 изменялась от 0,047 ммоль/л до 1,44 ммоль/л, концентрация СН4 – от 0,0000326 до 0,159 ммоль/л. Концентрация СО2 в ТЗ п. 2 варьировала в пределах от 0,041 ммоль/л до 1,840 ммоль/л, концентрация СН4 – от 0,000042 до 0,134 ммоль/л. Установлено, что в среднем в ТЗ п. 2 диоксида углерода образовалось на 25% больше по сравнению с естественным участком (п. 1), чему благоприятствовали снижение УБВ до с 23 см до 53 см за период вегетации, преобладание окислительных условий до глубины 100–120 см и прогревание залежи до летних температур. При этом на п. 1 сформировались более анаэробные условия: УБВ до середины июля находились у поверхности, а окислительные условия преобладали до глубины 20–40 см, что способствовало более активному процессу образования СН4 по сравнению с ТЗ п. 2 (в среднем метана образовалось на 40 % больше). По результатам исследований микрофлоры и газового состава установлено, что агролесомелиорация способствовала улучшению водно-воздушного режима в ТЗ п. 2, что в свою очередь привело к активизации процессов превращения минерального азота (на 30 %), разрушения целлюлозы (в 1,2–2 раза), денитрификационных процессов (до 9 раз), а также к повышению активности образования СО2, по сравнению с естественным участком (п. 1). Таким образом, в результате активизации аэробных процессов разложения органического вещества торфа в ТЗ п. 2 усилились процессы образования СО2, тогда как в профиле ТЗ естественного участка (п. 1) преобладали процессы образования метана. В целом полученные данные позволяют расширить представление о функционировании болотных экосистем и оценить интенсивность биохимических процессов во всем профиле ТЗ эвтрофного болота.

Работа выполнена при поддержке Государственного контракта № 02.740.11.0325 и грантов РФФИ (№№ 09-05р-офи 09-05-99007).

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

–  –  –

Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева, Саранск, julenja@bk.ru В сельском хозяйстве для повышения урожайности культурных растений широко применяют азотные и фосфорные удобрения, чрезмерное использование которых приводит к загрязнению окружающей среды и их накоплению в продуктах питания. Использование биопрепаратов, характеризующихся ростстимулирующими свойствами, позволит снизить количества вносимых химикатов. Перспективным направлением в этой области является использование ризосферных бактерий р. Pseudomonas, имеющие ряд преимуществ по сравнению с другими микроорганизмами. Обработка семян и растений биопрепаратами способствует их интенсивному развитию, а внесение на поля – оздоровлению почвенной микрофлоры. Псевдомонады – естественные обитатели ризосферы растений, синтезирующие биологически активные вещества, положительно влияющие на рост сельскохозяйственных культур. Стимуляция роста растений происходит за счет образования бактериями в процессе своей жизнедеятельности таких вторичных метаболитов как индолил-3-уксусную кислота и цитокининподобные вещества.

На кафедре биотехнологии ведутся исследования биопрепарата, полученного на основе нового штамма Pseudomonas aureofaciens. Была показана высокая антифунгальная активность биопрепарата к ряду фитопатогенов, которая сохранялась в течение длительного времени. Для подтверждения ростстимулирующих свойств исследуемого биопрепарата проводили обработку семян томата и пшеницы путем замачивания: опыт – биопрепарат: вода (1:100), контроль – водопроводная вода.

Замачивание семян томата в культуральной жидкости бактерий не повлияло на скорость их прорастания, но способствовало ускоренному развитию проростков. Длина ростков томата в опытных вариантах в 2-3 раза превысила длину контрольных ростков.

При обработке биопрепаратом семян пшеницы уже через 72 часа всхожесть составила 100%, в то время как в контроле – 30%. Также отмечено лучшее развитие как корневой, так и вегетативной части проростков.

Таким образом, показано положительное влияние нового вида биопрепарата на развитие культурных растений.

ВЛИЯНИЕ ИМПУЛЬСНОГО МАГНИТНОГО ПОЛЯ НА ПЕРЕКИСНЫЙ ГОМЕОСТАЗ

ХЛОРОПЛАСТОВ ГОРОХА

–  –  –

Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Н.Новгород, katelyn@bk.ru Слабые электромагнитные поля (ЭМП) различных диапазонов могут взаимодействовать с живыми системами, вызывая значительные изменения их состояния. Так показано, что слабые ЭМП могут изменять внутриклеточную концентрацию ионов и сродство белков к Са2+ [1]. Однако вся последовательность причинноследственной связи между «приёмником» ЭМП и биохимическим и физиологическим откликом остается не до конца раскрытой. Целью нашей работы стало исследование влияния импульсного магнитного поля (ИМП) на уровень продуктов перекисного окисления липидов и антиоксидантную систему защиты в хлоропластах гороха.

Объектом исследования служили 14-дневные растения гороха Pisum sativum L. сорта «Альбумен», выращенные в лабораторных условиях. Обработке полем подвергали целые растения в течение 15, 30, 60 и 120 мин. ИМП (пачки из 20 импульсов длительностью 227 мкс с ампитудой 1500 мкТл, следующих частотой 15 Гц) создавали с помощью генератора фирмы Electro-Biology Inc. Контролем служили растения, выдержанные в течение экспозиции в условиях нормального геомагнитного поля. Состояние мембран оценивали по содержанию продуктов перекисного окисления липидов (ППОЛ): диеновым коньюгатам (ДК) и основаниям Шиффа (ОШ).

Состояние антиоксидантной системы оценивали по активности супероксиддисмутазы (СОД), аскорбатпероксидазы (АП) и содержанию аскорбиновой кислоты (АК).

При воздействии ИМП уровень ППОЛ оставался вблизи контрольного, и только после 120 минут обработки полем, концентрация ДК достоверно уменьшалось на 10%. ИМП повышало активность АП, достигавшую в точке 60 минут 140% от контроля. Содержание АК оставалось неизменным, кроме 60-минутной экспозиции, где оно повышалось до 140%. Ответ СОД на действие ИМП носил немонотонный характер. На фоне общего повышения активности фермента точка максимума приходилась на 15 минут и составляла 175 % от контроля, затем активность приближалась к контрольной и снова возрастала.

Таким образом, импульсное магнитное поле не вызывало значительных изменений содержания продуктов перекисного окисления липидов. Полученные результаты позволяют заключить, что антиоксидантная система

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

хлоропластов компенсировала возможное повреждающее действие ИМП. Быстрая активация СОД объясняется ее ключевой ролью на первом этапе АО-защиты. При её работе образуется пероксид водорода, в ликвидации которого в хлоропластах главным образом участвует аскорбатпероксидазный цикл [2], чем объясняется более поздняя, по сравнению с СОД, активация его компонентов – аскорбатпероксидазы и аскорбиновой кислоты.

Подобный ответ антиоксидантной системы может обуславливать устойчивость пластид к данному физическому воздействию.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ АТОМНО-СИЛОВОЙ МИКРОСКОПИИ ДЛЯ ОЦЕНКИ РЕАКЦИИ БАКТЕРИЙ НА

РАЗЛИЧНЫЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ

–  –  –

Оренбургский государственный университет, Оренбург, avasilchenko@gmail.com Атомно-силовая микроскопия (АСМ) в микробиологических исследованиях занимает особое место благодаря возможности исследовать биологические объекты с высоким разрешением при минимальном воздействии на структуру образца. В этой связи, целью нашей работы стало исследование действия различных факторов на бактерии, для анализа механизмов и последствий которого была использована АСМ.

В качестве модельных объектов были выбраны Escherichia coli К 12 и Bacillus cereus IP 5832. Бактерии выращивались на LB-бульоне (Sigma-Aldrich) 22 ч, 37° С. Образцы после опытного воздействия исследовались на атомно-силовом микроскопе SMM-2000 (ЗАО «КПД», Зеленоград), с последующей обработкой результатов штатным программным обеспечением. Статистическую обработку проводили посредством программного обеспечения AtteStat, работающей в среде MS Excel.

Исследование воздействия на бактерии биогенного вещества было выполнено на примере антибиотиков. Было проанализировано действие ампициллина из группы лактамных антибиотиков и тромбоцитарного катионного белка (ТКБ), относящегося к классу катионных антимикробных пептидов. Действие ампициллина на B.cereus привело к дезорганизации наружного пептидогликанового слоя и снижению жесткости клеток, в тоже время, действие ампициллина на E.coli выразилось в появлении аномально удлиненных форм клеток при видимой целостности их поверхности и с сохранением механической прочности клеток. Действие другого антимикробного агента - ТКБ на E.coli заключалось в формировании пор на поверхности клеток, изменением размерных характеристик клеток, а также снижением модуля Юнга по сравнению с контролем. В отношении B.cereus действие ТКБ зафиксировано только по изменению шероховатости поверхности клеток.

Для оценки реакции бактерий на действие веществ абиогенной природы нами были выбраны различные наноматериалы: фуллерены и их производные, а также одно- и многостенные нанотрубки. Было установлено, что С60-фуллерены и их производные, функционализированные карбоксильными группами, не приводят к достоверным морфологическим изменениям бактериальных клеток. Фуллерены, функционализированные аминными группами, демонстрируют высокое сродство к поверхности E.coli. Контакт подобных фуллеренов приводит к существенному изменению морфологии клеток. Контакт клеток E.coli и препарата одностенных нанотрубок содержащий до 20 % примесных элементов, привел к появлению на поверхности бактерий образований различного размера, излитию целлюлярного содержимого в среду, что сопровождалось уплощением клеток. Напротив, инкубация бактерий с одностенными и многостенными нанотрубками, имеющими высокий уровень очистки от примесей (97,64-99,97 %), не вела к значимым изменениям морфологии клеток.

Таким образом, получены данные, позволяющие говорить о микроорганизмах как о потенциальных индикаторах присутствия в среде различного спектра веществ, обладающих мембранповреждающими свойствами.

Использование атомно-силовой микроскопии в подобного рода исследованиях позволяет получить уникальную информацию об объекте, недоступную другим методам микроскопии. Все сказанное определяет возможность использования микроорганизмов как тест-объектов и атомно-силовой микроскопии как основного метода оценки различного рода воздействий.

–  –  –

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

Фотосистема II (ФС II) - сложный пигмент-белковый комплекс, в котором происходит первая стадия преобразования световой энергии, приводящая к разложению воды на молекулярный кислород, протоны и электроны. Разрешение имеющихся пространственных структур ФС II не позволяет идентифицировать молекулы воды и кислорода и, соответственно, проанализировать систему каналов подающих воду к Mn4Ca кластеру (каталитическому центру фотосистемы) и отводящих полученный молекулярный кислород и протоны в люмен.

Используя определенную нами структуру ФС II из Th.elongatus c максимальным на данный момент разрешением 2.9, были рассчитаны и охарактеризованы девять возможных траекторий продукт/субстратных каналов.

Анализ полученных каналов позволил предположить, что пять наиболее узких отвечают за транспорт протонов, два гидрофильных отвечают за подачу воды к Mn4Ca кластеру, а два наиболее широких и гидрофобных служат для вывода молекул кислорода от Mn4Ca кластера. Выход кислорода через один из кислородных каналов, вероятно, регулируется за счет конформационных изменений аминокислотного остатка Lys 134 субъединицы PsbU. Теоретические расчеты кислородных каналов были экспериментально подтверждены с помощью полученных пространственных структур комплексов фотосистемы II из Th.elongatus с диметилсульфоксидом с разрешением 3.4 и инертным газом криптоном с разрешением 4.5.

Работа финансировалась Программой поддержки ведущих научных школ Программой МКБ РАН, Федеральным агентством по науки и (НШ-4435.2010.4), инновации (ГК № 02.740.11.0295), грантом РФФИ.

ОЦЕНКА БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ И СОДЕРЖАНИЕ ВТОРИЧНЫХ МЕТАБОЛИТОВ В

КОМНАТНЫХ, ДИКОРАСТУЩИХ И КУЛЬТИВИРУЕМЫХ IN VITRO ЛЕКАРСТВЕННЫХ

РАСТЕНИЯХ Гафиятова Э.И., Пархимович И.В., Фатыхова Д.Г., Абдрахимова Й.Р., Ильинская О.Н.

–  –  –

Известно, что лекарственные растения содержат уникальные комплексы биологически активных веществ, часто вторичного происхождения, обуславливающие широкий спектр их фармакологических эффектов, в том числе антимутагенных. Поиск природных антимутагенов представляется актуальным в связи с увеличивающимся объемом техногенных загрязнений и связанных с этим ростом числа заболеваний.

Объектами служили экстракты из листьев целого ряда лекарственных растений: дикорастущих - чистотела большого (Chelidonium majus), мать-и-мачехи обыкновенной (Tussilago farfara) и др., комнатных - алоэ древовидное (Aloe arborescens), каллизии душистая (Callisia fragans), а также суспензионных культур женьшеня японского (Panax japonicus), диоскореи дельтовидной (Dioscorea deltoidea) и видов полисциас (Polyscias filicifolia, P. fruticosa), любезно предоставленные проф. А. М Носовым (ИФР РАН, Москва). Были применены SOS-хромотест с использованием тестерных штаммов Salmonella typhimurium и E. coli PQ 37 и ДНКповреждающий Rec-тест с использованием штаммов E.coli, дефектных по ДНК полимеразе 1- pol A, с нарушением эксцизионной репарации - uvr A и пострепликативной репарации - rec A, а также спектрофотометрическое определение содержания флавоноидов (в пересчете на рутин) в лекарственном сырье.

Было установлено, что соки A. arborescens, C. fragans, T. farfara, Ch. majus обладают ярко выраженными антимутагенными и десмутагенными эффектами, зафиксированными по снижению фактора индукции SOSответа у использованного мутантного штамма (E. coli PQ 37). Наибольший биоантимутагенный эффект отмечен у Ch. majus при разведении сока в 100 раз (0.001 мг/мл), а наибольший десмутагенный – в 10 раз (0,01 мг/мл).

Тесты на токсичность и мутагенность с использованием тестерных штаммов Salmonella typhimurium и E. coli PQ 37 показали отсутствие у всех исследуемых экстрактов мутагенных свойств, кроме таковых Ch. majus и T.farfara, мутагенность которых составила соответственно 5.1 ед. и 9.13 ед. при допустимой норме в 6 ед.

Результаты исследования антигенотоксических свойств сока Ch. majus показали, что наивысший эффект наблюдается при совместном действии фурацилина и сока Ch. majus на штамм pol A, что выражалось в существенном снижении генотоксического действия фурацилина. На штаммах uvr A и rec A антигенотоксический эффект сока Ch. majus был существенно ниже. Антигенотоксическая активность Dioscоrea delfoidea наблюдалась при использовании в эксперименте 100% экстракта во всех трех штаммов, а экстракта Panax japonicus на штаммах uvr A и pol А.

Антимутагенное и антигенотоксическое действие исследуемых растительных экстрактов обсуждается с данными экспресс-диагностики по выявлению разных вторичных метаболитов в растительном сырье, а также количественным содержанием флавоноидов, обладающих антиоксидантной активностью.

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

ОТБОР ГИБРИДНОГО МАТЕРИАЛА КАРТОФЕЛЯ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА КАРТОФЕЛЕПРОДУКТОВ

Гизатуллина А.Т.1,Гимаева Е.А.2,Сташевски З.2,Черезов С.Н.1 Казанский Государственный Университет, Казань, Severyanka88@yandex.ru;

ГНУ «Татарский научно-исследовательский институт сельского хозяйства» Россельхозакадемии, Казань Продукты быстрого питания - картофель фри, пеллеты, чипсы, картофельные хлопья занимают определенное место в обеспечении населения продовольствием. Цель нашей работы состояла в оценке селекционного материала картофеля по морфологическим, техническим и биологическим показателям для выведения высокопродуктивных сортов, пригодных для промышленной переработки.

Объектом наших исследований служила гибридная популяция картофеля 4 года выращивания, полученная при скрещивании сорта Утенок (Пензенский НИИСХ, ВНИИ картофельного хозяйства) и сложного межвидового гибрида 50-03, который был создан в ВНИИ Защиты Растений (г. Санкт-Петербург) на основе сорта Дезире Solanum tuberosum L. и 4 диких видов картофеля (S. polytrichom, S. simplicifolium, S. verrucosum, S. licarna). Нами было изучено 64 гибрида с нумерацией от 6-24-1 6-24-67 по продуктивности, морфобиологическим показателям и структуре урожая в результате выделились следующие гибриды: 6-24-11, 6-24-16, 6-24-24, 6-24-25, 6-24-60, 6-24-61, 6-24-67. После уборки урожая в клубнях картофеля определено содержание сухого вещества и крахмала с помощью измерения плотности клубней картофеля в воде. Оптимальное содержание сухого вещества в клубнях, обеспечивающее максимальный выход и качество картофелепродуктов (картофель фри, хрустящий картофель), было установлено у 14 гибридов (22%). У 12 гибридов (19%) было выявлено оптимальное содержание крахмала в клубнях. Для производства хрустящего картофеля и картофеля фри наиболее пригодны клубни с содержанием редуцирующих сахаров 0,2-0,4%. Содержание редуцирующих сахаров в клубнях устанавливали с использованием реактива Самнера (на воздушно сухую массу). Заданным параметрам соответствовали 3 гибрида: 6-24-23 (0,19%), 6-24-49 (0,23%) и 6-24-31 (0,4%). В клубнях 11 гибридов (17%) содержание редуцирующих сахаров было близким к оптимальному (0,4-0,6%).

От степени потемнения сырой мякоти клубней напрямую зависит качество получаемых картофелепродуктов.

Среднее значение данного показателя по комбинации Утенок х 50-03 во время уборки было на уровне 7,5±1 балла по девятибалльной шкале (9 баллов – потемнение отсутствует). Слабое (7 баллов) и очень слабое (8 баллов) потемнение мякоти клубней было показано более чем у половины изученных 33 (52%) гибридов. В случае 4 (6%) гибридов (6-24-13, 6-24-25, 6-24-55, 2-24-57) потемнение отсутствовало (9 баллов).

С помощью компьютерного моделирования построены закономерности распределения гибридной комбинации картофеля по потемнению мякоти клубней, продуктивности, структуре урожая. В результате комплексного изучения гибридов комбинации скрещивания Утенок х 50-03 было выявлено 7 (11%) номеров столового назначения (6-24-25, 6-24-11, 6-24-16, 6-24-61, 6-24-24, 6-24-60, 6-24-67) и 2 (3%) номера пригодных для переработки картофелепродуктов (6-24-10, 6-24-44).

СОДЕРЖАНИЕ ПРОЛИНА И ПИГМЕНТОВ У РАСТЕНИЙ ТЕХНОГЕННЫХ ЗАСОЛЕННЫХ

ЛАНДШАФТОВ

–  –  –

Пермский государственный университет, Пермь, grachevaksunia@rambler.ru Засоление является одним из наиболее важных экологических факторов внешней среды, которые отрицательно влияют на процессы роста и развития растений. В настоящее время увеличение засоленных почв связано с последствиями антропогенного воздействия, и в частности, разработки месторождений. Выяснение биохимических и физиологических механизмов, функционирующих в растениях при воздействии стрессовых факторов, имеет важное значение для повышения солеустойчивости растений. Целью нашей работы явилось изучение влияния разного уровня техногенного засоления на содержание свободного пролина и пигментную систему растений. Объектами исследований были взяты растения, произрастающие в зоне неустойчивого (контроль) и устойчивого засоления в зоне солеотвалов Верхнекамского месторождения солей, такие как бодяк полевой, одуванчик Остенфельда, клевер ползучий, подорожник большой и мать-и-мачеха обыкновенная. В механизмах солеустойчивости растений ведущую роль играет накопление осмопротекторов, в частности пролина. Как показали результаты проведенных нами исследований, полынь обыкновенная и бодяк полевой в условиях устойчивого засоления накапливали больше свободного пролина, по сравнению с другими видами.

Вероятно, в адаптации этих видов к техногенному засолению пролин имеет существенное значение, повышая их солеустойчивость. Свободный пролин при стрессе обеспечивает поддержание клеточного гомеостаза и переход в новое адаптивное состояние. Он влияет на внутриклеточную регуляцию между цитоплазмой и вакуолями,

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

защищает ферменты и внутриклеточные структуры, инактивирует свободные радикалы, является источником углерода и азота для восстановления после действия стресса. У клевера ползучего и подорожника большого под влиянием высоких концентраций техногенных солей произошло снижение уровня пролина по сравнению с контролем. По-видимому, роль пролина в адаптации этих видов к условиям солевого стресса несущественна.

Содержание пигментов в листьях является одним из показателей их фотосинтетической активности.

Определение содержания хлорофилла а показало, что под влиянием антропогенного засоления у мать-и-мачехи и клевера произошло увеличение количества этого пигмента. Активация биосинтеза хлорофилла а, вероятно, способствует повышению адаптивных возможностей этих видов к действию техногенных солей. У полыни и бодяка влияние данного фактора привело к снижению количества как хлорофилла а, так и хлорофилла в.

Снижение уровня хлорофиллов, вероятно, связано с тем, что засоление оказывает существенное влияние на структурно-функциональное состояние хлоропластов. Оно угнетает синтез хлорофиллов, процесс циклического фосфорилирования и может вызвать деградацию хлоропластов. В условиях устойчивого техногенного засоления произошло увеличение количества каротиноидов у таких видов как бодяк и мать-и-мачеха. Повышение уровня каротиноидов, выполняющих протекторную роль, имеет адаптивное значение, т.к. они подавляют процесс накопления возбужденного синглетного кислорода, препятствуя, таким образом, окислительному стрессу, который возникает при действии различных неблагоприятных факторов, в том числе и при засолении.

–  –  –

Изучение факторов, регулирующих процессы липогенеза съедобных грибов, давно привлекает внимание современных исследователей. Базидиомицет Lentinula edodes (шиитаке) – объект многолетних исследований, направленных на интродукцию этой ценной культуры с разнообразными лечебно-профилактическими свойствами в практику.

В работе использован штамм L. edodes F-249. Твердофазное культивирование проводили на агаризованных средах с пивным суслом, а также на природном субстрате, состоящем из смеси дубовых опилок и пшеничного зерна. Глубинное культивирование осуществляли на жидкой синтетической среде с глюкозой и аспарагином в течение 28 сут при 26оС. Липиды экстрагировали модифицированным методом С. Song с соавторами (1989).

Жирные кислоты (ЖК) анализировали в виде метиловых эфиров методом газожидкостной хроматографии.

Выявленные нами изменения ЖК состава общих липидов, происходящие по мере развития L. edodes F-249, оказались интересны тем, что в необычно значительной степени затрагивали длинноцепочечные ЖК. Так, появление пигментации мицелия, характерной для L. edodes при переходе к генеративной стадии развития, сопровождалось повышением содержания кислоты С24:1 до 4% от суммы ЖК. На стадии образования плодовых тел отмечалось заметное увеличение уровня ненасыщенных ЖК за счет ненасыщенной ЖК С24 ряда.

Представляло интерес детектировать кислоты указанного ряда при иных условиях культивирования шиитаке.

Использовали добавки метилфосфоновой кислоты (МФК) к синтетической среде глубинного культивирования. В диапазоне концентраций 1.0.106 - 1.0.103 моль/л МФК преобладающим ЖК компонентом С24 ряда в мицелии оказалась лигноцеровая кислота. В начальный период выращивания (2 сут) микромолярная добавка МФК наименее эффективна: в 12, 17 и 2 раза выше уровень С24:0 при 105,.104 и 103 моль/л МФК. После 4 сут культивирования достигнутая в присутствии 106 моль/л концентрация С24:0 не повышается, а содержание МФК 104 моль/л остается оптимальным по продукции лигноцеровой кислоты. Максимум продукции этой ЖК приходится на 7 сут роста. После 17 сут уровень С24:0 выше контрольного (без МФК) лишь при 106 моль/л добавки.

Динамика появления лигноцеровой кислоты в культуральной жидкости гриба совсем иная: максимум наблюдается для 2-сут культуры (оптимальна концентрация МФК 105 моль/л), а затем - спад, и через 7 сут роста С24:0 не детектируется (а именно это период наибольшего накопления ее мицелием, см. выше). После 9 сут роста концентрация внеклеточной С24:0 достигает в лучшем случае 1,25% от суммы ЖК (14-е сут, при 105 моль/л МФК).

Факт продукции моноеновой ЖК С24 ряда, С24:1(cis-15), обнаруженной нами в тех же экспериментах, разумно связать с интенсификацией биосинтеза насыщенного производного на 7-е сут роста мицелия и процессами

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

десатурации ацильных цепей ЖК. Именно в этот период содержание С24:1(cis-15) тоже максимально: около 8% и 6% от суммы ЖК при 103 и 104 моль/л МФК соответственно. Более низкие концентрации добавки МФК неэффективны, С24:1(cis-15) обнаруживается на уровне десятых долей % от суммы ЖК в мицелии только 14-сут культуры. Таким образом, впервые обнаружена гиперпродукция длинноцепочечных ЖК С24 ряда под влиянием соединения фосфонатной природы в культуре высшего гриба.

СКРИНИНГ ФЕНИЛАЦЕТОНИТРИЛ-УТИЛИЗИРУЮЩИХ ПОЧВЕННЫХ БАКТЕРИЙ

–  –  –

Некоторые алифатические и ароматические нитрилы и амиды являются нормальными метаболитами бактерий и растений, а трансформирующие их бактерии распространены в различных типах почв. Структурнофункциональное разнообразие, распространение и роль ферментов, участвующих в этих процессах, еще недостаточно изучены и представляют интерес для фундаментальной микробиологии. В то же время микроорганизмы, способные к биотрансформации некоторых ароматических соединений, могут быть использованы для биокаталитического синтеза ценных фармацевтических препаратов, а также представляют интерес для экологической биотехнологии.

Большой интерес представляет биодеградация фенилацетонитрила и производных арилпропионовой кислоты предшественников соединений, являющихся основой нестероидных противовоспалительных средств (ибупрофен, кетопрофен и др.).

Цель работы – выделение и идентификация почвенных бактерий, трансформирующих фенилацетонитрил.

В ходе работы было проанализировано 6 различных типов почв умеренной и степной зоны России. Выделение культур проводилось методом прямого высева на селективные среды и накопительной культуры. Для выделения и выращивания бактерий была использована синтетическая среда N (солевая основа). Агаризованную среду получали добавлением бакто-агара (Sigma) до конечной концентрации 1,5 %. В качестве субстратов использовали ацетонитрил (10мМ), ацетамид (10мМ) и фенилацетонитрил (10мМ).

Учитывали общее количество гетеротрофных бактерий и количество микроорганизмов, трансформирующих нитрилы и амиды в 1 г. почвы (в пересчете на сухой вес). Наибольшее число гетеротрофов было обнаружено в почве С-2 (солончак) – 6,471010 КОЕ на 1 г сухой почвы (табл. 2). Установлено, что ацетамид-утилизирующие бактерии также наиболее распространены в солончаке – 3,11107 КОЕ/г сухой почвы. Ацетонитрил активно использовали бактерии дерново-луговой почвы с повышенным увлажнением (П27) – 3,08107 КОЕ/г сухой почвы. Фенилацетонитрил утилизировали 4,96% бактерий от общего числа гетеротрофов в почве П26.

В результате проведенного отбора всего было выделено 230 штаммов, утилизирующих алифатические и ароматические азотсодержащие соединения, из них 91 штамм выделен на ацетонитриле, 96 – на ацетамиде и 43

– на фенилацетонитриле. Однако активность на акрилонитриле более 1,5 мкмоль/мг/мин проявляли 21, 11 и 7 штаммов соответственно, из них 16 культур обладали активностью 2 и более мкмоль/мг/мин. Максимальную активность, 20 мкмоль/мг/мин, проявлял штамм №105.

По совокупности морфологических признаков, результатов теста с КОН, метода окраски по Граму, стандартных хемотаксономических и биохимических признаков, а также ПЦР-анализа установлено, что ацетонитрилутилизирующие штаммы микроорганизмов на 76% представлены грамположительными бактериями, главным образом, актинобактериями рода Rhodococcus, ацетамид-утилизирующие – на 64% грамотрицательными аэробными бактериями. Более 56% фенилацетонитрил-утилизирующих культур составляли представители рода Rhodococcus, преимущественно R. erythropolis.

Таким образом, из почвенных образцов выделены культуры бактерий, трансформирующие фенилацетонитрил, обладающие нитрилгидратазной активностью более 2 мкмоль/мг мин.

Работа поддержана ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России на 2009 - 2013 годы»

(ГК№ 02.740.11.0078) и ВЦП «Развитие научного потенциала высшей школы (2009–2010 годы)».

–  –  –

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

Мордовский государственный университет имени Н.П. Огарева, Саранск, i.v.egorova@yandex.ru Загрязнение окружающей среды тяжелыми металлами возрастает с каждым годом, и решение этой экологической проблемы становится не просто актуальным, но жизненно необходимым. Поступление тяжёлых металлов (ТМ) в окружающую среду оказывает негативное воздействие на почвы и растения и представляет угрозу для здоровья человека. В сельском хозяйстве это отражается на качестве продукции и в снижении её выхода и накопление ТМ нередко достигает опасного для людей и животных уровня. Поступившие в организм ТМ выводятся очень медленно, и небольшое их поступление может вызвать кумулятивный эффект. Одним из наиболее токсичных для растений тяжелым металлом является медь. Высокие концентрации меди приводят к торможению фотосинтеза, синтеза пигментов, повреждению мембран, нарушению обмена веществ, и в конечном итоге – гибели растений. Культура in vitro дает возможность изучения влияния стрессовых факторов на растение на клеточном уровне. Однако работ по действию ТМ на культуры растительных клеток очень немного, в отличие от опытов по влиянию ТМ на растения in vivo. В связи с этим необходимо детальное изучение устойчивости растений in vivo и культур клеток in vitro к ТМ с последующей разработкой способов повышения металлоустойчивости. Исследования проводились на 7-дневных проростках и 5-недельной каллусной культуре гипокотильного происхождения. Для работы использовалась соль CuSO45H2O в конценрациях 10 мкМ, 0,1 мМ, 1 мМ. При анализе действия различных концентраций Cu2+ на активность каталазы в листьях редиса и каллусах выявлено, что все исследованные дозы металла достоверно повышали активность фермента. Активность СОД также достигала наибольшего значения в варианте с добавлением в среду 10 мкМ CuSO4. У растений редиса с повышением дозы меди в среде активность СОД снижалась. В то же время в каллусах редиса активность СОД резко и почти линейно снижалась при увеличении концентрации CuSO4. Это может указывать на быстрое развитие окислительного стресса в клетках каллусной ткани, особо выраженного при высоких концентрациях ТМ. При изучении АПО в растениях редиса выявлена зависимость активности фермента от концентрации металла – она резко возрастала при концентрации 10 мкМ и затем снижалась с увеличением концентрации CuSO4. Активность АПО в каллусе редиса возрастала по сравнению с контролем при всех изученных концентрациях ионов Cu2+. При изучении зависимости скорости генерации супероксидного анион-радикала от содержания ионов Cu2+ в среде можно судить, что уровень АФК возрастал относительно контроля во всех вариантах опыта. Очевидно, что все концентрации тяжелого металла (меди) индуцировали возникновение окислительного стресса у растений редиса. Скорость генерации О2 в каллусе редиса возрастала относительно контроля при двух концентрациях меди и была наибольшей при концентрации 10 мкМ. При изучении интенсивности ПОЛ выяснено, что ионы Cu2+ не оказали значительного отрицательного влияния на культуру клеток. Это позволяет сделать выводы о том, что ионы Cu2+ оказывают более сильное влияние на проростки, чем на каллусные культуры. Возможно, это связано с отсутствием дальнего транспорта ионов меди, как это происходит в целом растении; отсутствием надклеточного уровня регуляции, на который влияют ионы Cu2+;

отсутствием тканей, избирательно поглощающих тяжелые металлы; а также может быть связано с результатом адаптации на клеточном уровне к избыточным дозам тяжелых металлов в среде, что возможно использовать при скрининге форм растений на устойчивость к ТМ.

БИОКАТАЛИТИЧЕСКИЙ СИНТЕЗ

ОПТИЧЕСКИ АКТИВНЫХ АРИЛАЛКИЛСУЛЬФОКСИДОВ

–  –  –

Оптически активные органические сульфоксиды находят широкое применение в химической и фармацевтической практике. Интерес к ним обусловлен высокой реакционной способностью и возможностью последующего удаления RS(O)-содержащих медиаторов в реакциях циклоприсоединения, альдольной конденсации, присоединения по Михаэлю и др. Ранее нами было показано, что в ростовых условиях актинобактерии рода Rhodococcus катализируют энантиоселективное окисление модельного фенилметилового сульфида (тиоанизола) в соответствующий сульфоксид с высокой оптической чистотой. При этом из Региональной профилированной коллекции алканотрофных микроорганизмов ИЭГМ УрО РАН был отобран штамм R. rhodochrous ИЭГМ 66, характеризующийся оптимальными выходом и оптической чистотой целевого сульфоксида (продолжительность биотрансформации 5 сут при условии добавления 0,5 г/л тиоанизола через 2-е сут после начала инкубации).

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

Цель настоящего исследования – разработка эффективного биокатализатора процесса окислительной биоконверсии прохиральных органических сульфидов на основе иммобилизованных клеток алканотрофных родококков.

Изучено влияние на окислительную активность родококков: концентрации сульфида и времени его внесения в среду, источника углерода и энергии, кислотности среды, температуры, режима аэрации и продолжительности процесса биотрансформации. Установлено, что в присутствии 0,1 об.% н-гексадекана при pH = 8,0 и 28oC биоконверсия 0,5 г/л тиоанизола в соответствующий (S)-сульфоксид протекает с химическим выходом 92% и оптической чистотой 82,4% за 4 сут при условии добавления тиоанизола через 2-е сут после начала инкубации.

В связи с тем, что использование более высоких концентраций тиоанизола приводит к подавлению сульфидокисляющей активности родококков, для оптимизации процесса биоконверсии тианизола использовали клетки родококков, иммобилизованные в криогель на основе поливинилового спирта. Данный прием позволил сократить продолжительность процесса окисления и при условии одновременного введения биокатализатора и тиоанизола достичь полной биоконверсии сульфида (0,5 г/л) в сульфоксид в течение 24 ч или в условиях повышения концентрации тиоанизола до 1,5 г/л получить целевой сульфоксид за 3-е сут.

Эффективность биокатализатора подтверждена в реакциях биотрансформации гомологов тиоанизола – фенилэтил-, пара-толилметил- и бензилметилсульфидов. Согласно данным хромато-масс-спектрометрии, иммобилизованные клетки R. rhodoсhrous ИЭГМ 66 катализируют направленное окисление исследуемых арилалкилсульфидов в целевые сульфоксиды с оптической чистотой: фенилэтилсульфоксид – 64,7%, паратолилметилсульоксид – 74,3%, бензилметилсульфоксид – 83,1%) Работа поддержана грантом программы фундаментальных исследований президиума РАН «Биологическое разнообразие» и грантом РФФИ № 10-04-96032.

.

ВЛИЯНИЕ МЕТАЛЛОВ НА АКТИВНОСТЬ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ

-ГЛЮКОЗИДАЗЫ РАСТЕНИЙ ГОРОХА

–  –  –

Воронежский государственный педагогический университет, Воронеж, oks-bar@mail.ru Для бактериальных и грибных -глюкозидаз (ЕС 3.2.1.21) было показано, что кроме гидролитического расщепления -гликозидной связи в алкил- или арилгликозидах, они участвуют и в реакции трансгликозилирования в присутствии различных спиртов. Реакции трансгликозилирования заканчивается синтезом новых сахаридов и арилгликозидов. Спирты, как более хорошие нуклеофилы, чем вода, участвуют в реакциях трансгликозилирования, что приводит к увеличению темпа расщепления гликозида и образованию новых гликозидных связей. Для растительных -глюкозидаз такие исследования мало проводились. Ранее нами были исследованы субстратная специфичность цитоплазматической -глюкозидазы растений гороха, определено влияние разных двух- и трехвалентных металлов, а также ингибиторов (р-CMB, ДЭПК, азид натрия, фторид натрия) на активность фермента для выявление каталитически активных групп. Изучали влияние спиртов на активность цитоплазматической формы фермента в реакционной системе рНФГ – спирт, используя бутанол, этанол, пропанол. Объектом исследования служили листья 10-дневных проростков гороха (“Рамонский 77”), выращенных методом гидропоники на свету. С использованием методов дифференциального центрифугирования, высаливания сульфатом аммония, очистки на G-25 и G-100 получили высокоочищенную форму фермента с удельной активностью 422,9 ФЕ /мг белка. Реакционная среда содержала фосфатноцитратный буфер (0,2 М) рН 5,2, -глюкозидаза и субстрат (р-НФГ), при этом в среду инкубации фермента вносили и исследуемые спирты в концентрациях 0,5-2,5 М. Скорость возможного трансгликозилирования оценивали, сравнивая скорость работы -глюкозидазы в среде без спиртов и в их присутствии. Активность глюкозидазы определяли по количеству отщепившегося р-нитрофенила при =440 нм. За единицу активности фермента принимали то его количество, которое катализировало расщепление 1 мкмоль субстрата в мин. при 37°С. Белок определяли по методу Lowry. Обнаружили, что увеличение активности фермента вызывало присутствие спирта пропанола в инкубационной среде (на 40%), в концентрации 0,5 М. Этанол в той же концентрации увеличивал активность на 30 %, но с увеличением концентрации спирта активность фермента несколько падала. Бутанол в концентрации 0,5-2,5 М не вызывал изменения активности цитоплазматической глюкозидазы растений гороха. Проведенные опыты впервые показали возможность протекания реакции трансгликозилирования под действием -глюкозидазы растений гороха, что приводит к накоплению соответствующих глюкозидов. Это вероятно может играть важную роль в процессах адаптации растений, связанных с детоксикацией накапливающихся в клетках спиртов в качестве конечных продуктов соответствующих метаболических путей.

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

ВЛИЯНИЕ РАЗНЫХ ШТАММОВ ЭНДОСИМБИОТИЧЕСКИХ БАКТЕРИЙ WOLBACHIA НА УРОВЕНЬ

АПОПТОЗА В ГЕРМАРИИ ЯИЧНИКОВ DROSOPHILA MELANOGASTER

–  –  –

Эндосимбиотические бактерии Wolbachia широко распространены среди беспозвоночных и вызывают у них изменения репродуктивных функций, такие как цитоплазматическая несовместимость, феминизация, партеногенез и андроцид. Передача бактерий Wolbachia у насекомых происходит через цитоплазму яйцеклеток самок, поэтому изучение степени влияния эндосимбионтов на процесс оогенеза хозяина относится к актуальным вопросам биологических исследований. Известно, что в яичнике плодовых мушек Drosophila melanogaster имеются две контрольные точки (check point), в которых может происходить апоптоз. Одна находится в гермарии (район 2), а вторая приходится на 7-8 стадию оогенеза.

Целью настоящей работы было выяснить возможность влияния бактерий Wolbachia на эффективность прохождения клетками контрольной точки в гермарии (район 2) яичников D. melanogaster. Для исследования этого вопроса были выбраны бактерии Wolbachia двух разных штаммов: wMel и wMelPop. Бактерии первого штамма не влияют на продолжительность жизни хозяина, и присутствуют в репродуктивных органах и мальпигиевых сосудах. Бактерии штамма wMelPop снижают продолжительность жизни насекомых, и обнаруживаются не только в тканях репродуктивных органов, но и в мышцах, сетчатке глаза и клетках мозга.

Для оценки количества гермариев, в которых присутствуют цисты с клетками, подвергшимися апоптозу, яичники окрашивали акридиновым оранжевым. Дополнительно проводили исследования с использованием электронного микроскопа. Установлено, что количество гермариев с гибнущими клетками не изменяется в яичниках мух, инфицированных Wolbachia штамм wMel, по сравнению с яичниками неинфицированных мух. В то же время, в яичниках мух, инфицированных Wolbachia штамм wMelPop, количество гермариев, в которых присутствуют цисты с гибнущими клетками, значительно увеличено (81,05±1,13%) по сравнению с неинфицированными мухами (38,24±1,4%). Электронно-микроскопическое исследование показало, что в большинстве гермариев у инфицированных бактериями штамма wMelPop мух присутствуют клетки на разных стадиях гибели. В апоптозных тельцах, образующихся при фрагментации клеток, обнаруживалось большое количество бактерий. Таким образом, присутствие Wolbachia штамма wMel не изменяет количество гермариев с гибнущими клетками, тогда как присутствие бактерий штамма wMelPop увеличивает этот показатель в два раза.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что исследованные штаммы Wolbachia оказывают различное влияние на морфофункциональное состояние клеток гермария, необходимое для успешного прохождения первой контрольной точки.

Работа поддержана Программой фундаментальных исследований Президиума РАН «Биологическое разнообразие» №23.30 и грантом РФФИ № 09-04-00872-а.

ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНОЙ КОНЦЕНТРАЦИИ НЕФТИ НА

АНТАГОНИСТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ МИКРОМИЦЕТОВ.

–  –  –

Удмуртский государственный университет, Ижевск, magradze@udm.net Актуальность: загрязнение окружающей среды нефтью и нефтепродуктами до сих пор остается актуальной проблемой. Попадая в почву углеводороды нефти оказывают существенное негативное влияние на биологические свойства почвы и условия обитания живых организмов. Одним из основных компонентов почвенного биогеоценоза являются микроскопические грибы. Они чувствительны к изменению свойств почвы и могут служить индикаторами ее состояния. Микромицеты находятся в тесной взаимосвязи и взаимодействии с другими организмами.

Цель работы: изучение антагонизма микромицетов, выращенных на различной концентрации нефти, к микроорганизмам.

Материалы и методы: работа велась с тремя видами грибов. Для их культивирования использовали среду Чапека, где вместо сахарозы, выступающей в качестве источника углерода, брали различные концентрации нефти (5%,8%,10%). Для контрольного варианта использовали стандартную среду Чапека.

Культивировали грибы на субстрате с нефтью при температуре 24±2С. Через 5 и 10 дней ставили антагонизм с микроорганизмами методом агаровых блоков. По истечении суток определяли наличие зоны стерильности.

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

Результаты: через 5 и 10 дней роста при 5% и 8% нефти зона стерильности существенно не отличается у всех трех видов, а при 10% она отсутствует. В контрольном же варианте зона стерильности после 10 дней роста увеличивается в 1,5-2 раза.

Вывод: в ходе эксперимента выявлено - чем выше концентрация нефти, тем меньше проявляются антагонистические свойства микромицетов.

СОЗДАНИЕ МОДЕЛЬНЫХ ШТАММОВ ФИТОПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ, ЭКСПРЕССИРУЮЩИХ

ГЕН ЗЕЛЁНОГО ФЛУОРЕСЦИРУЮЩЕГО БЕЛКА ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ МИКРОБНО-РАСТИТЕЛЬНЫХ

ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ.

–  –  –

Проблема взаимодействия микроорганизмов и растений становится весьма актуальной в последнее время и привлекает пристальное внимание исследователей в различных областях биологической науки. Возможность контроля этого процесса представляется весьма интересной с научной точки зрения задачей и открывает перспективы в практическом плане, позволяя добиваться повышения продуктивности сельскохозяйственных растений, а также эффективности в борьбе с различными их заболеваниями. Поставленная задача предполагает наиболее углубленное изучение различных этапов микробно-растительных взаимодействий. В этом смысле особую важность для изучения особенностей распространения и локализации микроорганизмов в организме хозяина, непосредственного мониторинга динамики численности микробной популяции приобретает возможность визуализации бактерий различных таксономических групп при помощи флуоресцирующих белков.

Эффективная экспрессия генов флуоресцирующих белков в различных микроорганизмах возможна при использовании промоторов, узнаваемых РНК-полимеразами данных бактерий и векторных плазмид, поддерживаемых их системой репликации. В настоящей работе в качестве объекта исследований были выбраны широко распространенные и наиболее изученные фитопатогенные бактерии Erwinia carotovora ssp. carotovora и Agrobacterium tumefaciens. Первый фитопатоген вызывает у растений мягкие гнили, второй – образование корончатых галлов. В качестве репортёрного гена использовался ген зелёного флуоресцирующего белка, egfp.

Создан ряд плазмид, в которых ген egfp был поставлен под различные промоторы: промотор PCH, выделенный из геномной ДНК Erwinia herbicola, промотор PGM гена фосфоглюкомутазы агробактерий и промотор фага T7.

Фаговый промотор был использован в качестве отрицательного контроля, поскольку он не функционирует в отсутствии РНК-полимеразы этого же фага. Плазмиды, предназначенные для введения в клетки эрвиний и кишечной палочки, были сконструированы на основе вектора pET28b, а для трансформации агробактерий была использована плазмида pSS, применяемая в качестве вектора для переноса генетического материала из агробактериальной клетки в геном растений. Созданными генетическими конструкциями трансформировали клетки A. tumefaciens, E. carotovora и E. coli. Характерной чертой полученных трансформантов являлась различная функциональная активность использованных промоторов в клетках бактерий различных видов, что свидетельствует о видоспецифичности бактериальных промоторов. Так, флуоресценция агробактерий наблюдалась лишь при использовании промотора PGM. Промотор PCH проявлял активность как в клетках эрвиний, так и в клетках кишечной палочки, поскольку эти бактерии относятся к одному семейству микроорганизмов. Таким образом, были получены штаммы фитопатогенов, экспрессирующие репортерный ген зелёного флуоресцирующего белка. Эти штаммы могут быть использованы для дальнейших исследований с целью отработки методики мониторинга микробно-растительных взаимодействий и изучения особенностей функционирования патогенных микроорганизмов в условиях in planta. Планируется также создание штаммов симбиотических бактерий, экспрессирующих флуоресцентные белки, для исследования характера взаимодействий микроорганизмов в рамках более широкой многокомпонентной системы.

РАЗНООБРАЗИЕ СОДЕРЖАНИЯ ОТДЕЛЬНЫХ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ В РАСТЕНИЯХ

ПОДСЕМЕЙСТВА БРУСНИЧНЫЕ (Vaccinioideae)

–  –  –

Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Н. Новгород, Dikech@mail.ru

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

Растения подсемейства брусничные (Vaccinioideae) являются довольно распространенной группой растений.

Считается, что ягоды брусничных полезны для здоровья в силу содержания в них большого количества антиоксидантов, в том числе фенольной природы. Фенольные соединения (ФС) растений имеют разнообразное строение, поэтому был использован метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), с помощью которого возможна быстрая, высокоточная идентификация веществ различной природы.

Целью данной работы являлось определение содержания отдельных представителей ФС методом ВЭЖХ в листьях и ягодах растений подсемейства брусничные (Vaccinioideae). Объектами исследования служили листья и ягоды растений голубики щитковой (Vaccinium corymbosum), Г. узколистной (V. angustifolium), Г. черноплодной (V. artrococcum), черники кавказской (V. arctostaphylos), клюквы болотной (Oxycoccus palustris.), К.

крупноплодной (Oxycoccus macrocarpus – сортов Ранний Черный, Стивенс и Ховес), культивируемые в Ботаническом саду ННГУ и Г. лесной (V. uliginosum), Ч. обыкновенной (V. myrtillus), брусники (V. vtis-idaa), произрастающих в лесных массивах Нижегородской области. Анализ содержания фенольных соединений проводили методом градиентной обращено-фазовой ВЭЖХ. Система растворителей состояла из: фазы А (ацетонитрил-вода-уксусная кислота 50-50-2,5), фазы В (вода-уксусная кислота 100-2,5). Детектирование проводили спектрофотометрическим детектором одновременно при длинах волн 254 и 340 нм. В качестве метчиков использовались галловая, хлорогеновая, кофейная, ванилиновая, р-кумаровая, о-кумаровая, эллаговая, феруловая кислоты, эскулин, кумарин, рутин, морин, кверцитин. Кроме того, проводился количественный анализ содержания ФС с помощью реактива Фолина-Дениса.

Согласно полученным результатам брусничные содержат довольно большое количество ФС, а именно листья растений содержат растворимых ФС от 29,5 до 157,3 мг/г сырого веса, а ягоды от 5,3 до 18,8 мг/г сыр. в.

Наибольшее количество ОРФС в листьях определили у Г. узколистной и Ч. обыкновенной, а наименьшее количество – у Г. черноплодной и К. болотной. В ягодах же наибольшее количество ФС оказалось у Ч.

обыкновенной и брусники, а наименьшее – у Г. черноплодной.

Наибольшее число исследуемых ФС содержат листья К. крупноплодной (особенно растения сорта Ховес – 12 из 14 определяемых ФС, отсутствуют галловая кислота и эскулин) и брусники (11 из 14 ФС, отсутствуют галловая кислота, кумарин, кверцитин). В Ч. обыкновенной обнаружена большая часть определяемых ФС, причем она отличается от других анализируемых растений своеобразным набором фенолов, в частности, наличием большей части флаваноидов. Если же судить по площади пиков на хроматограммах, то прослеживается следующая закономерность: для всех видов черник и голубик характерно преобладание хлорогеновой кислоты, а для брусники и клюкв свойственно наличие феруловой и о-кумаровой кислот. Среди видов голубик наиболее «богатым» растением оказалась Г. узколистная (9 из 14 ФС, в том числе морин и кумарин, не встречающиеся у других голубик). Особенно «бедной» оказалась Г. черноплодная (5 из 14 ФС).

В целом можно заключить, что наиболее часто встречающимся соединением в растениях подсемейства Брусничные являются: хлорогеновая, кофейная и элаговая кислоты (обнаружены в большинстве растений, кроме к. крупноплодной с. Стивенс). Наиболее редко встречающиеся (а также дающие небольшие пики на хроматограммах): галловая кислота, кумарин; флаваноиды: морин, рутин, кверцитин. Последние соединения обнаружены только у клюквы, брусники, черники, г. узколистной.

ВЛИЯНИЕ ЭКЗОГЕННОГО ДОНОРА NO И ИЗМЕНЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ИОНОВ КАЛЬЦИЯ НА

ТРАНСПОРТНУЮ АКТИВНОСТЬ ПРОТОННЫХ ПОМП ТОНОПЛАСТА В ОНТОГЕНЕЗЕ И ПРИ

ГИПЕРОСМОТИЧЕСКОМ СТРЕССЕ.

Колесникова Е.В., Озолина Н.В., Нурминский В.Н., Нестеркина И.С., Дударева Л.В., Саляев Р.К.

Сибирский институт физиологии и биохимии растений СО РАН, Иркутск, ozol@sifibr.irk.ru Одной из важнейших проблем современной биологии является расшифровка механизмов ответа организмов на изменение условий их существования. Все адаптивные события при стрессе запускаются с помощью определенных сигнальных молекул, вызывающих существенные изменения в физиологических процессах, протекающих в клетке. Зависимость функционирования основных компонентов мембранных транспортных систем от влияния сигнальных молекул практически не исследовалась. Поэтому проводилось изучение изменения транспортной активности протонных помп тонопласта под влиянием экзогенного донора оксида азота и изменения концентрации ионов кальция по отдельности и совместно на разных фазах онтогенеза и при гиперосмотическом стрессе. Полученные данные позволяют сделать вывод о том, что оксид азота и ионы кальция могут оказывать влияние на активность транспортных процессов на тонопласте, причем значительно активнее в период роста и накопления метаболитов. При гиперосмотическом стрессе Н+-пирофосфатаза играет более важную роль по сравнению с Н+-АТФазой, поскольку ее активность увеличивалась в 2.3 раза, тогда как активность Н+-АТФазы почти не менялась. Н+-пирофосфатаза более интенсивно реагировала на присутствие экзогенного оксида азота и изменения концентрации ионов кальция. Влияние оксида азота на протонные помпы

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

тонопласта менялось при изменении концентрации ионов кальция, который, вероятно, является медиатором действия NO.

ОСОБЕННОСТИ СТРУКТУРООБРАЗОВАНИЯ АЛЬБУМИНОВЫХ БЕЛКОВ СЕМЯН ЛЬНА НА

ГРАНИЦЕ РАЗДЕЛА ВОДА-ВОЗДУХ

–  –  –

В связи с недостаточной изученностью структуры и свойств тонких поверхностных слоев белков цель данной работы – изучение комплекса физико-химических характеристик альбуминов семян льна. Объектами работы были выбраны семена травянистого однолетнего растения льна долгунца сорта “Томский-10”. В процессе выделения и очистки белков альбуминов из гомогената семян льна нами сочетались методы гомогенизации, экстракции и фракционирования. Количественное содержание альбуминов определяли двумя независимыми методами: биуретовой реакции и УФ-спектроскопии. Для установления и подтверждения гомогенности, а также определения молекулярной массы альбуминов семян льна использовали современный физико-химический метод разделения биоорганических молекул – метод зонального электрофореза в ПААГе. Для этого проведено электрофоретическое разделение белков-маркеров: сывороточного альбумина человека (Mr 45000), алкогольдегидрогеназы (Mr 122000) и пероксидазы хрена (Mr 20000). Определили и рассчитали с использованием калибровочной кривой молекулярную массу альбуминов семян льна, составляющую 82000±5700. Метода максимального давления пузырька изучали поверхностную активность альбуминов семян льна. Получили зависимость поверхностного натяжения от концентрации при варьировании ионной силы водного раствора белка. При увеличении концентрации NaCl молекулы альбумина «разбухают», снижается доля электростатических взаимодействий, стабилизирующих нативную белковую макромолекулу. Это ведет к уменьшению адсорбционной способности альбуминовых белков льна, что и наблюдали в эксперименте, а именно, смещение изотерм поверхностного натяжения вверх. Установили, что при увеличении ионной силы от 0 до 0,3 М изотермы поверхностного натяжения веерообразно поднимаются вверх, а изотермы адсорбции, соответственно, снижаются. Можно предположить, что это результат образования белковых ассоциатов. В литературе есть данные о способности альбуминовых молекул к ассоциации в этих условиях. Подтверждено образование ассоциатов альбуминовых белков льна методом электронной микроскопии. Далее, были рассчитаны адсорбционные характеристики: максимальная адсорбция (Гmax), площадь, приходящаяся на молекулу (Sмол) и толщина адсорбционного слоя (h), – которые позволили построить молекулярные модели структуры адсорбционного слоя из альбуминовых белков и подтвердить ее с использованием метода электронной микроскопии.

«СИМБИОТИЧЕСКИЕ» ИСКУССТВЕННЫЕ БИОПЛЕНКИ

–  –  –

Казанский государственный университет, Казань, Svetaka14@gmail.com Нами созданы искусственные свободно плавающие биопленки различной морфологии, состоящие из клеток Trichoderma asperellum, Saccharomyces cerevisiae, Chlorella sp. Также в создании таких «биопленок» были использованы различные полиэлектролиты: – полиаллиламин гидрохлорид, полистиренсульфонат, карбоксиметил целлюлоза, дезоксирибонуклеиновая кислота.

Целью данной работы является создание искусственных биопленок, одной из особенностью которых является свободное нахождение в растворе, т.е. они не прикреплены к поверхности.

Задачи, поставленные в работе:

Создание искусственной биопленки.

1.

Проверка жизнеспособности клеток в составе «биопленки».

2.

Характеристика полученных пленок методами оптической, электронной, конфокальной микроскопии.

3.

Основным методом создания является метод послойного нанесения, предложенный Decher еще в 90-х годах XX века. Метод послойного нанесения был открыт как инструмент для сборки полифункциональных материалов, используя покрытые полиэлектролитом искусственные поверхности. Полиэлектролитные слои строятся осаждением положительно отрицательно заряженных полиэлектролитов на заряженных поверхностях. Толщина

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

покрытия может быть контролирована на уровне нанометра, а также свойства поверхностей. Метод позволяет использовать и клетки, и коллоидные частицы.

Методика создания «биопленок» была следующей. Предварительно на поверхность стеклянной подложки были осаждены частицы карбоната кальция. Далее на поверхность модифицированной подложки были последовательно нанесены пленки полиэлектролитов, с включенным между ними слоем клеток. На заключительном этапе карбонат кальция растворили с помощью этилендиаминтетрауксусной кислотой. Таким образом, получили структурированную биопленку, состоящую из многослойных полимерных пленок и живых клеток.

Мы полагаем, что в будущем «биопленки» получат широкое распространение в создании биосенсоров на основе клеток; в промышленности - создание антикоррозийных покрытий; тканевой инженерии – искусственные ткани, импланты, пассивирование поверхности для подавления негативной реакции иммунной системы против трансплантанта; оптике; электронике.

Кроме того, внесение каких-либо частиц, например магнитных наночастиц, может способствовать их управлению путем воздействия внешнего магнитного поля. Например, нами созданы «биопленки», содержащие никелевые наночастицы, и воздействуя магнитным полем на них нам удалось осуществить перемещение «биопленок».

Таким образом, созданы планарные искусственные многоклеточные системы (биопленки), их морфология была охарактеризована методами оптической, электронной и конфокальной микроскопии и доказано, что клетки в составе полученных систем сохраняют свою жизнеспособность и способны к делению.

ВЛИЯНИЕ ЗАСОЛЕНИЯ НА СОДЕРЖАНИЕ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ И ГЛУТАТИОНА У

РАСТЕНИЙ ФАСОЛИ

–  –  –

Пермский государственный университет, Пермь, Korepanova07@mail.ru Физиология солеустойчивости, хотя и имеет давнюю историю, тем не менее, является активно разрабатываемым разделом в учении о толерантности растений к неблагоприятным факторам. При неблагоприятных условиях растения вынуждены вырабатывать способы противостояния, затрагивающие разные уровни жизнедеятельности.

Это позволяет им использовать весь имеющийся потенциал адаптационных возможностей, включая количественные и качественные характеристики отдельных звеньев метаболизма. Так, например, устойчивость к засолению определяется характером окислительно-восстановительных реакций, протекающих, в частности, с участием аскорбиновой кислоты и глутатиона, которые могут служить диагностическим показателем жизнестойкости растений в стрессовых ситуациях. В связи с этим целью нашей работы было выяснить содержание этих соединений у молодых растений фасоли в условиях засоления. Семена фасоли для проращивания рассаживались по вариантам: контроль; 0,2% раствор хлористого натрия; 0,38% раствор сернокислого натрия. Осмотическое давление растворов 0,14мПа. Анализы проводились в три срока.

Аскорбиновая кислота и глутатион являются важными компонентами антиоксидантной защиты. Они являются сильными восстановителями и могут восстанавливать -S-S- связи белков, а также функционируют как промежуточные переносчики водорода при окислении органических соединений. Как показали наши исследования, содержание обоих компонентов у растений опытных вариантов особенно в присутствии сернокислого натрия существенно увеличилось по сравнению с контролем. Величина данных показателей зависит как от скорости синтеза, так и от интенсивности расходования изучаемых соединений. Если учесть, что в условиях засоления темпы роста растений снижаются, то, очевидно, уменьшается и потребность в данных метаболитах. Кроме того, как показывают исследования, проведённые на кафедре ранее, у растений в присутствии избытка засоляющих ионов происходит снижение активности аскорбиноксидазы – фермента, разрушающего аскорбиновую кислоту. Одинаковая тенденция аскорбиновой кислоты и глутатиона в их изменении под влиянием засоления свидетельствует об их слаженной работе в стрессовых ситуациях.

ПОЛИФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ БИОКАТАЛИЗАТОРЫ НА ОСНОВЕ ИММОБИЛИЗОВАННЫХ КЛЕТОК

РОДОКОККОВ

–  –  –

Цель настоящих исследований – разработка многоцелевых устойчивых биокаталитических систем для биотрансформации гидрофобных соединений. В качестве биокатализаторов окислительной трансформации органических соединений использованы актинобактерии рода Rhodococcus, характеризующиеся высокой активностью оксигеназного ферментного комплекса. С целью стабилизации функциональной активности родококков использован прием иммобилизации. При этом адаптированы два метода иммобилизации бактериальных клеток - метод адсорбционной иммобилизации на твердых носителях и метод включения живых клеток в матрицу криогелей на основе поливинилового спирта. В качестве носителей испытаны доступные в регионе материалы на основе опилок древесных пород, куриных перьев и отходов кожевенного производства.

Для повышения сродства поверхности носителей к клеткам родококков использован прием гидрофобизации носителей с помощью Rhodococcus-биосурфактанта. Впервые с использованием сугубо физических методов профилометрии высокого разрешения с помощью интерференционного микроскопа New View 5000, Zygo, США и инфракрасной термографии с помощью камеры CEDIP Silver 450M, CEDIP Infrared Systems, Франция исследованы кинетика и термодинамика процесса адсорбции клеток родококков на поверхности твердых носителей. Определены условия монослойного распределения родококков (1,4107 клеток/см2) на поверхности носителя, обеспечивающего максимальную скорость разложения гидрофобных субстратов. В качестве гелевого носителя испытан макропористый гетерофазный криогель на основе поливинилового спирта, позволяющий осуществлять иммобилизацию клеток родококков при физиологических рН и без применения токсичных химических веществ.

В результате проведенных исследований разработаны эффективные биокаталитические системы с параметрами, отвечающими основным требованиям биотехнологии (оптимальная адсорбционная емкость, высокая каталитическая активность, способность сохранять функциональную активность в экстремальных условиях, стабильность при хранении, экологическая безопасность). С использованием полученных систем осуществлены биотехнологические процессы, как то: окисление сырой нефти (31 мг·л-1·ч-1), индивидуальных углеводородов (104 мг н-гексадекана·л-1·ч-1, 0,92 мг фенантрена· л-1·ч-1, в частности), производных фенола (116 мг парацетамола·л-1·ч-1, в частности), гетероциклических ароматических соединений (11 мг дротаверина гидрохлорида·л-1·ч-1, в частности), карбоновых кислот (130 мг бензоата натрия·л-1·ч-1, в частности), органических сульфидов (21 мг тиоанизола·л-1·ч-1, 19 мг пара-толилметилсульфида·л-1·ч-1, в частности).

Разработанные биокаталитические системы перспективны для использования в биотехнологиях по очистке нефтезагрязненных почв, а также по утилизации непригодных к медицинскому использованию лекарственных средств и получения оптически чистых сульфоксидов – интермедиатов в тонком органическом синтезе.

Работа выполнена при поддержке грантами Президента РФ «Ведущие научные школы» НШ-64403.2010.4 и ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России на 2009-2013 годы».

РЕГУЛЯЦИЯ АКТИВНОСТИ ПЕРОКСИДАЗЫ И ОКСАЛАТОКСИДАЗЫ КОРНЕЙ ПШЕНИЦЫ

ЛЕКТИНАМИ АЗОСПИРИЛЛ

–  –  –

Многие биотические и абиотические воздействия могут вызывать резкое увеличение образования растительными клетками перекиси водорода и других активных форм кислорода. Синтез перекиси водорода – один из наиболее быстрых ответов растительной клетки на индуцирующие воздействия. Считается, что основным источником перекиси водорода в клетках растений является дисмутация молекулы кислорода, катализируемая супероксиддисмутазой. Однако в последнее время большой интерес вызывают альтернативные пути образования перекиси водорода c помощью пероксидазы и оксалатоксидазы.

Для корней проростков пшеницы одним из биогенных факторов являются находящиеся в прикорневой зоне азотфиксирующие ассоциативные бактерии рода Azospirillum, стимулирующие рост и развитие растений. Было показано, что инициация взаимодействия бактерий с корнями происходит по принципу лиганд-рецепторного взаимодействия. Установлено, что со стороны азоспирилл в этом процессе, в числе других факторов, участвуют лектины, находящиеся на поверхности клетки.

Ранее с поверхности клеток Azospirillum brasilense Sp7 и его мутанта по лектиновой активности Azospirillum brasilense Sp7.2.3 были выделены лектины, являющиеся гликопротеинами с молекулярной массой 36 кDa, проявляющие специфичность к L-фукозе и имеющие структурные и антигенные различия. Было показано, что лектины азоспирилл способны не только осуществлять наряду с другими факторами адгезию бактерий к растительной клетки, но также стимулировать прорастание семян, проявлять по отношению к растительной

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

клетке митотическую и ферментмодифицирующую активности. Все эти факты позволили предположить, что лектины азоспирилл могут играть роль вещества-сигнала для растительной клетки.

Было показано, что лектины обоих штаммов во всех изучаемых концентрациях (оценивали три концентрации – 10, 20 и 40 мкг/мл) вызывали увеличение активности пероксидазы, но только в том случае, когда время выдерживания корней с лектинами составляло 20 мин (изучались временные интервалы 10 и 20 мин). Самой эффективной концентрацией для обоих лектинов явилась концентрация 40 мкг/мл. Лектин родительского штамма вызывал увеличение пероксидазной активности в большей степени, чем лектин мутантного штамма.

Также было показано, что 10-минутная обработка корней проростков растений препаратами лектинов вызывала активацию оксалатоксидазы. Лектины родительского и мутантного штамма проявляли различия. Если лектин родительского штамма при указанной экспозиции вызывал эффект при концентрации 10 мкг/мл, лектин же мутантного штамма - при 20 мкг/мл. Так, активность для родительского и мутантного штаммов составила через 8 мин после инициации реакции 11,2 ± 1,3 и 7,2 ± 0,5 ед. на 1 г сырой массы, соответственно, в контрольных проростках, т.е. не инкубированных с лектинами она была 6,0 ± 0,2 ед.

Полученные данные свидетельствуют о том, что лектины азоспирилл – бактерий, улучшающих рост и развитие растений, способны увеличивать активность ферментов, которые участвуют в образовании перекиси водорода – одной из разновидностей активных форм кислорода, и таким образом влиять на адаптационные возможности растения, не вызывая его повреждения или гибели, как это происходит под влиянием индукторов при патогенезе.

ВЛИЯНИЕ ПРЕДОБРАБОТКИ МЕТИЛЖАСМОНАТОМ НА ЛИГНИФИКАЦИЮ КЛЕТОЧНЫХ

СТЕНОК И ВЫХОД ЭЛЕКТРОЛИТОВ ИЗ ТКАНЕЙ ПРОРОСТКОВ ПШЕНИЦЫ ПРИ ЗАСОЛЕНИИ

–  –  –

Жасмоновая кислота (ЖК) и ее производное метилжасмонат (МЖ) являются эндогенными регуляторами роста и развития растений, участвующие в контроле различных физиологических процессов. Особый интерес к жасмонатам вызван обнаружением их важной роли в формировании устойчивости растений к стрессовым факторам как биотической, так и абиотической природы. Однако механизмы их защитного действия на растения пшеницы к неблагоприятным воздействиям окружающей среды пока еще недостаточно ясны. Известно, что засоление среды вызывает резкое усиление генерации активных форм кислорода, что может приводить к серьезным деструктивным последствиям, которые проявляются в нарушении целостности мембранных структур клеток и их проницаемости. Об изменении проницаемости клеточных мембран могут свидетельствовать данные анализа экзоосмоса электролитов. Также важный вклад в защите растений от поступления и распространения токсических ионов, включая и ионы Na, вносит лигнификация клеточных стенок, способствующая укреплению их барьерных свойств.

Так, цель работы состояла в анализе влияния предобработки 0.1 мкМ МЖ на лигнификацию клеточных стенок проростков пшеницы и экзосмос электролитов в норме и при натрий–хлоридном засолении.

Было показано, что в корнях контрольных растений флороглюциновая реакция на лигнин проявлялась, начиная с 5-суточного возраста. Обработка проростков 0.1 мкМ МЖ способствовала ускорению отложения лигнина в клеточных стенках – окрашивание на лигнин проявлялось уже в корнях 4-суточных растений. Инкубирование 4суточных обработанных и необработанных МЖ проростков в течение 24 часов на среде, содержащей 2% раствор хлорида натрия, приводило к накоплению лигнина в клеточных стенках центрального цилиндра корней, при этом предобработка МЖ существенно интенсифицировала этот процесс. Также обнаружили, что воздействие 2%-ного NaCl оказывает сильный повреждающий эффект на клетки, о чем судили по резкому увеличению выхода электролитов из тканей в сравнении с контролем. Тогда как предобработка МЖ в течение 24 ч оказывала явный защитный эффект на растения пшеницы при засолении, который проявлялся в существенном уменьшении стресс-индуцированного выхода электролитов. К тому же необходимо отметить, что сама по себе предобработка МЖ в течение суток не вызывала увеличения выхода электролитов, что указывает на то, что воздействие этим регулятором роста является вполне благоприятным для растений пшеницы.

Полученные нами данные свидетельствуют в пользу способности 0.1 мкМ МЖ в ходе предобработки ускорять лигнификацию клеточных стенок и снижать уровень повреждающего действия дефицита влаги на целостность мембран клеток, что вносит свой вклад в МЖ - индуцируемую устойчивость растений пшеницы к засолению.

Работа поддержана грантом Президента РФ для поддержки ведущих научных школ (НШ-915.2008.4.)

ФИЗИОЛОГИЯ РАСТЕНИЙ, МИКРОБИОЛОГИЯ

–  –  –



Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 7 |
Похожие работы:

«Сергей Ушакин (Колумбийский университет) ВМЕСТО УТРАТЫ: материализация памяти и герменевтика боли в провинциальной России Прискорбно, но память – это единственный доступный нам способ отношений с умершими. Сюзан Зонтаг1 Осенью 2001 года, во время полевого исследования в Барнауле, я взял интервью у Светланы Павлюковой, бессменной р...»

«Генрих Альтшуллер НАЙТИ ИДЕЮ Введение в ТРИЗ — теорию решения изобретательских задач 4-е издание ПАБЛИШЕРЗ Москва УДК 001.894 ББК 30у А58 Редактор Н. Величенко Альтшуллер Г. Найти идею: Введение в ТРИЗ — теорию решения изобретательских А58 задач / Генрих Альтшуллер. — 4-е изд. — М.: Альп...»

«Target Система наземного и скважинного картирования для Oasis montaj v7.2 РУКОВОДСТВО ПОЛЬЗОВАТЕЛЯ www.geosoft.com Программное обеспечение, описанное в этом руководстве, поставляется под лицензией и может использоваться или копироваться только в соответствии с условиями лицензион...»

«WWW.POWERLIFTING-KURGAN.NAROD.RU Биография. Невский Александр Александрович Родился 17 июля 1971 года в г. Москве. Семейное положение холост. Образование высшее (окончил в 1994 году Государственную Академию Управления, факультет Менеджмент в тяжелой промышленности). Спортом начал заниматься в 1986 г...»

«УЧЕНЫЕ ЗАПИСКИ КАЗАНСКОГО УНИВЕРСИТЕТА Том 155, кн. 3, ч. 2 Гуманитарные науки 2013 УДК 297.17 ВЫЗОВ МОДЕРНУ ИЗ ЦЕНТРА СТАМБУЛА: ДЖАМААТ "ИСМАИЛ АГА" В ОБЩЕСТВЕННОЙ ЖИЗНИ ТУРЦИИ И.Г. Саетов Аннотация В статье...»

«Техника 2. При одинаковом удельном давлении коэффициент трения коры по стали и резине увеличивается с увеличением влажности. Вода действует на кору как пластификатор, снижая силу сцепления между молекулами, делая кору...»

«© Современные исследования социальных проблем (электронный научный журнал), Modern Research of Social Problems, №8(40), 2014 www.sisp.nkras.ru DOI: 10.12731/2218-7405-2014-8-20 УДК 321.7 концепциЯ социалистической демократии: о...»

«ЗАО "Приднестровский Сбербанк" Договор банковского счета физического лица ЗАО "Приднестровский Сбербанк", именуемый в дальнейшем "Банк", с одной стороны, и физическое лицо, изъявившее в письменной форме согласие с условиями настоящего договора, именуемое в дальнейшем...»

«УТВЕРЖДАЮ: Первый заместитель главы администрации Колпинского района Санкт-Петербурга Н.Н. Гордей _ "13" июня 2014 года Заключение о результатах публичных слушаний Колпинский район Санкт-Петербурга Муниципальное образование город Колпино Муниципальное образование поселок Металлострой Муниципальное образование посело...»

«АВИАЦИОННЫЙ РЕМОНТНЫЙ ЗАВОД Технологии АВИАЦИОННЫМ РЕМОНТНЫЙ ЗА НОЛ О Компании Основная стратегическая цель производственной политики завода обеспечить гарантированный высокий уровень качества оказываемых услуг,...»

«t-z-n.ru Ирена Цеслиньска (Центр науки "Коперник", Варшава, 2014) Музей XXI века Первое, о чем начинаешь мечтать в большинстве музеев это чашка кофе. Сразу чувствуешь себя утомленным (Луис И. Кан) Музейные работники, занимающиеся образованием, и организаторы выставок часто работают так, как будто никогда в жизни не посещали...»

«Программа вступительных испытаний по обществознанию Общие замечания Основой данной программы служит примерная программа вступительных экзаменов по обществознанию, разработанная Минобразование...»

«И. М. Дзялошинский Информационная открытость власти как основа публичной политики Электронный ресурс URL: http://www.civisbook.ru/files/File/Dzyalosh_inf_otkr.pdf Перепечатка с сайта НИУ-ВШЭ http://www.hse.ru И. М. Дзялошинский. Информационная открытость 1 Дзялошинский И.М. Информационная открытость власти как основа публ...»

«ТЕХНОлОГИЯ КОНКУРСА ГРАНТОВ НА КОНСОлИДИРОВАННыЙ БЮДЖЕТ е ни ле комментарии в информация об организации описание кейса пакет документов ла ог специалистов в РЕГИОНАЛьНАя БЛАГОТВОРИТЕЛьНАя ОБЩЕСТВЕННАя ОРГАНИЗАцИя " А РХА Н Г Е Л ьС К И Й ц Е Н Т Р СО ц И АЛ ь Н ы Х Т Е Х Н ОЛ О Г И Й “ГА РА Н Т”" Б...»

«Цели освоения дисциплины 1. Целью освоения дисциплины "Методика профориентационной работы в образовательных организациях" формирование профессиональной готовности к деятельности по осуществлению профориентационной работы с различными категориями населения, планирования и сопровождения карьеры.Основные зада...»

«Л. Я. Ауэрман ТЕХНОЛОГИЯ ХЛЕБОПЕКАРНОГО ПРОИЗВОДСТВА И здание девятое, переработанное и дополненное Допущено Министерством образования РФ в качестве учебника для студентов вузов, обучающихся по специальности 4Технология хлеба, мучных кондитерских и макаронных из...»

«Д. Томас, Д. X. Хэнссон разработка веб-приложений в среде Rails Гибкая разработка приложений -Т. Введение в язык программирования Ruby Поддержка архитектуры AJAX и REST Соглашения п...»

«Экспертное заключение 1. ВВОДНАЯ ЧАСТЬ 1.1.1. Вопрос экспертизы. Настоящее экспертное заключение подготовлено на основании обращения от 14 марта 2016 г. на имя ректора Санкт-Петербургского государственного университета Н. М. Кропачева судьи Конституционного Суда Российской Федерации С.Д. Князева. Поводом для д...»

«Профессиональная образовательная организация частное учреждение "Автомобильно-дорожный колледж" Прием студентов "Правила приема в профессиональную образовательную организацию частное учреждение "Автомобильно-дорожный колледж" для обучения по образовательным программам среднего профессиональног...»

«Симона Пипко Балтийские ветры Свидетельство советского адвоката Xlibris corporation, 2002 Перевод с английского Рут Брашинской. ПРИБЛИЖАЯСЬ К ПЕРЕПУТЬЮ К сожалению, замужеству нигде не учат – просто мы познаем его природу через опыт и время. Так случилось и со мной. Мо...»

«Вентильные двигатели для привода подач высокоточных металлорежущих станков В.М.Гандшу В современных высокоточных металлорежущих станках и автоматизированных обрабатывающих центрах устанавливаются два или более элект...»

«ИНСТРУКЦИЯ для пользователей системы "СНГБ-Интернет" (стандартная версия) г. Сургут, 2016 Инструкция для пользователей системы СНГБ Интернет (стандартная версия) СОДЕРЖАНИЕ Раздел 1. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ Раздел 2. ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ДЛЯ КЛИЕНТА Раздел 3. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО БЕЗОПАСНОЙ РАБОТЕ В СИСТЕМЕ 3...»

«2. Базисный учебный план начального общего образования. Базисный учебный план МОУ "Гимназия №5", реализующего основную образовательную программу начального общего образования, является важнейшим нормативным докумен...»

«2 РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК Институт проблем управления им. В.А. Трапезникова Д.А. Новиков ТЕОРИЯ УПРАВЛЕНИЯ ОРГАНИЗАЦИОННЫМИ СИСТЕМАМИ Рекомендовано Редакционноиздательским советом Российской академии образования к использованию в качестве учебно-методического пособия Москва...»

«УДК 615.8 ББК 53.59 Д27 Перевод с английского Ю. Касьяновой Дейвис Дебора Цигун для женского здоровья и долголетия: Руководство для саД27 мостоятельной практики / Перев. с англ. — М.: ООО Издательство...»

«Национальная библиотека ЧР k-009857 к-009857 М Д I/ АЛЕКСЕЙ ВОРОБЬЕВ КОЛОДЦЫ Стихи и поэмы П еревод с чуваш ского "С О В Р Е М Е Н Н И К " • М ОСКВА • 1978 С (Ч ув) СТ Воробьев А. А. В75 Колодцы. Стихи и поэмы. Пер. с чу­ ваш. Вступит, статья В. К очеткова. М., "Современник", 1978. 126 с. с ил. П оэти ческо е н...»

«г. Ноябрь Том lit, вып. УСПЕХИ ФИЗИЧЕСКИХ НАУК 772.99 ДИФРАКЦИЯ СВЕТА В ТОЛСТЫХ СЛОЯХ.. Померанцев СОДЕРЖАНИЕ 1. Введение 507 2. Параметры фазовой дифракционной решетки, полученной с помощью интерференции двух...»








 
2017 www.doc.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - различные документы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.